南京BD單細胞測序數(shù)據(jù)分析

來源: 發(fā)布時間:2022-06-02

單細胞測序實驗再樣本細胞上機分選簽,需要對細胞數(shù)量、細胞活性進行準確判斷,這對Single Cell分選標記、建庫、下機數(shù)據(jù)的質(zhì)量都具有著決定性的作用。如若細胞計數(shù)偏高,將會影響建庫的成功率;計數(shù)偏低,則會顯著提高雙細胞的比例;而細胞活率過低,就會使測序數(shù)據(jù)的利用率大打折扣,因此把好單細胞懸液質(zhì)量這一關尤為重要。而在鋪板過程中,由于不同操作人員手法具有不可避免的差異,不同的液體流速將直接影響單細胞的入孔效果。因此烈冰生物BD Rhapsody單細胞分選平臺配套了專門定制的電動移液器,其具有Prime Treat、Cell Load、Bead Load、Wash、Lysis、Retrieval多種操作模式,來對應各種不同的操作。通過已經(jīng)設定的程序來控制液體的流速,大幅度降低人為操作習慣帶來的差異,保證實驗操作的一致性。單細胞測序技術遍地開花,烈冰服務讓您的生物醫(yī)學研究如虎添翼。南京BD單細胞測序數(shù)據(jù)分析

空間轉錄組測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量和玻片有效區(qū)域的利用率、貼片的質(zhì)量和透化時間息息相關。貼片質(zhì)量不良會影響總的有效spot數(shù)等;而透化不合理會導致spot的reads數(shù)、基因中位數(shù)等參數(shù)。而 在特異性基因表達方面,我們也可以統(tǒng)計空間轉錄組群體的特異性基因表達即Markergene,將他們在組織切片以及空轉上進行著色。我們也可以對于任意一個已知的基因或者數(shù)據(jù)庫中的一些細胞Marker,然后將其在基因表達在空間轉錄組的切片以及HE染色上展示自己的基因表達進而了解,群體中的可能的細胞組成關系。 北京ATAC測序公司烈冰生物為您提供一站式全流程高通量測序服務。

單細胞測序是指針對單個細胞進行全轉錄組測序分析,可精確地描述每一個細胞的狀態(tài),在異質(zhì)性發(fā)育過程中具有不可忽視的應用價值。然而,單細胞測序無法給出固態(tài)異質(zhì)化組織中細胞空間排布信息,對于揭示發(fā)育過程、病理微環(huán)境都存在很大的局限性。空間轉錄組測序以點陣形式記錄病理切片細胞的空間信息并進行測序,可以精確指示點陣內(nèi)的全部基因表達情況。空間轉錄組測序的加入,無疑讓單細胞測序如虎添翼,更精確地勾勒了組織水平的異質(zhì)性。

單細胞轉錄組測序是在單細胞水平上高通量測序分析基因表達譜的技術,突破傳統(tǒng)高通量測序的局限性,組織解離后,單個樣本一次上機能捕獲500-20000個細胞, 基于每個細胞分別建庫測序,獲得單個細胞的基因結構和基因表達狀態(tài),并鑒定細胞的類型,可以在不同樣本間從細胞類型的組成和豐度角度進行比較,反映細胞間的異質(zhì)性。而2021年橫空出世的10X Genomics Chromium X平臺實現(xiàn)了單塊chip上的百萬級別通量的細胞捕獲,系統(tǒng)實現(xiàn)16個通道同時運行,每個通道可捕獲2000-20000個細胞(不混樣),并支持原Chromium Controller體統(tǒng)外的多種細胞捕獲百萬級別通量實驗,可準確鑒別稀有細胞類型和適配大規(guī)模單細胞研究。搭建多種測序數(shù)據(jù)的生物信息分析平臺,5000+項目檢驗,真實可信賴。

當下,單細胞測序已經(jīng)廣泛應用于多種疾病發(fā)展過程中的關鍵過程和事件,如疾病從輕癥病變向惡性的轉化、惡性向轉移病變的發(fā)展,以及疾病對多種藥物的反應等等。單細胞測序技術作為一個需要將組織解離成為單細胞懸液,或者是采用細胞核捕獲的策略捕獲單細胞核,進而對于每一個單細胞或者細胞核進行測序得到結果的技術,其空間定位信息是丟失的。這就衍生出了一個問題就是如果單細胞A與B并不出現(xiàn)在一個組織區(qū)域中他們會互相影響或者轉化么?免疫研究中,兩個具有非常強的PDL1-PD1的配對關系的細胞在組織切片上風馬牛不相及,這樣PDL1-PD1的關系會生效么?截至2021年10月,烈冰助力發(fā)表單細胞測序文章近20篇。武漢空間轉錄組測序服務機構

測序的革新讓科學研究從個體基因差異逐漸轉為個體細胞的基因差異。南京BD單細胞測序數(shù)據(jù)分析

免疫組庫是功能相似的n多細胞的統(tǒng)稱。而“免疫”是指免疫細胞,特指T/B淋巴細胞。“So~免疫組庫”(Immune Repertoire,IR),指某個體,特定時間點下,所有功能多樣性T/B淋巴細胞的總和。T/B細胞利用細胞表面受體(TCR/BCR)識別和結合抗原,介導機體產(chǎn)生針對性的免疫應答,發(fā)揮免疫功能并做好記錄備案,如果該抗原再次入侵可迅速作出反應,作為健康衛(wèi)士守護肌體城池?;蚱蜼(D)J (Variable-可變區(qū); Diversity-多樣區(qū); joining-連接區(qū);) 會發(fā)生隨機重組,各基因片段可變形式分別為,V區(qū)(52種),D區(qū)(2種),J區(qū)(13種),配合V(D)J片段中堿基的插入和缺失,進一步相互間的排列組合存在1012種以上組合形式,以此構成了TCR和BCR多樣性的來源,而這種多樣性正是適應性免疫系統(tǒng)能夠識別眾多抗原的基礎。南京BD單細胞測序數(shù)據(jù)分析

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