江西酵母文庫

酵母單雜交篩選：（4）在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中，***GL1促進HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細胞中***表達，并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中顯示HEK293T細胞中，***GL1過表達后，與LTR連接的螢火素酶表達上升近2倍，說明***GL1是一個轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是，文章的背景介紹內(nèi)容中，對應用其他技術(shù)（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）對HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析，發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復制和潛伏期提供了見解，但并沒有直接評估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)（如Chip-seq、motif預測）進行了比較分析，發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對已識別因子的驗證率為30-60%，同等或優(yōu)于其他技術(shù)。合作文章上百篇，平均影響因子高達7.124 歐易生物酵母文庫。江西酵母文庫

蛋白被泛素化后（即蛋白上結(jié)合了泛素），意味著將要被運往蛋白酶體降解，一般用于降解細胞內(nèi)老弱病殘蛋白，再回收利用。同時也被用于排除異己，抵御外敵。該過程需要一系列酶介導：泛素***酶（E1）、泛素偶聯(lián)酶（E2）和泛素E3連接酶（E3）。其中E3是起特異性識別作用的，即決定誰該被降解，不能把好同志降解掉。所以E3基因很多，植物中主要有四種類型：HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**豐富的E3連接酶。本研究中，通過酵母雙雜交篩選到的標題蛋白MdBT2，整好是CRLs亞家族之一。因此作者推測MdBT2可能在與ApNMV1a結(jié)合后，起到了促進其泛素化和降解的作用。江西酵母文庫專業(yè)酵母文庫構(gòu)建和篩選公司多年經(jīng)驗。

通過酵母雙雜交進行篩選，結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍光下與 CRY1 相互作用（圖 A-C）。同樣，酵母雙雜交實驗顯示 CRY2 也可以在藍光下與 SWC6 相互作用（圖 D）。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗（圖 E-L）證實 CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報道的 SWR1 復合物亞基，負責催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報道 SWR1 復合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗（圖 A-H）顯示，CRY1、CRY2 可以藍光依賴性與 ARP6 結(jié)合。

利用酵母雙雜交技術(shù)進行篩選，結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用，并且二者互作關(guān)系通過酵母一對一互作、BiFC、Co-IP、LCI實驗得以驗證（圖A-C）。利用截短的SP8進行酵母一對一互作和Co-IP檢測表明，與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域（圖D-E）；同樣，OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的（圖F）。酵母雙雜交、BiFC實驗表明，OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理，野生對照株根的長度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號傳導相關(guān)基因表達量上升，但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達量上升減少。進口試劑高服務質(zhì)量市場份額大酵母文庫。

酵母雙雜交、GSTpull-down實驗顯示，SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用（圖A-C）。pull-down實驗顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用（圖D）。split-LUC、Co-IP實驗證實HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合（圖E-J）。下胚軸表型分析顯示，藍光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體，表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗顯示，藍光下，在 CRY1 存在下，SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強。表明藍光***的 CRY1 可能通過藍光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強 SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。酵母文庫已知蛋白互作靈活定制建庫。江西酵母文庫

酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白，蛋白/DNA等分子互作檢測的技術(shù)。江西酵母文庫

文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物制備。2021年5月，北京林業(yè)大學鈕世輝副教授為通訊作者，在PlantPhysiology雜志（IF:6.902）在線發(fā)表了題為“MADS-boxtranscriptionfactorsMADS11andDAL1interacttomediatethevegetative-to-reproductivetransitioninpine”的研究論文，深入探討了油松中營養(yǎng)生長-生殖生長時相轉(zhuǎn)變調(diào)控的分子機制。北京林業(yè)大學馬晶晶博士為***作者，文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物制備。本研究通過 7 個樹齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測序，鑒定到一個與年齡信號***相關(guān)的基因模塊，該模塊包含 33 個轉(zhuǎn)錄因子，包括 SOC1-like、DAL1 等。江西酵母文庫

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