安徽運(yùn)用酵母文庫

酵母文庫實(shí)驗(yàn)本研究鑒定了一個(gè)可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明，MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合，可以干擾其與MdMYB9的互作，進(jìn)而負(fù)向調(diào)控MdTRB1介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究JA對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。酵母雙雜交文庫構(gòu)建實(shí)驗(yàn)流程。安徽運(yùn)用酵母文庫

酵母單雜交篩選技術(shù):關(guān)于HIV想必大家都不陌生，***HIV病毒后潛伏周期長(zhǎng)，且目前沒有完全的***方法。為了徹底***HIV，不讓其發(fā)病就要從2方面入手：要么消除潛伏***的細(xì)胞，要么防止?jié)摲《镜募?xì)胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。但是關(guān)于HIV在人細(xì)胞中的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和潛伏期調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)仍不完全確定，所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個(gè)問題，波士頓大學(xué)的研究者，使用酵母單雜交篩選技術(shù)，以HIV-1,HIV-2的LTR（啟動(dòng)子和增強(qiáng)子）為誘餌，篩選了人的轉(zhuǎn)錄因子文庫（包含1086個(gè)人的轉(zhuǎn)錄因子），**終繪制了調(diào)節(jié)HIV-1和HIV-2的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)圖譜，結(jié)果發(fā)表在2021年的PNAS雜志上。河南運(yùn)用酵母文庫報(bào)價(jià)主要用于擴(kuò)繁酵母?jìng)浜Y選文庫,同時(shí)比較大限度保持初始酵母文庫多樣性。

單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導(dǎo)蘋果黃酮醇積累的關(guān)鍵性調(diào)控因子，作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌，通過酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫。結(jié)果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應(yīng)、***信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、木質(zhì)素生物合成、果實(shí)成熟發(fā)育等過程，以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中， MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子，由于其在草莓中的同源基因已被報(bào)導(dǎo)與黃酮的合成有關(guān)，引起了研究者的注意。進(jìn)一步通過Y1H assay驗(yàn)證確認(rèn)了MdSCL8可以與MdFLS1啟動(dòng)子互作（圖2A）。通過雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)和GUS檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負(fù)向調(diào)控MdFLS1啟動(dòng)子活性（圖2B-D）。

酵母雙雜交、pulldown和BiFC實(shí)驗(yàn)均顯示，MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達(dá)MdJAZ1，花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1，結(jié)果顯示過表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對(duì)花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用。Pull down 實(shí)驗(yàn)和熒光素酶互補(bǔ)成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在 MdJAZ1 存在下，MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱（圖 a-c）；外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對(duì)于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制，本研究建立了一個(gè)新的模型：MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作，增強(qiáng)了 MdMYB9 對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性，進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下，MdJAZ1 與 MdTRB1 互作，干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合；在 JA 存在的條件下，MdJAZ1 被降解，MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。酵母雜交案例專業(yè)的碩博團(tuán)隊(duì)。

本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選，繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制，以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子（PHR）為中心。PHRs 是菌根共生所必需的，通過 P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達(dá)。高磷條件下，SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對(duì)菌根共生相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控，進(jìn)而抑制菌根共生。過表達(dá) OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對(duì)菌根共生的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn)，植物直接營養(yǎng)吸收和通過菌根共生的間接營養(yǎng)吸收，都受到相同的磷信號(hào)網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。關(guān)于酵母雜交文庫構(gòu)建及篩選你需要知道這些。河南運(yùn)用酵母文庫報(bào)價(jià)

酵母文庫雙雜交技術(shù)及應(yīng)用。安徽運(yùn)用酵母文庫

酵母文庫實(shí)驗(yàn)由歐易生物協(xié)助完成。2021年3月，上海師范大學(xué)楊洪全教授為通訊作者，在ThePlantCell(IF:9.618)雜志發(fā)表了題為“ArabidopsisCryptochrome1ControlsPhotomorphogenesisthroughRegulationofH2A.ZDeposition”的研究論文，報(bào)道了擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機(jī)制。上海師范大學(xué)茅志磊博士為***作者，文章中酵母文庫實(shí)驗(yàn)由歐易生物協(xié)助完成。太陽光不僅為植物的光合作用提供能量來源，也是調(diào)節(jié)許多植物發(fā)育過程的關(guān)鍵環(huán)境信號(hào)。植物可以通過多種光受體監(jiān)測(cè)和響應(yīng)不同波長(zhǎng)、方向和強(qiáng)度的光，其中**早發(fā)現(xiàn)的是藍(lán)光受體隱花素 CRYs。擬南芥中 CRYs 有 2 個(gè)，其中 CRY1 主要參與調(diào)控光形態(tài)建成，CRY2 主要參與光周期開花調(diào)控。安徽運(yùn)用酵母文庫

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