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本研究通過(guò)酵母雙雜交篩選,鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復(fù)合物關(guān)鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合,共同以藍(lán)光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍(lán)光***的 CRY1 可以增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合,將 SWR1 復(fù)合物募集到 HY5 靶向位置,調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá),進(jìn)而影響擬南芥下胚軸的伸長(zhǎng)據(jù)此,本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機(jī)制:CRY1 通過(guò)增強(qiáng) SWR1 復(fù)合物活性和 HY5 介導(dǎo) SWR1 復(fù)合物向 HY5 靶基因的募集,共同促進(jìn) H2A.Z 染色質(zhì)沉積,以調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá)和藍(lán)光條件下光形態(tài)建成。酵母單雙雜交服務(wù)促銷季技術(shù)服務(wù)。湖北宣傳酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
通過(guò)傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來(lái)源于不同年齡段的油松cDNA文庫(kù)。將獲得的陽(yáng)性克隆,10個(gè)一組,挑選到1個(gè)96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個(gè)陽(yáng)性克隆的96孔板。以其中陽(yáng)性克隆mix為模板,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物,進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測(cè)序文庫(kù),通過(guò)NGS測(cè)序,獲得6G的陽(yáng)性克隆數(shù)據(jù)。通過(guò)分析二代測(cè)序數(shù)據(jù),獲得陽(yáng)性克隆基因信息(去冗余后獲得135個(gè)互作子,包含21個(gè)TFs,2個(gè)TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白,部分見(jiàn)表1)。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對(duì)一驗(yàn)證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對(duì)分析。對(duì)DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達(dá)譜、啟動(dòng)子中的順勢(shì)作用元件功能進(jìn)行分析,并對(duì)DIPs進(jìn)行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結(jié)果,構(gòu)建針葉樹(shù)老化途徑的調(diào)控模型(圖4)。安徽實(shí)力酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)文庫(kù)質(zhì)粒與酵母文庫(kù)載體重組。
酵母單雜交結(jié)果顯示,磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子OsPHR1/2/3可以***51個(gè)目標(biāo)啟動(dòng)子中的25個(gè),包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以調(diào)控許多菌根共生相關(guān)基因的表達(dá)(圖A)。對(duì)叢枝菌根共生響應(yīng)基因啟動(dòng)子序列預(yù)測(cè)分析顯示,有78個(gè)轉(zhuǎn)錄因子被富集,87%的菌根共生響應(yīng)基因受到OsPHR1/2/3的調(diào)控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接調(diào)控。因此推測(cè)OsPHR1/2/3可能是菌根共生調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個(gè)關(guān)鍵調(diào)控樞紐(圖A-B)。EMSA和熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)證實(shí),OsPHR12可以直接結(jié)合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3啟動(dòng)子序列(圖C-F),并且這種結(jié)合依賴于啟動(dòng)子中的P1BS元件(圖G)。
酵母雙雜交文庫(kù):為研究松樹(shù)生長(zhǎng)時(shí)相轉(zhuǎn)變和生殖發(fā)育的奧秘,本研究收集了油松 7 個(gè)年齡段的葉片進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。加權(quán)基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析(WGCNA)鑒定到一個(gè)與年齡***相關(guān)的基因模塊(圖 A)。按照表達(dá)模式,可以分為 2 個(gè)子模塊:隨年齡增長(zhǎng)而表達(dá)上升的基因子模塊、隨年齡增長(zhǎng)而表達(dá)降低的基因子模塊(圖 B-D)。這些基因在 5-7 年?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)至生殖生長(zhǎng)過(guò)渡期發(fā)生了一個(gè)明顯的表達(dá)模式轉(zhuǎn)變,表明在生殖發(fā)育啟動(dòng)階段存在一個(gè)相對(duì)劇烈的時(shí)相轉(zhuǎn)變過(guò)程。傳統(tǒng)酵母雜交技術(shù)應(yīng)用已經(jīng)30多年,技術(shù)已經(jīng)成熟穩(wěn)定。
單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導(dǎo)蘋果黃酮醇積累的關(guān)鍵性調(diào)控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌,通過(guò)酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫(kù)。結(jié)果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應(yīng)、***信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、木質(zhì)素生物合成、果實(shí)成熟發(fā)育等過(guò)程,以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中, MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子,由于其在草莓中的同源基因已被報(bào)導(dǎo)與黃酮的合成有關(guān),引起了研究者的注意。進(jìn)一步通過(guò)Y1H assay驗(yàn)證確認(rèn)了MdSCL8可以與MdFLS1啟動(dòng)子互作(圖2A)。通過(guò)雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)和GUS檢測(cè),發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負(fù)向調(diào)控MdFLS1啟動(dòng)子活性(圖2B-D)。歐易生物提供的酵母雜交技術(shù)服務(wù)已經(jīng)協(xié)助科研用戶發(fā)表了Science、Cell、PNAS等多家前列期刊雜志。安徽實(shí)力酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
歐易生物結(jié)合多年的文庫(kù)構(gòu)建經(jīng)驗(yàn)。湖北宣傳酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn):本研究報(bào)道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達(dá),而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達(dá)。在擬南芥 lec1-1 中異源表達(dá) OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補(bǔ) lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常,種子變長(zhǎng)、變窄、變薄,堊白率較高。此外,osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達(dá)紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達(dá)的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達(dá)導(dǎo)致了種子變小。綜上表明,OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。湖北宣傳酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng),具體經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項(xiàng)目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會(huì)務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠(chéng)實(shí)可信的企業(yè)。公司自創(chuàng)立以來(lái),投身于科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢,是醫(yī)藥健康的主力軍。歐易生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來(lái)良好體驗(yàn)。歐易生物始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè)。滿足市場(chǎng)需求,提高產(chǎn)品價(jià)值,是我們前行的力量。