單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導蘋果黃酮醇積累的關鍵性調(diào)控因子，作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌，通過酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫。結(jié)果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應、***信號轉(zhuǎn)導、木質(zhì)素生物合成、果實成熟發(fā)育等過程，以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中， MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子，由于其在草莓中的同源基因已被報導與黃酮的合成有關，引起了研究者的注意。進一步通過Y1H assay驗證確認了MdSCL8可以與MdFLS1啟動子互作（圖2A）。通過雙熒光素酶實驗和GUS檢測，發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負向調(diào)控MdFLS1...

歐易酵母文庫助力小麥根長抑制分子機制研究，近日，中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學王翔副教授為共同通訊作者，在 Journal of Experimental Botany 雜志（IF： 6.992）在線發(fā)表了題為“小麥短根長度 1文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。本研究從小麥中克隆了一個新的 ERF 轉(zhuǎn)錄因子基因 TaSRL1 （SHORT ROOT LENGTH 1），該基因主要在根中表達。綜上，本研究證明了 TaSRL1 在生長素依賴途徑中作為 taPIN2 的直接調(diào)控因子，并通過與 TaTIFY9 相互作用，整合生長素和 JA 信號，抑制根的生長。TaSRL1-4...

酵母雙雜交（Y2H）：植物轉(zhuǎn)錄因子（Plant transcripter factors， TFs）是調(diào)控植物生長發(fā)育和環(huán)境適應性的關鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫中，如RiceSRTFDB （Priya and Jain， 2013）， Ricettissuetfdb （Chen et al.，PlnTFDB （Pérez-Rodríguez et al.， 2009）和PlantTFDB （Jin et al.， 2017），可以預測水稻轉(zhuǎn)錄因子功能。但通過具體實驗研究，來直接證實轉(zhuǎn)錄因子對植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交（Y2H）和酵母單雜交（Y1H）是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-...

酵母單雜交篩選：（4）在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中，***GL1促進HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細胞中***表達，并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中顯示HEK293T細胞中，***GL1過表達后，與LTR連接的螢火素酶表達上升近2倍，說明***GL1是一個轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是，文章的背景介紹內(nèi)容中，對應用其他技術（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）對HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析，發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復制和潛伏期提供了見解，但并沒有直接評估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對酵母單雜交技術與其他互作組技術...

酵母文庫實驗:MAPK級聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號傳導過程中的關鍵事件，MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子，**終響應病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級聯(lián)的重要目標，在植物對各種病原體的抗性中起著關鍵作用。蘋果如何響應炭疽菌入侵，將信號傳導到細胞內(nèi)，以及哪個轉(zhuǎn)錄因子負責協(xié)調(diào)促進GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個由蘋果炭疽菌******誘導的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個易感蘋果種質(zhì)中，MdWRKY17表達水平***高于6個耐受蘋果種質(zhì)，同時對應的水楊酸含量降低，證實了MdWRKY17介導的水楊酸降解在GLS耐受中的關鍵作用。...

酵母雙雜交篩選實驗：為進一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強抗旱性的分子機制，本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料，構建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌，采用酵母雙雜交篩選實驗，從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白，并對互作蛋白進行了GO和KEGG分析，發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路，互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑，如糖原生成和代謝途徑。此外，GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導表達***，且在GhLEA3敲除的棉株中表達量低于野生型棉株文庫篩選經(jīng)驗 與上千所高校及科研院所合作 完成年均400多...

歐易酵母文庫助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個成員 TaSRL1，它可以調(diào)控生長素生物合成、轉(zhuǎn)運和信號轉(zhuǎn)到相關基因的表達，并與生長素轉(zhuǎn)運基因 TaPIN2 啟動子序列結(jié)合促進其表達，進而抑制根的生長。此外，TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用，破壞 TaSRL1 對 TaPIN2 表達的促進作用。因此 TaSRL1 可整合根生長過程中生長素和 JA 信號，負調(diào)控根的伸長。TaSRL1-4A 標記對小麥育種過程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母文庫篩庫歐易生物。貴州什么是酵母文庫做什么歐易酵母文庫助力蘋果花青素合成調(diào)控機制研究。...

酵母單雜交測試：為驗證該文庫在Y2H和Y1H體系中的有效性，作者以OsMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫，進行了酵母雙雜交測試。以Ghd7的啟動子片段為誘餌，進行了酵母單雜交測試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫可以有效且高通量的檢測蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外，該研究中指出，使用該文庫篩選鑒定蛋白-TF互作，采用mating法較為方便，即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫菌液一對一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作，采用Y1HGold系統(tǒng)，即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫質(zhì)粒更簡單高效。此外，可通過降低篩選壓力處理，進行弱相互作用的檢測。酵母...

本研究通過酵母雙雜交篩選，鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復合物關鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合，共同以藍光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍光***的 CRY1 可以增強 SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外，HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合，將 SWR1 復合物募集到 HY5 靶向位置，調(diào)控 HY5 靶基因的表達，進而影響擬南芥下胚軸的伸長據(jù)此，本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機制：CRY1 通過增強 SWR1 復合物活性和 HY5 介導 SWR1 復合物向 HY5 靶基因的募集，共同促進 H2A.Z 染色質(zhì)沉積，以調(diào)控 HY5 靶基因的表達和藍光條件下光...

利用酵母文庫進行雙雜交篩選，結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于細胞核中。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感，可以引起其發(fā)生降解，PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進一步的酵母一對一雜交驗證實驗表明，兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（圖 A-B）。并通過 GST pull-down、BiFC 實驗也證實了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合（圖 C-D）。細胞外降解實驗顯示，與對照相比，MdRGL3a 與過表達 MdBT2 ...

本研究通過酵母雙雜交篩選，鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復合物關鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合，共同以藍光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍光***的 CRY1 可以增強 SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外，HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合，將 SWR1 復合物募集到 HY5 靶向位置，調(diào)控 HY5 靶基因的表達，進而影響擬南芥下胚軸的伸長據(jù)此，本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機制：CRY1 通過增強 SWR1 復合物活性和 HY5 介導 SWR1 復合物向 HY5 靶基因的募集，共同促進 H2A.Z 染色質(zhì)沉積，以調(diào)控 HY5 靶基因的表達和藍光條件下光...

酵母單雜交篩選技術:關于HIV想必大家都不陌生，***HIV病毒后潛伏周期長，且目前沒有完全的***方法。為了徹底***HIV，不讓其發(fā)病就要從2方面入手：要么消除潛伏***的細胞，要么防止?jié)摲《镜募毎?**。也就是需要抑制HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。但是關于HIV在人細胞中的復制、轉(zhuǎn)錄和潛伏期調(diào)控的分子網(wǎng)絡仍不完全確定，所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個問題，波士頓大學的研究者，使用酵母單雜交篩選技術，以HIV-1,HIV-2的LTR（啟動子和增強子）為誘餌，篩選了人的轉(zhuǎn)錄因子文庫（包含1086個人的轉(zhuǎn)錄因子），**終繪制了調(diào)節(jié)HIV-1和HIV-2的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡圖譜，結(jié)果發(fā)表在2021年...

利用酵母文庫進行雙雜交篩選，結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于細胞核中。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感，可以引起其發(fā)生降解，PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進一步的酵母一對一雜交驗證實驗表明，兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（圖 A-B）。并通過 GST pull-down、BiFC 實驗也證實了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合（圖 C-D）。細胞外降解實驗顯示，與對照相比，MdRGL3a 與過表達 MdBT2 ...

進行了酵母雙雜交文庫的篩選，結(jié)果顯示鈣依賴的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用，分段截取互作驗證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的（圖a-b），并通過雙熒光分子互補實驗、BiFC、體外GST-pulldown實驗得以證實（圖c-e）。亞細胞定位顯示SPK主要在細胞質(zhì)中表達，OsNF-YB9在細胞質(zhì)和細胞核中都有表達，共表達SPK和OsNF-YB9***促進了OsNF-YB9的入核（圖f），表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進了OsNF-YB9從細胞質(zhì)向細胞核的運輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達，在5DAF開始***，并在10-30DAF維持高...

酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明，MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合，可以干擾其與MdMYB9的互作，進而負向調(diào)控MdTRB1介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9復合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。酵母雙雜交文庫構建實驗流程。安徽運用酵母文庫酵母單雜交篩選技術:關于HIV想必大家都不陌生，***HIV病...

酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對照相比，擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低，而硝酸鹽處理可以進一步抑制其生長，外源施加GA可以回復其生長缺陷。在擬南芥中異源表達MdBT2可以明顯提高植株高度，而PAC處理則會抑制這種生長的促進作用。在擬南芥中異源表達MdRGL3a可以明顯抑制植株生長，而硝酸鹽處理和MdBT2過表達則會緩解這種生長抑制作用。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對植株生長的影響（圖A-D）。以上結(jié)果表明，BT蛋白通過DELLA蛋白調(diào)控植株生長，這一機制在不同的植物中具有保守性。smart酵母建庫和gateway酵母建庫,滿足各類客戶的需求。重慶運用酵母文庫做什么...

歐易酵母文庫助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個成員 TaSRL1，它可以調(diào)控生長素生物合成、轉(zhuǎn)運和信號轉(zhuǎn)到相關基因的表達，并與生長素轉(zhuǎn)運基因 TaPIN2 啟動子序列結(jié)合促進其表達，進而抑制根的生長。此外，TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用，破壞 TaSRL1 對 TaPIN2 表達的促進作用。因此 TaSRL1 可整合根生長過程中生長素和 JA 信號，負調(diào)控根的伸長。TaSRL1-4A 標記對小麥育種過程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母單雜交技術是在酵母雙雜基礎上發(fā)展而來的一種研究核酸。上海酵母文庫質(zhì)量酵母雙雜交文庫：瘧...

酵母文庫：近日，上海市農(nóng)業(yè)科學院作物育種栽培研究所儲黃偉副研究員、曹黎明研究員為共同通訊作者，在Plant，Cell&Environment雜志（IF：7.228）在線發(fā)表了題為“Aconservedclathrin-coatedvesiclecomponent，OsSCYL2，regulatesplantinnateimmunityinrice”的研究論文，報道了水稻中一個被網(wǎng)格蛋白包被囊泡的一個重要組分OsSCYL2調(diào)控稻水先天免疫的分子機制。上海市農(nóng)業(yè)科學院作物所碩士研究生姚瑤和周繼華助理研究員為該論文的共同***作者。文章中酵母雙雜交實驗由歐易生物完成。文庫篩選經(jīng)驗 與上千所高校及科研...