酵母雙雜交文庫:本研究通過7個樹齡的油松樣品轉錄組測序,鑒定到一個與年齡信號***相關的基因模塊,該模塊包含33個轉錄因子,包括SOC1-like、DAL1等。油松和晚坐果白皮松突變體中的基因表達模式分析顯示,PtMADS11與生殖能力之間存在緊密相關性。酵母雙雜交顯示,MADS11和DAL1直接相關作用以參與對年齡信號的調(diào)控。過表達PtMADS11、PDAL1可以部分挽救擬南芥中miR156過表達或spl突變導致的開花延遲缺陷。只有PtMADS11可以挽救ft突變體中的開花缺陷,表明它與PtDAL1在擬南芥開花調(diào)控網(wǎng)絡中發(fā)揮了不同的作用。專業(yè)酵母文庫構建和篩選公司進口試劑。廣東什么是酵母文庫做什么
水稻轉錄因子文庫篩選服務:2021 年 10 月 12 日,中國科學院分子植物科學***創(chuàng)新中心王二濤研究員為通訊作者,在 Cell 上發(fā)表了題為“A phosphate starvation response-centered network regulates mycorrhizal symbiosis”的封面論文。文章***報道了水稻-叢枝菌根共生轉錄調(diào)控網(wǎng)絡,發(fā)現(xiàn)植物直接營養(yǎng)吸收途徑與通過叢枝菌根共生的間接營養(yǎng)吸收途徑均受到磷信號網(wǎng)絡的統(tǒng)一調(diào)控,回答了菌根共生領域“自我調(diào)節(jié)”這一困擾領域的重要科學問題。分子植物科學***創(chuàng)新中心博士后石進彩為***作者,歐易生物肖云平也參與了此項研究。文章中水稻轉錄因子文庫篩選服務由歐易生物提供。青海實力酵母文庫推出兩套酵母雙雜交文庫構建體系MART體系。
歐易酵母文庫助力小麥根長抑制分子機制研究,近日,中國農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所景蕊蓮研究員、河南農(nóng)業(yè)大學王翔副教授為共同通訊作者,在 Journal of Experimental Botany 雜志(IF: 6.992)在線發(fā)表了題為“小麥短根長度 1文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物完成。本研究從小麥中克隆了一個新的 ERF 轉錄因子基因 TaSRL1 (SHORT ROOT LENGTH 1),該基因主要在根中表達。綜上,本研究證明了 TaSRL1 在生長素依賴途徑中作為 taPIN2 的直接調(diào)控因子,并通過與 TaTIFY9 相互作用,整合生長素和 JA 信號,抑制根的生長。TaSRL1-4A 標記對小麥根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要意義。
酵母雙雜交篩選實驗:為進一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強抗旱性的分子機制,本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料,構建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌,采用酵母雙雜交篩選實驗,從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,并對互作蛋白進行了GO和KEGG分析,發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路,互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,如糖原生成和代謝途徑。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導表達***,且在GhLEA3敲除的棉株中表達量低于野生型棉株酵母文庫已知蛋白互作靈活定制建庫。
通過傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫。將獲得的陽性克隆,10個一組,挑選到1個96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個陽性克隆的96孔板。以其中陽性克隆mix為模板,進行PCR擴增,并將所有的PCR產(chǎn)物進行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物,進行打斷后構建二代測序文庫,通過NGS測序,獲得6G的陽性克隆數(shù)據(jù)。通過分析二代測序數(shù)據(jù),獲得陽性克隆基因信息(去冗余后獲得135個互作子,包含21個TFs,2個TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結合等蛋白,部分見表1)。挑選重要的候選基因進行一對一驗證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡進行比對分析。對DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達譜、啟動子中的順勢作用元件功能進行分析,并對DIPs進行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結果,構建針葉樹老化途徑的調(diào)控模型(圖4)。酵母雙雜交文庫構建實驗流程。技術酵母文庫報價
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通過酵母雙雜交文庫進行了互作蛋白的篩選,結果顯示TaTIFY9可以與TaSRL1相互作用(下圖A),并通過Bi-FC、熒光互補實驗得以證實(圖B-C)。TaTIFY9屬于茉莉酸信號途徑關鍵因子JAZ家族的成員之一。RT-PCR顯示TaTIFY9也主要表達于小麥根部,外源施加茉莉酸可以***誘導TaTIFY9表達。這一結果表明,TaSRL1可能通過與TIFY9結合介導了茉莉酸對根生長的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特異性結合到靶基因啟動子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 屬于 ERF 家族。在生長素轉運基因 TaPIN2 的啟動子序列中含有一個 GCC-box 序列。酵母單雜交實驗顯示,TaSRL1 可以直接與 TaPIN2 啟動子結合并***其表達(圖 A),但該***作用會被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制(圖 B和C)。廣東什么是酵母文庫做什么
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