酵母文庫實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021 年 3 月，山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金教授為通訊作者，在 Plant Physiology 雜志（IF: 6.902）在線發(fā)表了題為“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究論文，深入探討了硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果生長(zhǎng)調(diào)控分子機(jī)制。氮素是植物生長(zhǎng)發(fā)育所必須的營養(yǎng)物質(zhì)之一，硝酸鹽是植物根系吸收無機(jī)氮的主要形式。除了營養(yǎng)功能，硝酸鹽還可以通過多種信號(hào)途徑來調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)和發(fā)育過程。赤霉素（gibberellin,GA）是一種植物***，同樣可以調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育過程。然而，硝酸鹽和赤霉素信號(hào)通路如何共同調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)的確切分子機(jī)制仍知之甚少。篩選酵母文庫選歐易生物技術(shù)可靠服務(wù)高效多年經(jīng)驗(yàn)。黑龍江發(fā)展酵母文庫報(bào)價(jià)
酵母雙雜交（Y2H）：植物轉(zhuǎn)錄因子（Plant transcripter factors， TFs）是調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育和環(huán)境適應(yīng)性的關(guān)鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫中，如RiceSRTFDB （Priya and Jain， 2013）， Ricettissuetfdb （Chen et al.，PlnTFDB （Pérez-Rodríguez et al.， 2009）和PlantTFDB （Jin et al.， 2017），可以預(yù)測(cè)水稻轉(zhuǎn)錄因子功能。但通過具體實(shí)驗(yàn)研究，來直接證實(shí)轉(zhuǎn)錄因子對(duì)植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交（Y2H）和酵母單雜交（Y1H）是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技術(shù)。為了方便和促進(jìn)水稻育種研究，陳凡老師與歐易生物達(dá)成合作，整合雙方優(yōu)勢(shì)資源，歷經(jīng)春秋與冬夏，成功構(gòu)建了基于粳稻（日本晴）基因組的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫。該項(xiàng)成果以“一種高效的篩選系統(tǒng)來鑒定大米轉(zhuǎn)錄因子的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-DNA相互作用伙伴”為題，發(fā)表于雜志JGG上。山西酵母文庫質(zhì)量什么是酵母文庫的構(gòu)建? 只需構(gòu)建自己需要研究蛋白的BD載體，就能和本司**儲(chǔ)備的酵母文庫進(jìn)行篩庫實(shí)驗(yàn)。
酵母文庫實(shí)驗(yàn)：本研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2，它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長(zhǎng)。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)證實(shí)，MdBT2 可以與一個(gè) DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作，這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外，異源表達(dá) MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過表達(dá)所導(dǎo)致的擬南芥生長(zhǎng)抑制。綜上表明，MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進(jìn)硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)顯示，培養(yǎng) 45 天，蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加（圖 A-C）。
通過傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng)，以PtDAL1為誘餌，篩選樣本來源于不同年齡段的油松cDNA文庫。將獲得的陽性克隆，10個(gè)一組，挑選到1個(gè)96孔板的PCR板孔中，獲得10*96個(gè)陽性克隆的96孔板。以其中陽性克隆mix為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物，進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測(cè)序文庫，通過NGS測(cè)序，獲得6G的陽性克隆數(shù)據(jù)。通過分析二代測(cè)序數(shù)據(jù)，獲得陽性克隆基因信息（去冗余后獲得135個(gè)互作子，包含21個(gè)TFs，2個(gè)TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白，部分見表1）。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對(duì)一驗(yàn)證（圖2）。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對(duì)分析。對(duì)DAL1互作蛋白（DIPs）的基因表達(dá)譜、啟動(dòng)子中的順勢(shì)作用元件功能進(jìn)行分析，并對(duì)DIPs進(jìn)行GO注釋（圖3）。綜合生信分析結(jié)果，構(gòu)建針葉樹老化途徑的調(diào)控模型（圖4）。酵母文庫是歐易生物***服務(wù)項(xiàng)目。
文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物協(xié)助完成。近日，上海交通大學(xué)/復(fù)旦-交大-諾丁漢植物生物技術(shù)研發(fā)中心主任唐克軒課題組在New Phytologist（IF：8.512）發(fā)表了題為“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究論文，揭示了青蒿轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信號(hào)所介導(dǎo)的青蒿素生物合成調(diào)控的新型分子機(jī)制，本研究通過藍(lán)/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達(dá)，使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個(gè)WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9，可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白，蛋白/DNA等分子互作檢測(cè)的技術(shù)。黑龍江發(fā)展酵母文庫報(bào)價(jià)
酵母單雜篩庫酵母文庫篩選酵母雙雜交篩庫步驟。黑龍江發(fā)展酵母文庫報(bào)價(jià)
酵母文庫實(shí)驗(yàn):MAPK級(jí)聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號(hào)傳導(dǎo)過程中的關(guān)鍵事件，MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子，**終響應(yīng)病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級(jí)聯(lián)的重要目標(biāo)，在植物對(duì)各種病原體的抗性中起著關(guān)鍵作用。蘋果如何響應(yīng)炭疽菌入侵，將信號(hào)傳導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)，以及哪個(gè)轉(zhuǎn)錄因子負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)促進(jìn)GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)由蘋果炭疽菌******誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個(gè)易感蘋果種質(zhì)中，MdWRKY17表達(dá)水平***高于6個(gè)耐受蘋果種質(zhì)，同時(shí)對(duì)應(yīng)的水楊酸含量降低，證實(shí)了MdWRKY17介導(dǎo)的水楊酸降解在GLS耐受中的關(guān)鍵作用。黑龍江發(fā)展酵母文庫報(bào)價(jià)
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