LAMP法，即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification），是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測有以下特性： 快速高效：LAMP技術(shù)可以在1小時內(nèi)把幾拷貝的目的序列迅速擴增到10^9^～10^10^拷貝，擴增效率高。 簡便性：LAMP技術(shù)不需要進行模板的預(yù)變性，減少了PCR技術(shù)升降溫帶來的影響以及對昂貴、精密實驗儀器的要求，同時擴增效率高，可以在較短時間內(nèi)完成檢測。 LAMP法因其快速、高效、特異、靈敏和經(jīng)濟等優(yōu)點，已經(jīng)應(yīng)用于病原菌、寄生蟲、病毒、疾病和轉(zhuǎn)基因產(chǎn)...

一步法快速支原體檢測的原理主要基于等溫擴增技術(shù)，這是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。以下是具體的步驟和原理： 1. 等溫擴增技術(shù)：一步法快速支原體檢測試劑盒利用LAMP（Loop-Mediated Isothermal Amplification，環(huán)介導(dǎo)等溫擴增）技術(shù)或類似的等溫擴增技術(shù)。這些技術(shù)允許在恒定溫度下進行DNA的快速擴增，通常在60-65°C之間。 2. 特異性引物：該方法使用設(shè)計好的特異性引物，這些引物靶向支原體DNA的保守區(qū)域。引物的設(shè)計確保了擴增過程的特異性，從而減少非目標序列的擴增。 3. 快速擴增：在適宜的條件下，等溫擴增技術(shù)可以在15...

支原體是細胞外生存的 小微生物，是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在0.2~0.5um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。 1、支原體存在于我們周圍，他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中 2、可透過一般的濾膜，所以不要寄希望于過濾可以清楚支原體污染的液體 支原體對培養(yǎng)細胞的污染發(fā)生率高，據(jù)估計平均發(fā)生率在60%左右。同時又非常隱秘，早期不容易被發(fā)現(xiàn)，除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。支原體因為個頭小，能穿過0.22微米濾器，并且在實驗室內(nèi)會潛在的擴散。支原體污染使得用被污染的細胞樣本做的實驗完全失去意義和價值。 細胞培養(yǎng)中支原...

細胞被支原體污染后可能會出現(xiàn)以下幾種情況： 1. 生長速度變慢：支原體污染的細胞生長速度可能會減慢，甚至停止生長。 2. 形態(tài)改變：部分細胞可能會變圓，從培養(yǎng)瓶壁脫落。有些細胞在支原體污染后，形態(tài)變化可能不明顯，但有些細胞可能會出現(xiàn)體積增大、細胞碎片增多等現(xiàn)象。 3. 培養(yǎng)液pH變化：支原體污染的細胞可能導(dǎo)致培養(yǎng)液pH值變化明顯，更換培養(yǎng)液后幾小時內(nèi)變酸（顏色變黃）。 4. 細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積：在某些情況下，細胞與細胞間隙可能出現(xiàn)膜狀沉積，影響細胞的正常生長和傳代。 5. 細胞功能受損：支原體污染可能會影響細胞的代謝和功能，如影響細胞蛋白質(zhì)、DNA、RNA的...

預(yù)防細胞培養(yǎng)過程中的支原體污染至關(guān)重要，因為一旦發(fā)生污染，可能會嚴重影響實驗結(jié)果和細胞的生長。以下是一些有效的預(yù)防措施： 1. 無菌操作：始終在無菌條件下進行細胞培養(yǎng)操作，包括使用無菌的移液器、手套和其他實驗室器材。 2. 個人防護：穿戴適當?shù)膫€人防護裝備，如實驗服、手套和口罩，以減少污染的風(fēng)險。 3. 細胞培養(yǎng)室的清潔：保持實驗室和細胞培養(yǎng)室的清潔，定期進行消毒處理。 4. 培養(yǎng)箱的維護：定期清潔和消毒CO2培養(yǎng)箱，避免飛濺和溢出，并維持嚴格的清潔計劃。 5. 使用無支原體污染的試劑：使用經(jīng)過檢測確認無支原體污染的培養(yǎng)基、血清和其他添加物。 ...

細胞培養(yǎng)過程中如果發(fā)現(xiàn)支原體污染，可以采取以下一些方法嘗試去除污染： 1. 抗*素治*：使用針對支原體有效的抗*素，如四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氟喹諾酮類等。根據(jù)搜索結(jié)果，可以加入高濃度抗*素進行沖擊治*，例如慶大霉素 200ug/ml，四環(huán)素10ug/ml，卡那霉素50ug/ml，并維持24-48小時后再換入常規(guī)培養(yǎng)液。 2. 加溫處理：支原體不耐熱，可以將細胞置于41°C中處理5-10小時以殺滅支原體。但需注意，高溫也可能對細胞造成傷害，因此需要預(yù)先確定對細胞影響較小的處理時間。 3. 使用支原體清除劑：市場上有專門的支原體清除劑，按照產(chǎn)品說明使用。 ...

支原體去除的實驗步驟通常包括以下幾個階段： 1. 支原體檢測：在進行去除之前，首先要確認細胞培養(yǎng)物是否受到支原體污染。這可以通過多種方法實現(xiàn)，如PCR法、LAMP法或支原體培養(yǎng)法。 2. 選擇合適的去除試劑：一旦確認存在支原體污染，需要選擇一種有效的去除試劑。 3. 去除試劑的添加：根據(jù)去除試劑的說明書，將試劑添加到受污染的細胞培養(yǎng)基中。通常，這涉及到將一定比例的去除試劑加入到細胞培養(yǎng)液中。 4. 孵育：添加去除試劑后，將細胞培養(yǎng)物放回培養(yǎng)箱中孵育。孵育時間和條件（如溫度、CO2濃度）應(yīng)根據(jù)試劑的推薦進行調(diào)整。 5. 監(jiān)測去除效果：在孵育...

支原體去除和支原體預(yù)防是兩種不同的策略，它們在細胞培養(yǎng)和生物制品生產(chǎn)中都非常重要。 支原體去除是指在細胞已經(jīng)被支原體污染后采取的措施。這通常涉及到使用特定的抗*素或化學(xué)試劑來消滅或抑制支原體的生長。例如，根據(jù)的描述，支原體去除試劑是一種混合抗*素制劑，它含有三種對支原體具有抑菌作用的組分，可以取得良好的支原體清*效果。使用這種方法時，細胞需要在含有去除試劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間，然后更換培養(yǎng)基并檢測支原體是否已被清*。 支原體預(yù)防則是指在細胞培養(yǎng)過程中采取的預(yù)防措施，以避免支原體污染的發(fā)生。這包括保持實驗室環(huán)境的清潔、使用無菌技術(shù)、對所有培養(yǎng)基和器材...

細胞培養(yǎng)中如果污染了支原體，會有以下幾種影響： 1. 細胞生長受影響：支原體污染會導(dǎo)致細胞生長速度減慢，甚至停止生長。細胞可能會變圓，從培養(yǎng)瓶壁脫落。 2. 細胞形態(tài)變化：雖然某些細胞在支原體污染后形態(tài)變化不明顯，但有些細胞會出現(xiàn)體積增大，細胞碎片增多，培養(yǎng)瓶中細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積等現(xiàn)象。 3. 代謝和功能改變：支原體污染會影響細胞的代謝和功能，例如培養(yǎng)液中的精氨酸被大量消耗，引起細胞蛋白質(zhì)、DNA、rRNA、mRNA的合成障礙。支原體活動還可能引起培養(yǎng)液成分和pH值的變化。 4. 實驗結(jié)果受影響：使用被支原體污染的細胞進行實驗會嚴重影響實驗結(jié)果...

支原體的預(yù)防可通過以下方式： 1. 控制污染源：通過定期檢測和去除細胞培養(yǎng)中的支原體污染，確保細胞培養(yǎng)體系內(nèi)無支原體存在，從而獲得準確有效的實驗數(shù)據(jù)。 2. 改善無菌操作技術(shù)：通過提高實驗人員的操作技術(shù)和意識，避免在細胞培養(yǎng)過程中引入支原體污染。 3. 使用無菌設(shè)備和耗材：使用無菌的細胞培養(yǎng)設(shè)備和耗材，如無菌培養(yǎng)基、血清等，減少支原體污染的風(fēng)險。 4. 定期消毒和清潔：對實驗室環(huán)境進行定期的消毒和清潔，包括工作臺、培養(yǎng)箱等，以減少支原體的潛在污染。 5. 使用預(yù)防性試劑：使用專門針對支原體的預(yù)防性試劑，如加入細胞培養(yǎng)基中的預(yù)防劑、超凈臺噴霧、水浴鍋預(yù)防和細胞培...

細胞庫支原體檢測的必要性主要體現(xiàn)在以下幾個方面： 1. 確保細胞庫的質(zhì)量與安全性：細胞庫的建立需要為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細胞。支原體檢測是確保細胞庫中細胞質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。 2. 符合監(jiān)管要求：支原體檢測是生物制品安全性監(jiān)管的一部分，全球范圍內(nèi)的藥典、法規(guī)和指導(dǎo)文件中都有支原體檢測的相關(guān)說明。 3. 避免對生物制品的影響：支原體污染可能會影響生物制品的安全性和有效性，因此需要通過檢測來避免這種風(fēng)險。 4. 維護細胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性：支原體是真核細胞和干細胞培養(yǎng)中最常見的問題之一，它們可以改變細胞的代謝、減緩增殖速度，甚至引起染色體畸變。 ...

支原體污染后的細胞是否應(yīng)該直接丟棄還是嘗試重新培養(yǎng)，這取決于多種因素，包括細胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法來清*支原體。以下是一些處理支原體污染的常見方法： 1. 直接丟棄：對于非重要的細胞，如果培養(yǎng)中的細胞、WCB的細胞等，可以采取直接將培養(yǎng)物與用過的培養(yǎng)基滅活后丟棄的方式。 2. 使用支原體清除劑：支原體清除劑處理細胞，作用濃度為25μg/ml，兩周可以清*支原體。 3. 使用支原體清*培養(yǎng)基：每2~3天更換一次新鮮培養(yǎng)液，并用無菌的PBS洗滌細胞，處理15天后進行支原體檢測，以確定支原體是否被完全去除。 4. 支原體去除試劑：這是一種混合...

細胞培養(yǎng)中支原體檢測出現(xiàn)假陰性結(jié)果可能由以下原因引起： 1. 樣本質(zhì)量問題：如果采集的樣本中含有抑制劑或者樣本在處理、存儲過程中出現(xiàn)問題，可能會影響PCR反應(yīng)，導(dǎo)致假陰性。 2. 技術(shù)或操作問題：實驗操作中的誤差，如樣本處理不當、試劑配制錯誤、儀器設(shè)備問題等，都可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。 3. 檢測方法的局限性：某些檢測方法可能存在靈敏度或特異性不足的問題，導(dǎo)致無法準確檢測到病原體。 4. 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的影響：培養(yǎng)法的靈敏度容易受到培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的影響，如果培養(yǎng)條件不適宜，可能導(dǎo)致支原體無法生長或生長緩慢，從而檢測不到。 5. 支原體種類問題：不是所有的支原體...

支原體檢測中的PCR法和LAMP方法各有其優(yōu)勢和劣勢，以下是兩種方法的比較： PCR法 優(yōu)勢: 1.高靈敏度：PCR法可以擴增支原體DNA，具有很高的靈敏度。 2.操作簡便：PCR操作相對簡單，結(jié)果準確，速度快，通常3個小時左右即可得到結(jié)果。 3.可靠性：PCR法已成為日常細胞培養(yǎng)維護的可靠方法，是細胞樣本庫保護細胞的方法。 劣勢: 1. 樣品量需求：相對于某些快速檢測方法，PCR可能需要較多的樣品量。 2. 檢測周期：盡管PCR法相對快速，但在某些情況下，檢測周期可能較長。 LAMP法 優(yōu)勢: 1. 設(shè)備簡單：只...

支原體預(yù)防的策略主要包括以下幾個方面： 1. 控制污染源：通過定期檢測和去除細胞培養(yǎng)中的支原體污染，確保細胞培養(yǎng)體系內(nèi)無支原體存在，從而獲得準確有效的實驗數(shù)據(jù)。 2. 改善無菌操作技術(shù)：通過提高實驗人員的操作技術(shù)和意識，避免在細胞培養(yǎng)過程中引入支原體污染。 3.使用無菌設(shè)備和耗材：使用無菌的細胞培養(yǎng)設(shè)備和耗材，如無菌培養(yǎng)基、血清等，減少支原體污染的風(fēng)險。 4. 定期消毒和清潔：對實驗室環(huán)境進行定期的消毒和清潔，包括工作臺、培養(yǎng)箱等，以減少支原體的潛在污染。 5. 使用預(yù)防性試劑：使用專門針對支原體的預(yù)防性試劑，如加入細胞培養(yǎng)基中的預(yù)防劑、超凈臺噴霧、水浴鍋預(yù)防...

支原體檢測的樣本既可以是細胞，也可以是培養(yǎng)基。在細胞培養(yǎng)中，支原體污染是常見的問題，因此需要對細胞和培養(yǎng)基進行檢測。細胞庫、病毒種子批、對照細胞以及臨床用細胞等都需要進行支原體檢查，這通常包括培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法（DNA染色法）。同時，病毒類疫苗的病毒收獲液、原液也采用培養(yǎng)法檢查支原體，必要時，也可以采用指示細胞培養(yǎng)法篩選培養(yǎng)基。 此外，支原體檢測的培養(yǎng)基推薦使用支原體肉湯培養(yǎng)基和精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基等，這些培養(yǎng)基可用于檢測藥品和生物制品中的支原體。在進行支原體檢測時，需要取培養(yǎng)物樣品接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上。 因此，支原體檢測的樣本既可以是細胞，...

細胞培養(yǎng)中支原體污染的檢測方法有多種，以下是一些常用的檢測手段： 1. 顯微鏡檢測：通過相差顯微鏡觀察細胞，支原體在細胞表面和細胞之間會呈現(xiàn)為暗色微小顆粒。 2. 熒光染色法：使用熒光染料Hoechst 33258與DNA特異性結(jié)合，使支原體的DNA著色，然后在熒光顯微鏡下觀察。染色后的支原體會在細胞周圍或附于細胞膜表面顯示為亮綠色小點。 3. 電鏡檢查：使用掃描電鏡或透射電鏡觀察，這是一種簡便快速的方法。 4. 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）：使用特定的引物對支原體DNA進行擴增，是一種高靈敏度的檢測方法。 5. 等溫擴增法：基于LAMP技術(shù)，室溫反應(yīng)后觀...

支原體檢測實驗方法需要考慮以下幾個關(guān)鍵點： 1. 樣本的采集與處理：確保樣本的采集和處理過程符合無菌操作規(guī)范，避免交叉污染。 2. 實驗操作的標準化：制定詳細的實驗操作流程，包括樣本接種、培養(yǎng)條件、觀察時間點等，以保證實驗的可重復(fù)性和準確性。 3. 使用適當?shù)呐囵B(yǎng)基：根據(jù)支原體的特性選擇合適的培養(yǎng)基，如支原體肉湯4. 培養(yǎng)基、精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基等，并確保培養(yǎng)基的靈敏度和特異性。 5. 設(shè)置對照組：實驗中應(yīng)包括陽性對照和陰性對照，以驗證實驗方法的有效性和排除假陽性或假陰性結(jié)果。 如何檢測新鮮的培養(yǎng)基是否有支原體污染？南京細胞支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨 對于同一個樣品，如...

支原體污染的來源主要包括以下幾個方面： 1. 實驗室環(huán)境中可能存在支原體污染源，如空氣中的塵埃、其他培養(yǎng)物中的支原體污染等。 2. 實驗操作人員的手部、衣物或皮膚表面可能攜帶支原體，造成細胞培養(yǎng)的污染。 3. 培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料如果受到支原體污染，也會導(dǎo)致細胞培養(yǎng)物受到污染。 4. 細胞交叉污染，即使用已受污染的細胞株進行培養(yǎng)時，可能會污染其他細胞。 5. 實驗器材帶來的污染，如未徹底消毒滅菌的實驗器材。 6. 人體是某些支原體的正常菌群，因此操作人員的疏失也可能成為污染源。 7. 細胞庫管理不善，造成實驗室間的相互污染。 8. 細胞培養(yǎng)...

細胞培養(yǎng)中支原體難以徹底消滅的原因主要包括以下幾點： 1. 無細胞壁結(jié)構(gòu)：支原體是沒有細胞壁的微生物，這使得許多作用于細胞壁的抗*素對支原體無效。 2. 微小體積：支原體體積小，能夠穿過常規(guī)的除菌濾膜，例如0.20微米甚至0.10微米的濾膜。 3. 隱匿性：支原體污染初期很難被察覺，它們在普通光學(xué)顯微鏡下幾乎不可見，因此細胞被支原體污染后，前期很難被發(fā)現(xiàn)。 4. 傳播途徑多樣：支原體可以通過細胞培養(yǎng)物、細胞懸液、細胞培養(yǎng)用具等途徑迅速傳播。 5. 污染源 ：支原體污染源包括細胞間的交叉污染、操作人員的口腔、皮膚，以及細胞培養(yǎng)用的組分如血清、培養(yǎng)液等。...

細胞培養(yǎng)中建議使用支原體檢測的原因主要有以下幾點： 1. 支原體污染率高：常規(guī)細胞培養(yǎng)中支原體污染率保守估計在15-35%之間。 2. 影響實驗結(jié)果：支原體污染會嚴重干擾實驗結(jié)果的可信度，影響培養(yǎng)細胞的形態(tài)和生理特征。 3. 難以用光學(xué)顯微鏡檢測：支原體是極小的細菌，其細胞膜周圍沒有細胞壁，無法用光學(xué)顯微鏡檢測到。 4. 難以消滅：支原體能夠迅速滲透整個實驗室，一旦污染很難徹底消滅。 5. 影響產(chǎn)品質(zhì)量：支原體污染會影響細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量，監(jiān)管機構(gòu)推薦檢測所有細胞培養(yǎng)產(chǎn)物中是否存在支原體。 6. 保證實驗準確性：定期進行支原體檢測和去除，確保無支原體存在...

支原體去除試劑在清*支原體的過程中可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響。支原體去除試劑是一種非抗*素類試劑，它通過與支原體膜特異性結(jié)合，改變支原體膜的通透性，從而導(dǎo)致支原體破裂死亡。盡管該產(chǎn)品在作用期間可能會對細胞的活力和形態(tài)有一定的影響，但由于它不能穿過真核細胞的細胞膜，因此不會改變細胞的任何特性。支原體被清*后，細胞在后續(xù)的傳代過程中能快速恢復(fù)其正常的生長和增殖狀態(tài)，細胞后續(xù)的生長增殖幾乎無影響。 此外，該產(chǎn)品不含抗*素，不會使支原體發(fā)生耐藥反應(yīng)，細胞毒性小。然而，需要注意的是，不同細胞對支原體去除試劑的耐受程度有所差異，可以根據(jù)實驗結(jié)果適當調(diào)整細胞量和處理條件。在某些情況下，...

需要定期檢測支原體污染的客戶主要包括以下幾類： 1. 生物醫(yī)藥企業(yè)：生產(chǎn)涉及細胞培養(yǎng)的生物制品的公司，包括疫苗、生物藥物、基因產(chǎn)品等。 2. 細胞公司：進行細胞產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)的企業(yè)，需要確保所用細胞的安全性和有效性。 3. 科研機構(gòu)：從事細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)等研究的學(xué)術(shù)機構(gòu)，需要保證實驗結(jié)果的準確性。 4. 臨床單位：使用細胞技術(shù)進行的醫(yī)院或診所，需要確保用細胞的質(zhì)量。 5. 細胞庫：保存和供應(yīng)細胞株的細胞庫，需要對細胞資源進行定期檢測以保證其無污染。 6. 生物技術(shù)公司：提供生物技術(shù)服務(wù)的公司，如細胞培養(yǎng)、基因編輯等，需要確保服...

LAMP法，即環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（Loop-mediated isothermal amplification），是一種在恒定溫度下進行的核酸擴增方法。它由日本學(xué)者Notomi于2000年開發(fā)。LAMP法檢測有以下特性： 快速高效：LAMP技術(shù)可以在1小時內(nèi)把幾拷貝的目的序列迅速擴增到10^9^～10^10^拷貝，擴增效率高。 簡便性：LAMP技術(shù)不需要進行模板的預(yù)變性，減少了PCR技術(shù)升降溫帶來的影響以及對昂貴、精密實驗儀器的要求，同時擴增效率高，可以在較短時間內(nèi)完成檢測。 LAMP法因其快速、高效、特異、靈敏和經(jīng)濟等優(yōu)點，已經(jīng)應(yīng)用于病原菌、寄生蟲、病毒、疾病和轉(zhuǎn)基因產(chǎn)...

檢測新鮮培養(yǎng)基是否有支原體污染，可以采用以下五種方案： 1. 培養(yǎng)法：這是一種傳統(tǒng)且可靠的方法，通過將培養(yǎng)基接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上，觀察是否有支原體生長。這種方法較為耗時，但成本較低。 2. 熒光染色法：使用特定的熒光染料（如Hoechst 33258）對細胞進行染色，然后在熒光顯微鏡下觀察。如果存在支原體污染，可以看到細胞表面或細胞間隙中支原體DNA的熒光染色。 3. PCR法：通過設(shè)計針對支原體特定序列的引物，利用PCR技術(shù)特異性擴增目標DNA。PCR產(chǎn)物通過瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，如果出現(xiàn)條帶則表明存在支原體污染。 4. 電鏡觀察法：使...

細胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響，具體包括： 1. 細胞生長受影響：支原體污染可能導(dǎo)致細胞生長速度減慢，甚至停滯。 2. 細胞形態(tài)改變：支原體感*的細胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變，如細胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。 3. 細胞功能改變：支原體污染會影響細胞的代謝、增殖、分化等生理功能。 4. 細胞產(chǎn)物改變：支原體感*可能影響細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、細胞因子等生物活性物質(zhì)的表達和分泌。 5. 實驗結(jié)果不準確：支原體污染會干擾實驗結(jié)果的準確性，導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)不可靠。 6. 實驗重復(fù)性差：支原體污染的細胞培養(yǎng)批次間差異大，影響實驗的重復(fù)性。 ...

qPCR法，即定量聚合酶鏈式反應(yīng)（Quantitative Polymerase Chain Reaction）法，是一種高度靈敏和特異的分子生物學(xué)技術(shù)，用于檢測和定量DNA序列。在支原體檢測中，qPCR法的原理主要包括以下幾個步驟： 1. DNA提取：首先從待測樣本中提取DNA，這可能包括細胞培養(yǎng)上清液或組織樣本中的支原體DNA。 2. 設(shè)計特異性引物：針對支原體的保守DNA序列，如16S rRNA基因，設(shè)計特異性的DNA引物。 3. 熒光標記探針：使用熒光標記的探針，該探針與目標DNA序列互補，能夠在PCR擴增過程中與擴增的DNA結(jié)合。 4. Ct值確定：Ct值...

支原體預(yù)防的策略主要包括以下幾個方面： 1. 控制污染源：通過定期檢測和去除細胞培養(yǎng)中的支原體污染，確保細胞培養(yǎng)體系內(nèi)無支原體存在，從而獲得準確有效的實驗數(shù)據(jù)。 2. 改善無菌操作技術(shù)：通過提高實驗人員的操作技術(shù)和意識，避免在細胞培養(yǎng)過程中引入支原體污染。 3.使用無菌設(shè)備和耗材：使用無菌的細胞培養(yǎng)設(shè)備和耗材，如無菌培養(yǎng)基、血清等，減少支原體污染的風(fēng)險。 4. 定期消毒和清潔：對實驗室環(huán)境進行定期的消毒和清潔，包括工作臺、培養(yǎng)箱等，以減少支原體的潛在污染。 5. 使用預(yù)防性試劑：使用專門針對支原體的預(yù)防性試劑，如加入細胞培養(yǎng)基中的預(yù)防劑、超凈臺噴霧、水浴鍋預(yù)防...

方法 靈敏度 優(yōu)勢 劣勢 培養(yǎng)法 ☆☆☆ ü 便捷 ü 便宜 ü 金標準 ü 費勞力 ü 耗時長 ...

支原體污染的來源主要包括以下幾個方面： 1. 實驗室環(huán)境中可能存在支原體污染源，如空氣中的塵埃、其他培養(yǎng)物中的支原體污染等。 2. 實驗操作人員的手部、衣物或皮膚表面可能攜帶支原體，造成細胞培養(yǎng)的污染。 3. 培養(yǎng)基、血清等培養(yǎng)材料如果受到支原體污染，也會導(dǎo)致細胞培養(yǎng)物受到污染。 4. 細胞交叉污染，即使用已受污染的細胞株進行培養(yǎng)時，可能會污染其他細胞。 5. 實驗器材帶來的污染，如未徹底消毒滅菌的實驗器材。 6. 人體是某些支原體的正常菌群，因此操作人員的疏失也可能成為污染源。 7. 細胞庫管理不善，造成實驗室間的相互污染。 8. 細胞培養(yǎng)...