歐易酵母文庫(kù)助力蘋果花青素合成調(diào)控機(jī)制研究。近日，山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金、由春香教授為共同通訊作者，在ThePlantJournal(IF:6.141)期刊發(fā)表了題為“JasmonateinducesanthocyaninandproanthocyanidinbiosynthesisinapplebymediatingtheJAZ1-TRB1-MYB9complex”的研究論文，報(bào)道了茉莉酸通過(guò)介導(dǎo)JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物誘導(dǎo)蘋果中花青素和原花青素的生物合成。山東農(nóng)業(yè)大學(xué)安建平博士為***作者，文章中酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物協(xié)助完成。酵母單雜交技術(shù)是在酵母雙雜基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的一種研究核酸。...

母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021年3月16日，寧波大學(xué)陳劍平院士、孫宗濤研究員為共同通訊作者，在PNAS雜志（IF:9.412）在線發(fā)表了題為“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究論文，深入報(bào)道了在不同植物RNA病毒中一種***存在的、通過(guò)劫持茉莉酸信號(hào)途徑以協(xié)同促進(jìn)病毒傳播和介體昆蟲攝食的新機(jī)制。植物病毒基因組通常*編碼少數(shù)幾個(gè)蛋白，它們必需依賴寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通過(guò)...

酵母雙雜交文庫(kù)：本研究通過(guò)7個(gè)樹齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，鑒定到一個(gè)與年齡信號(hào)***相關(guān)的基因模塊，該模塊包含33個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，包括SOC1-like、DAL1等。油松和晚坐果白皮松突變體中的基因表達(dá)模式分析顯示，PtMADS11與生殖能力之間存在緊密相關(guān)性。酵母雙雜交顯示，MADS11和DAL1直接相關(guān)作用以參與對(duì)年齡信號(hào)的調(diào)控。過(guò)表達(dá)PtMADS11、PDAL1可以部分挽救擬南芥中miR156過(guò)表達(dá)或spl突變導(dǎo)致的開花延遲缺陷。只有PtMADS11可以挽救f(wàn)t突變體中的開花缺陷，表明它與PtDAL1在擬南芥開花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮了不同的作用。專業(yè)酵母文庫(kù)構(gòu)建和篩選公司進(jìn)口試劑。廣東什么是酵母文庫(kù)...

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1 與 MdMYB9 結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結(jié)合，可以干擾其與 MdMYB9 的互作，進(jìn)而負(fù)向調(diào)控 MdTRB1 介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9 復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究 JA 對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見(jiàn)解。本研究鑒定了一個(gè)可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。使用原...

本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)篩選，繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制，以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子（PHR）為中心。PHRs 是菌根共生所必需的，通過(guò) P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達(dá)。高磷條件下，SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對(duì)菌根共生相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控，進(jìn)而抑制菌根共生。過(guò)表達(dá) OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對(duì)菌根共生的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn)，植物直接營(yíng)養(yǎng)吸收和通過(guò)菌根共生的間接營(yíng)養(yǎng)吸收，都受到相同的磷信號(hào)網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。歐易生物酵母平臺(tái)，從公司成立伊始，伴隨著公司和客戶一路成長(zhǎng)，櫛風(fēng)沐雨十多年...

酵母雙雜交文庫(kù)：本研究通過(guò)7個(gè)樹齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，鑒定到一個(gè)與年齡信號(hào)***相關(guān)的基因模塊，該模塊包含33個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，包括SOC1-like、DAL1等。油松和晚坐果白皮松突變體中的基因表達(dá)模式分析顯示，PtMADS11與生殖能力之間存在緊密相關(guān)性。酵母雙雜交顯示，MADS11和DAL1直接相關(guān)作用以參與對(duì)年齡信號(hào)的調(diào)控。過(guò)表達(dá)PtMADS11、PDAL1可以部分挽救擬南芥中miR156過(guò)表達(dá)或spl突變導(dǎo)致的開花延遲缺陷。只有PtMADS11可以挽救f(wàn)t突變體中的開花缺陷，表明它與PtDAL1在擬南芥開花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮了不同的作用。酵母三雜交酵母文庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù)。山西篩庫(kù)酵母文庫(kù)做什么通過(guò)酵...

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1 與 MdMYB9 結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結(jié)合，可以干擾其與 MdMYB9 的互作，進(jìn)而負(fù)向調(diào)控 MdTRB1 介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9 復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究 JA 對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見(jiàn)解。本研究鑒定了一個(gè)可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。酵母文...

通過(guò)酵母雙雜交進(jìn)行篩選，結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用（圖 A-C）。同樣，酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用（圖 D）。并通過(guò) pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)（圖 E-L）證實(shí) CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報(bào)道的 SWR1 復(fù)合物亞基，負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報(bào)道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-...

酵母單雜交篩選技術(shù):關(guān)于HIV想必大家都不陌生，***HIV病毒后潛伏周期長(zhǎng)，且目前沒(méi)有完全的***方法。為了徹底***HIV，不讓其發(fā)病就要從2方面入手：要么消除潛伏***的細(xì)胞，要么防止?jié)摲《镜募?xì)胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。但是關(guān)于HIV在人細(xì)胞中的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和潛伏期調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)仍不完全確定，所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個(gè)問(wèn)題，波士頓大學(xué)的研究者，使用酵母單雜交篩選技術(shù)，以HIV-1,HIV-2的LTR（啟動(dòng)子和增強(qiáng)子）為誘餌，篩選了人的轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)（包含1086個(gè)人的轉(zhuǎn)錄因子），**終繪制了調(diào)節(jié)HIV-1和HIV-2的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)圖譜，結(jié)果發(fā)表在2021年...

酵母文庫(kù):細(xì)菌鞭毛蛋白是一種重要的細(xì)菌毒力因子，可刺激動(dòng)植物細(xì)胞中的分子免疫信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。脊椎動(dòng)物識(shí)別鞭毛蛋白和建立有效免疫反應(yīng)的詳細(xì)機(jī)制已經(jīng)被揭示；然而，無(wú)脊椎動(dòng)物是否能夠識(shí)別鞭毛蛋白仍未可知。2022年1月24日，山東大學(xué)王顯偉團(tuán)隊(duì)在PLOSPATHOGENS（IF：6.823）上發(fā)表了題為“Shoc2regnizesbacterialflagellinandmediatesantibacterialErk/Statsignalinginaninvertebrate”的研究論文，揭示了MjShoc2可以與鞭毛蛋白FlaA互作，引發(fā)一系列炎癥反應(yīng)，促使對(duì)蝦抵抗細(xì)菌***，為無(wú)脊椎動(dòng)物對(duì)鞭毛蛋白的...

酵母雙雜交（Y2H）：植物轉(zhuǎn)錄因子（Plant transcripter factors， TFs）是調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育和環(huán)境適應(yīng)性的關(guān)鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫(kù)中，如RiceSRTFDB （Priya and Jain， 2013）， Ricettissuetfdb （Chen et al.，PlnTFDB （Pérez-Rodríguez et al.， 2009）和PlantTFDB （Jin et al.， 2017），可以預(yù)測(cè)水稻轉(zhuǎn)錄因子功能。但通過(guò)具體實(shí)驗(yàn)研究，來(lái)直接證實(shí)轉(zhuǎn)錄因子對(duì)植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交（Y2H）和酵母單雜交（Y1H）是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-...

酵母文庫(kù)：近日，上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物育種栽培研究所儲(chǔ)黃偉副研究員、曹黎明研究員為共同通訊作者，在Plant，Cell&Environment雜志（IF：7.228）在線發(fā)表了題為“Aconservedclathrin-coatedvesiclecomponent，OsSCYL2，regulatesplantinnateimmunityinrice”的研究論文，報(bào)道了水稻中一個(gè)被網(wǎng)格蛋白包被囊泡的一個(gè)重要組分OsSCYL2調(diào)控稻水先天免疫的分子機(jī)制。上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物所碩士研究生姚瑤和周繼華助理研究員為該論文的共同***作者。文章中酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。酵母文庫(kù)質(zhì)粒使用指南酵母菌的介紹...

酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)：為進(jìn)一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長(zhǎng)和增強(qiáng)抗旱性的分子機(jī)制，本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料，構(gòu)建了棉花干旱脅迫酵母文庫(kù)。并以GhLEA3為誘餌，采用酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)，從棉花酵母文庫(kù)中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白，并對(duì)互作蛋白進(jìn)行了GO和KEGG分析，發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號(hào)通路和cGMP-PKG信號(hào)通路，互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑，如糖原生成和代謝途徑。此外，GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)***，且在GhLEA3敲除的棉株中表達(dá)量低于野生型棉株根據(jù)每個(gè)客戶的研究目標(biāo)和內(nèi)容靈活定制研究方案。既能提供建庫(kù)...

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021 年 3 月，山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金教授為通訊作者，在 Plant Physiology 雜志（IF: 6.902）在線發(fā)表了題為“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究論文，深入探討了硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果生長(zhǎng)調(diào)控分子機(jī)制。氮素是植物生長(zhǎng)發(fā)育所必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一，硝酸鹽是植物根系吸收無(wú)機(jī)氮的主要形式。除了營(yíng)養(yǎng)功能，硝酸鹽還可以通過(guò)多種信號(hào)途徑來(lái)調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程。赤霉素（gibberelli...

進(jìn)行了酵母雙雜交文庫(kù)的篩選，結(jié)果顯示鈣依賴的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用，分段截取互作驗(yàn)證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的（圖a-b），并通過(guò)雙熒光分子互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)、BiFC、體外GST-pulldown實(shí)驗(yàn)得以證實(shí)（圖c-e）。亞細(xì)胞定位顯示SPK主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，OsNF-YB9在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá)，共表達(dá)SPK和OsNF-YB9***促進(jìn)了OsNF-YB9的入核（圖f），表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進(jìn)了OsNF-YB9從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的運(yùn)輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達(dá)，在5DAF開始***，并在10-30DAF維持高...

酵母文庫(kù)篩選：為了系統(tǒng)地揭示調(diào)控叢枝菌根共生的轉(zhuǎn)錄因子，研究者以51個(gè)水稻基因的啟動(dòng)子為誘餌，利用包含1570個(gè)水稻全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄因子的文庫(kù)進(jìn)行了酵母單雜交篩選。這51個(gè)基因主要是已報(bào)道的參與或調(diào)節(jié)菌根共生的基因。文庫(kù)篩選發(fā)現(xiàn)了一個(gè)由266個(gè)轉(zhuǎn)錄因子和47個(gè)啟動(dòng)子高度連接的網(wǎng)絡(luò)，稱之為"叢枝菌根共生酵母單雜交網(wǎng)絡(luò)（YAM）"。平均每個(gè)啟動(dòng)子可以和4個(gè)轉(zhuǎn)錄因子互作。266個(gè)轉(zhuǎn)錄因子分屬至少11個(gè)轉(zhuǎn)錄因子家族。72%（192個(gè)）的YAM轉(zhuǎn)錄因子在根中存在表達(dá)（FPKM>1）。與非定殖根相比，19個(gè)YAM轉(zhuǎn)錄因子在叢枝菌根***定殖的根中表達(dá)上調(diào)。合作文章上百篇，平均影響因子高達(dá)7.124 歐易生物酵母文...

小歐從2018年即開始關(guān)注酵母雜交與高通量測(cè)序相結(jié)合的技術(shù)發(fā)展，如2017年CaoGang老師等發(fā)表的RLL-Y2H技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了文庫(kù)篩文庫(kù)可能，該技術(shù)通過(guò)對(duì)酵母雙雜常用載體的改造，并結(jié)合高通量測(cè)序，可直接獲得AD-BD互作蛋白對(duì)。所用方法相當(dāng)巧妙，感興趣的同學(xué)請(qǐng)點(diǎn)擊《當(dāng)酵母雙雜交遇到高通量測(cè)序》。鈕老師團(tuán)隊(duì)之前的研究已經(jīng)鑒定了DAL1作為一種保守的針葉樹年齡生物標(biāo)記基因，在油松從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)到生殖生長(zhǎng)的時(shí)相轉(zhuǎn)變過(guò)程中起重要作用。為了進(jìn)一步理解年齡效應(yīng)如何驅(qū)動(dòng)針葉樹的發(fā)育，闡明與DAL1相關(guān)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)很關(guān)鍵。鈕老師團(tuán)隊(duì)利用傳統(tǒng)的Y2H篩選技術(shù)結(jié)合NGS測(cè)序技術(shù)，優(yōu)化得到了Y2H-seq技術(shù)，與傳...

歐易酵母文庫(kù)助力小麥根長(zhǎng)抑制分子機(jī)制研究，近日，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者，在 Journal of Experimental Botany 雜志（IF: 6.992）在線發(fā)表了題為“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究論文，報(bào)道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長(zhǎng)的分子機(jī)制。文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物完成。根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨(dú)特***。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提...

單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導(dǎo)蘋果黃酮醇積累的關(guān)鍵性調(diào)控因子，作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌，通過(guò)酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫(kù)。結(jié)果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應(yīng)、***信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、木質(zhì)素生物合成、果實(shí)成熟發(fā)育等過(guò)程，以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中， MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子，由于其在草莓中的同源基因已被報(bào)導(dǎo)與黃酮的合成有關(guān)，引起了研究者的注意。進(jìn)一步通過(guò)Y1H assay驗(yàn)證確認(rèn)了MdSCL8可以與MdFLS1啟動(dòng)子互作（圖2A）。通過(guò)雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)和GUS檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負(fù)向調(diào)控MdFLS1...

酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)表明，PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用（圖 C），并通過(guò) BiFC、GST pull-down 得以證實(shí)（圖 D-E）。為進(jìn)一步研究在年齡信號(hào)調(diào)控中的作用機(jī)制，分別構(gòu)建了過(guò)表達(dá)PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對(duì)照相比，過(guò)表達(dá)PtDAL1***提前了擬南芥的營(yíng)養(yǎng)-生殖時(shí)相轉(zhuǎn)換（圖A），證實(shí)PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過(guò)表達(dá)PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過(guò)早終止，表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運(yùn)起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點(diǎn)關(guān)鍵基因突變體進(jìn)行功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示...

歐易生物酵母平臺(tái)，從公司成立伊始，伴隨著公司和客戶一路成長(zhǎng)，櫛風(fēng)沐雨十多年。不僅積累了沉甸甸的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)，獲得了眾多客戶認(rèn)可，協(xié)助客戶發(fā)表Cell、Science 等前列期刊雜志。更值得驕傲的是，我們幫助了國(guó)內(nèi)眾多實(shí)驗(yàn)室，從無(wú)到有建立起了酵母雜交體系，對(duì)基礎(chǔ)科研貢獻(xiàn)了自己的一份力量。**值得欣喜的是，不斷有人從我們的酵母產(chǎn)品用戶成為了歐易大家庭的一員，流年笑擲，未來(lái)可期，我們一起攜手繼續(xù)做更走心的科研服務(wù)。歐易生物酵母平臺(tái)，從公司成立伊始，伴隨著公司和客戶一路成長(zhǎng)，櫛風(fēng)沐雨十多年。不僅積累了沉甸甸的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)，獲得了眾多客戶認(rèn)可，協(xié)助客戶發(fā)表Cell、Science 等前列期刊雜志。更值得驕傲的是...

酵母單雜交篩選：（4）在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中，***GL1促進(jìn)HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達(dá)，并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中，***GL1過(guò)表達(dá)后，與LTR連接的螢火素酶表達(dá)上升近2倍，說(shuō)明***GL1是一個(gè)轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是，文章的背景介紹內(nèi)容中，對(duì)應(yīng)用其他技術(shù)（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）對(duì)HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析，發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見(jiàn)解，但并沒(méi)有直接評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對(duì)酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)...

通過(guò)傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng)，以PtDAL1為誘餌，篩選樣本來(lái)源于不同年齡段的油松cDNA文庫(kù)。將獲得的陽(yáng)性克隆，10個(gè)一組，挑選到1個(gè)96孔板的PCR板孔中，獲得10*96個(gè)陽(yáng)性克隆的96孔板。以其中陽(yáng)性克隆mix為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物，進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測(cè)序文庫(kù)，通過(guò)NGS測(cè)序，獲得6G的陽(yáng)性克隆數(shù)據(jù)。通過(guò)分析二代測(cè)序數(shù)據(jù)，獲得陽(yáng)性克隆基因信息（去冗余后獲得135個(gè)互作子，包含21個(gè)TFs，2個(gè)TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白，部分見(jiàn)表1）。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對(duì)一驗(yàn)證（圖2）。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對(duì)分...

目前，歐易生物負(fù)責(zé)該水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)的維護(hù)和保存工作，并對(duì)廣大水稻科研工作者提供轉(zhuǎn)錄因子篩選服務(wù)。如去年歐易生物助力中國(guó)科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心的王二濤老師應(yīng)用該文庫(kù)對(duì)水稻-叢枝菌根進(jìn)行了深入研究，成功構(gòu)建了水稻-叢枝菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表，該文庫(kù)已收錄了1683個(gè)水稻轉(zhuǎn)錄因子，隸屬于54個(gè)家族，覆蓋預(yù)測(cè)的水稻轉(zhuǎn)錄因子總量的70%。文庫(kù)中水稻轉(zhuǎn)錄因子的a基因信息來(lái)源于PlantTFDB和KOME數(shù)據(jù)庫(kù)。文庫(kù)載體使用pGADT7，酵母菌株使用Y187，每一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子菌株**保存于96孔板中。酵母文庫(kù)雙雜交技術(shù)及應(yīng)用。北京宣傳酵母文庫(kù)做什么酵母單雜交篩選技...

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021 年 3 月，山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金教授為通訊作者，在 Plant Physiology 雜志（IF: 6.902）在線發(fā)表了題為“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究論文，深入探討了硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果生長(zhǎng)調(diào)控分子機(jī)制。氮素是植物生長(zhǎng)發(fā)育所必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一，硝酸鹽是植物根系吸收無(wú)機(jī)氮的主要形式。除了營(yíng)養(yǎng)功能，硝酸鹽還可以通過(guò)多種信號(hào)途徑來(lái)調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程。赤霉素（gibberelli...

酵母單雜交結(jié)果顯示，磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子OsPHR1/2/3可以***51個(gè)目標(biāo)啟動(dòng)子中的25個(gè)，包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以調(diào)控許多菌根共生相關(guān)基因的表達(dá)（圖A）。對(duì)叢枝菌根共生響應(yīng)基因啟動(dòng)子序列預(yù)測(cè)分析顯示，有78個(gè)轉(zhuǎn)錄因子被富集，87%的菌根共生響應(yīng)基因受到OsPHR1/2/3的調(diào)控，其中42%受到OsPHR1/2/3的直接調(diào)控。因此推測(cè)OsPHR1/2/3可能是菌根共生調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個(gè)關(guān)鍵調(diào)控樞紐（圖A-B）。EMSA和熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)證實(shí)，OsPHR12可以直接結(jié)合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT1...

本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)篩選，繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制，以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子（PHR）為中心。PHRs 是菌根共生所必需的，通過(guò) P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達(dá)。高磷條件下，SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對(duì)菌根共生相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控，進(jìn)而抑制菌根共生。過(guò)表達(dá) OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對(duì)菌根共生的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn)，植物直接營(yíng)養(yǎng)吸收和通過(guò)菌根共生的間接營(yíng)養(yǎng)吸收，都受到相同的磷信號(hào)網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。歐易生物提供的酵母雜交技術(shù)服務(wù)已經(jīng)協(xié)助科研用戶發(fā)表了Science、Cel...

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)：本研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2，它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長(zhǎng)。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)證實(shí)，MdBT2 可以與一個(gè) DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作，這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外，異源表達(dá) MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過(guò)表達(dá)所導(dǎo)致的擬南芥生長(zhǎng)抑制。綜上表明，MdBT2 可以通過(guò)降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進(jìn)硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)顯示，培養(yǎng) 45 天，蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加（圖 A-...

歐易酵母文庫(kù)助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個(gè)成員 TaSRL1，它可以調(diào)控生長(zhǎng)素生物合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和信號(hào)轉(zhuǎn)到相關(guān)基因的表達(dá)，并與生長(zhǎng)素轉(zhuǎn)運(yùn)基因 TaPIN2 啟動(dòng)子序列結(jié)合促進(jìn)其表達(dá)，進(jìn)而抑制根的生長(zhǎng)。此外，TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用，破壞 TaSRL1 對(duì) TaPIN2 表達(dá)的促進(jìn)作用。因此 TaSRL1 可整合根生長(zhǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素和 JA 信號(hào)，負(fù)調(diào)控根的伸長(zhǎng)。TaSRL1-4A 標(biāo)記對(duì)小麥育種過(guò)程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母文庫(kù)構(gòu)建方法酵母篩庫(kù)構(gòu)建酵母文庫(kù)的意義。貴州酵母文庫(kù)做什么酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物協(xié)助完...

酵母雙雜交技術(shù)，自創(chuàng)建以來(lái)被廣泛應(yīng)用于蛋白互作研究領(lǐng)域，在生命科學(xué)的基礎(chǔ)探秘研究中起著重要作用。然而該技術(shù)設(shè)計(jì)初衷，*是斯坦利先生為了完成申請(qǐng)學(xué)校經(jīng)費(fèi)的目的。該技術(shù)設(shè)計(jì)巧妙，它的許多優(yōu)點(diǎn)在設(shè)計(jì)之初并未顯現(xiàn)，反而在這么多年的高頻使用和進(jìn)一步開發(fā)利用過(guò)程中越發(fā)明顯。（引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay：stillfindingconnectionsafter25years”）:(1）盡管酵母雜交技術(shù)揭示了蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)的詳細(xì)信息，但操作簡(jiǎn)單。只需2個(gè)質(zhì)粒+1個(gè)菌株即可完成，且有不同體系方便選擇。（2）該技術(shù)利用比較好的DNA結(jié)合位...