酵母單雜交篩選技術(shù):關(guān)于HIV想必大家都不陌生，***HIV病毒后潛伏周期長，且目前沒有完全的***方法。為了徹底***HIV，不讓其發(fā)病就要從2方面入手：要么消除潛伏***的細(xì)胞，要么防止?jié)摲《镜募?xì)胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。但是關(guān)于HIV在人細(xì)胞中的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和潛伏期調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)仍不完全確定，所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個問題，波士頓大學(xué)的研究者，使用酵母單雜交篩選技術(shù)，以HIV-1,HIV-2的LTR（啟動子和增強(qiáng)子）為誘餌，篩選了人的轉(zhuǎn)錄因子文庫（包含1086個人的轉(zhuǎn)錄因子），**終繪制了調(diào)節(jié)HIV-1和HIV-2的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)圖譜，結(jié)果發(fā)表在2021年的PNAS雜志上。酵母生長速度快且容易操作的特點酵母文庫。海南歐易生物酵母文庫
通過酵母雙雜交進(jìn)行篩選，結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用（圖 A-C）。同樣，酵母雙雜交實驗顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用（圖 D）。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗（圖 E-L）證實 CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報道的 SWR1 復(fù)合物亞基，負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗（圖 A-H）顯示，CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。海南歐易生物酵母文庫酵母單雙雜交服務(wù)促銷季技術(shù)服務(wù)。
本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選，繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制，以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子（PHR）為中心。PHRs 是菌根共生所必需的，通過 P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達(dá)。高磷條件下，SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對菌根共生相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控，進(jìn)而抑制菌根共生。過表達(dá) OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對菌根共生的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn)，植物直接營養(yǎng)吸收和通過菌根共生的間接營養(yǎng)吸收，都受到相同的磷信號網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。
酵母雙雜交技術(shù)，自創(chuàng)建以來被廣泛應(yīng)用于蛋白互作研究領(lǐng)域，在生命科學(xué)的基礎(chǔ)探秘研究中起著重要作用。然而該技術(shù)設(shè)計初衷，*是斯坦利先生為了完成申請學(xué)校經(jīng)費的目的。該技術(shù)設(shè)計巧妙，它的許多優(yōu)點在設(shè)計之初并未顯現(xiàn)，反而在這么多年的高頻使用和進(jìn)一步開發(fā)利用過程中越發(fā)明顯。（引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay：stillfindingconnectionsafter25years”）:(1）盡管酵母雜交技術(shù)揭示了蛋白質(zhì)結(jié)合位點的詳細(xì)信息，但操作簡單。只需2個質(zhì)粒+1個菌株即可完成，且有不同體系方便選擇。（2）該技術(shù)利用比較好的DNA結(jié)合位點，有效的***結(jié)構(gòu)域和友好的報告基因系統(tǒng)，可以放大弱互作的信號。（3）該技術(shù)可用于各種物種的蛋白互作檢測，具有物種普適性，尤其是人類蛋白。（4）衍生技術(shù)具有更***的應(yīng)用，可擴(kuò)展到檢測蛋白質(zhì)與DNA、蛋白質(zhì)與RNA、蛋白質(zhì)與小分子以及其他組合之間的相互作用，甚至可實現(xiàn)將生理相互作用與表型數(shù)據(jù)直接關(guān)聯(lián)。當(dāng)然，做過酵母雜交實驗的小伙伴應(yīng)該都了解，互作結(jié)果的判斷，往往要等酵母生長好幾天才能看出來（當(dāng)然，小歐認(rèn)為這在偉大的科研事業(yè)過程中算不上啥），互作強(qiáng)弱也是主觀判斷性較強(qiáng)，存在假陽性。酵母文庫產(chǎn)品線由7個實驗室組成，分別有RNA抽提室，RNA質(zhì)檢室、酵母建庫室、篩庫室等。
歐易酵母文庫助力小麥根長抑制分子機(jī)制研究，近日，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)王翔副教授為共同通訊作者，在 Journal of Experimental Botany 雜志（IF: 6.992）在線發(fā)表了題為“Wheat SHORT ROOT LENGTH 1 gene TaSRL1 regulates root length in an auxin-dependent pathway”的研究論文，報道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長的分子機(jī)制。文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨特***。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一，與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關(guān)。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報道，但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。酵母文庫技術(shù)服務(wù)歐易生物對每一個結(jié)果負(fù)責(zé)。海南歐易生物酵母文庫
酵母文庫構(gòu)建的目的酵母的做法。海南歐易生物酵母文庫
目前，歐易生物負(fù)責(zé)該水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫的維護(hù)和保存工作，并對廣大水稻科研工作者提供轉(zhuǎn)錄因子篩選服務(wù)。如去年歐易生物助力中國科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心的王二濤老師應(yīng)用該文庫對水稻-叢枝菌根進(jìn)行了深入研究，成功構(gòu)建了水稻-叢枝菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表，該文庫已收錄了1683個水稻轉(zhuǎn)錄因子，隸屬于54個家族，覆蓋預(yù)測的水稻轉(zhuǎn)錄因子總量的70%。文庫中水稻轉(zhuǎn)錄因子的a基因信息來源于PlantTFDB和KOME數(shù)據(jù)庫。文庫載體使用pGADT7，酵母菌株使用Y187，每一個轉(zhuǎn)錄因子菌株**保存于96孔板中。海南歐易生物酵母文庫
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