載藥脂質體如何純化如果需要純化載藥脂質體,通常會根據(jù)載藥脂質體的性質和所需純度要求選擇合適的純化方法。以下是一些可能的純化方法:1.超濾法:超濾可以用于去除較大的雜質和未包埋的藥物。通過選擇適當?shù)姆肿恿拷刂鼓?,將載藥脂質體溶液經過超濾膜,較大的雜質和未包埋的藥...
**初的微泡靶向實驗是在靜態(tài)條件下進行的:將氣泡與目標表面接觸(通常是倒置),在沒有流動的情況下孵育幾分鐘,然后將剩余的自由氣泡洗掉,測量保留氣泡的數(shù)量和聲學響應。然而,這種情況并不是脈管系統(tǒng)內真正靶向的良好模型,在脈管系統(tǒng)內,結合發(fā)生時沒有任何流動停止。取決...
轉染是將外來核酸傳遞到真核細胞中以修飾宿主細胞的遺傳組成的過程。在過去的30年里,轉染因其廣泛應用于研究疾病的細胞過程和分子機制而越來越受歡迎。了解疾病的分子途徑,可以發(fā)現(xiàn)可能用于疾病診斷和預后的特定生物標志物。此外,轉染可以作為基因***中的策略之一,用于*...
熒光標記技術是指運用熒光染料與待研究對象結合,利用它的熒光特性,提供待研究對象相關信息。熒光標記具有操作簡便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢,使熒光染料在生命科學研究中應用,包括:標記活細胞或固定細胞中的蛋白質、多肽;作為功能性指示劑表征細胞健康狀況;設計各種熒...
酸性環(huán)境(pH值2.0-4.0)通常?于產??于活***物裝載的跨膜pH梯度。在37℃和pH2.0條件下,SM/Chol脂質體(55/45,mol/mol)的?解速率?DSPC/Chol脂質體慢約100倍。此外,含有SM/Chol的脂質體表現(xiàn)出比較好的藥代動?...
脂質體核酸疫苗的穩(wěn)定性和儲存性脂質納米顆粒-mrna制劑的儲存條件是其臨床轉化的重要考慮因素,因為儲存(水、冷凍和凍干儲存)和冷凍保護劑(蔗糖、海藻糖或甘露醇)的類型會影響脂質納米顆粒-mrna制劑的長期穩(wěn)定性168。例如,將5%(w/v)的蔗糖或海藻糖添加到...
超聲微泡的大小差異影響超聲微泡的藥代動力學、病變部位靶向、內吞過程和細胞攝取。人體生物系統(tǒng)對不同顆粒的反應不同,小于8μm的氣泡具有模擬紅細胞循環(huán)的優(yōu)點,從而促進其擴散到血管和***間的循環(huán)中。除此之外,氣泡的大小不應超過8μm,因為它可能導致并發(fā)癥,如血流中...
超聲微泡造影劑在*****中的作用。多年來,脂溶***物已被納入運載工具,以避免全身毒性。如上所述,現(xiàn)在有可能將疏水劑摻入成像微泡的脂質外層或將親水分子附著到泡殼上?;蛘撸部梢詫⑹杷幬锝肼暬钚灾|體(AALs)的油層中。毒性研究表明,與未包封的紫杉醇相比...
納米顆粒的尺寸很小,但它們比其他顆粒具有更大的粘附表面,同時具有高穩(wěn)定性。正因為如此,它們能夠成功地穿過細胞膜,進入細胞,并與自然發(fā)生的細胞內途徑結合,具有將特定顆粒帶到預定目標位置的***準確性。由于納米顆粒在細胞內運輸和保護化合物方面具有巨大的潛力,可以避...
脂質顆粒的加入導致內體DNA釋放增加。Delgado等人通過在腎細胞中添加魚精蛋白,設法提高了固體脂質納米顆粒的轉染效率,但與不添加魚精蛋白的對照組相比,相同的多功能單元,DNA/魚精蛋白/SLN(固體脂質納米顆粒),降低了HEK 293細胞系(人胚胎腎細胞)...
RNA和信使RNA與DNA轉染類似,RNA可以通過基于RNA的病毒或非病毒載體導入真核細胞。與涉及DNA的轉染相比,RNA轉染可能產生更高的轉染效率,因為后者不需要穿越核膜。在不需要基因組整合、轉錄和轉錄后處理的情況下,RNA轉染也可能加速所需蛋白質的產生。使...
氣泡在靶區(qū)域的聚集和藥物的釋放主要依賴于各種外源性和內源性刺激,并不是由特異性的主動靶向引起的。EPR和血管生成相關表面受體的(過)表達是**血管的關鍵特征。因此,epr介導的被動靶向和基于配體的主動靶向引起了相當大的關注。Kunjachan等人使用RGD和n...
選擇合適的轉染試劑可能取決于幾個因素,包括轉染核酸的類型和轉染的復雜性(單轉染或共轉染)。一些試劑如Effectene和TransIT-X2是專門用于質粒DNA轉染的,而一些試劑如Lipofectamine RNAiMAX更適合于小寡核苷酸的轉染。哺乳動物原代...
SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy...
在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當今生物學研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質粒,但它們的使用有一些缺點,即它可能很耗時,并且在融合...
在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當今生物學研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質粒,但它們的使用有一些缺點,即它可能很耗時,并且在融合...
選擇合適的轉染試劑可能取決于幾個因素,包括轉染核酸的類型和轉染的復雜性(單轉染或共轉染)。一些試劑如Effectene和TransIT-X2是專門用于質粒DNA轉染的,而一些試劑如Lipofectamine RNAiMAX更適合于小寡核苷酸的轉染。哺乳動物原代...
核酸與轉染試劑的比例對轉染效率也有影響。在一項涉及原代人成肌細胞的研究中,使用不同的核酸比例來比較轉染效率的影響,轉染試劑包括FuGENE6、Effectene和ExGen500(一種基于pei的試劑)。該研究的一個***發(fā)現(xiàn)是,轉染效率可能不一定與所用試劑的...
所需的CY3-NHS酯的量取決于待標記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設所需的標記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL...
在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當今生物學研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質粒,但它們的使用有一些缺點,即它可能很耗時,并且在融合...
**初的微泡靶向實驗是在靜態(tài)條件下進行的:將氣泡與目標表面接觸(通常是倒置),在沒有流動的情況下孵育幾分鐘,然后將剩余的自由氣泡洗掉,測量保留氣泡的數(shù)量和聲學響應。然而,這種情況并不是脈管系統(tǒng)內真正靶向的良好模型,在脈管系統(tǒng)內,結合發(fā)生時沒有任何流動停止。取決...
PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測,常用于流式細胞儀分析。盡管PI不能通過活細胞膜,但卻能穿過破損的細胞膜而對核染色。PI經常被用來與Calcei...
超聲微泡的大小差異影響超聲微泡的藥代動力學、病變部位靶向、內吞過程和細胞攝取。人體生物系統(tǒng)對不同顆粒的反應不同,小于8μm的氣泡具有模擬紅細胞循環(huán)的優(yōu)點,從而促進其擴散到血管和***間的循環(huán)中。除此之外,氣泡的大小不應超過8μm,因為它可能導致并發(fā)癥,如血流中...
三:貼壁細胞染色1、將貼壁細胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。2、從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,但要使表面保持濕潤。3、在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。4、37℃孵育細胞2~20min,不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同??梢?...
siRNA脂質體 RNA干擾(RNAi)途徑允許siRNA和miRNAs負向調節(jié)蛋白表達。siRNA是21~23對核苷酸組成的雙鏈RNA,可誘導同源靶mRNA沉默。為了發(fā)揮作用,雙鏈siRNA分裂成兩個單鏈RNA:乘客鏈和引導鏈。乘客鏈被argona...
脂質體靶向遞送中甘露糖配體修飾由于在巨噬細胞上發(fā)現(xiàn)了甘露糖受體,因此甘露糖已被用于修飾陽離子脂質體以供巨噬細胞遞送。為了抑制由活化的巨噬細胞誘導的破骨細胞生成,將甘露糖基化陽離子脂質體與雙鏈寡核苷酸NFkB誘餌絡合。甘露糖陽離子脂質體/NFkB誘餌復合物有效誘...
將靶向成像方式與病變定向***相結合,可以確定與積極***反應可能性有關的幾個生物學相關事實。特別令人感興趣的問題是,目標是否存在,藥物是否達到目標,以及預期目標是否真的是正在***的目標。有多種有趣的生物過程適合應用靶向超聲成像來監(jiān)測藥物遞送的療效。我們的研...
FITC熒光標記蛋白的應用及特點:活性熒光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于標記抗體或蛋白質功能基團,生成分子探針,并通過熒光成像進行檢測。當用熒光染料化學標記特異性抗體...
deae-葡聚糖是一種化學修飾的葡聚糖類似物。通過用二乙基氨基乙基修飾,右旋糖酐鏈的酰胺化很容易被質子化,這使得它可以自組裝成帶負電荷核酸的納米顆粒。deae -葡聚糖是***個用于核酸轉染的陽離子聚合物。早在20世紀50年代,它就極大地增強了脊髓灰質炎病毒和...
在轉染中,DNA通常通過病毒或非病毒載體(如質粒)轉運到宿主細胞中。質粒的基本結構包括啟動子、復制起點、多個克隆位點、目標基因和選擇標記。質粒復制需要復制的起源,而多個克隆位點包含獨特的內切酶切割位點,用于插入外源基因。適當?shù)恼婧藛幼?如CMV或EF-1a)...