深圳細胞培養(yǎng)支原體檢測試劑

來源: 發(fā)布時間:2024-07-31

支原體檢測的樣本既可以是細胞,也可以是培養(yǎng)基。在細胞培養(yǎng)中,支原體污染是常見的問題,因此需要對細胞和培養(yǎng)基進行檢測。細胞庫、病毒種子批、對照細胞以及臨床用細胞等都需要進行支原體檢查,這通常包括培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法(DNA染色法)。同時,病毒類疫苗的病毒收獲液、原液也采用培養(yǎng)法檢查支原體,必要時,也可以采用指示細胞培養(yǎng)法篩選培養(yǎng)基。
此外,支原體檢測的培養(yǎng)基推薦使用支原體肉湯培養(yǎng)基和精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基等,這些培養(yǎng)基可用于檢測藥品和生物制品中的支原體。在進行支原體檢測時,需要取培養(yǎng)物樣品接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上。
因此,支原體檢測的樣本既可以是細胞,也可以是培養(yǎng)基,具體取決于檢測的目的和方法。
支原體檢測實驗的設計?深圳細胞培養(yǎng)支原體檢測試劑

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支原體污染一旦發(fā)生,不僅對細胞培養(yǎng)造成嚴重影響,甚至可能導致實驗結(jié)果失真。而且支原體污染在細胞培養(yǎng)實驗中相當常見。因此,預防措施是確保細胞培養(yǎng)環(huán)境和實驗結(jié)果可靠性的重要手段。
01/ 良好的無菌技術及實驗操作,保證操作不會引入新的污染
02/ 保持實驗空間的清潔
03/ 確保從可靠的來源獲取細胞,減少不同細胞之間的交叉?zhèn)魅?/span>
04/ 防止交叉污染
05/ 減少氣溶膠生成
06/ 謹慎使用抗*素
07/ 定期支原體篩查
08/ 丟棄或處理受到支原體污染的細胞
09/ 保持良好的記錄
杭州支原體檢測方法PCR法細胞培養(yǎng)中支原體污染的后果?

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細胞庫支原體檢測的必要性主要體現(xiàn)在以下幾個方面:
1. 確保細胞庫的質(zhì)量與安全性:細胞庫的建立需要為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細胞。支原體檢測是確保細胞庫中細胞質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。
2. 符合監(jiān)管要求:支原體檢測是生物制品安全性監(jiān)管的一部分,全球范圍內(nèi)的藥典、法規(guī)和指導文件中都有支原體檢測的相關說明。
3. 避免對生物制品的影響:支原體污染可能會影響生物制品的安全性和有效性,因此需要通過檢測來避免這種風險。
4. 維護細胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性:支原體是真核細胞和干細胞培養(yǎng)中最常見的問題之一,它們可以改變細胞的代謝、減緩增殖速度,甚至引起染色體畸變。
5. 預防交叉污染:由于支原體可以通過氣溶膠和微粒污染實驗室其他區(qū)域,支原體檢測有助于預防交叉污染的發(fā)生。
6. 保障數(shù)據(jù)的可靠性:支原體污染可能會影響實驗結(jié)果的準確性,因此定期進行支原體檢測有助于保障研究數(shù)據(jù)的可靠性。
7. 常規(guī)監(jiān)測的重要性:支原體應成為細胞培養(yǎng)實驗室的常規(guī)監(jiān)測項目,以確保細胞培養(yǎng)的質(zhì)量和安全。
8. 遵守藥典規(guī)定:根據(jù)中國藥典的規(guī)定,每8~12代細胞培養(yǎng)物應進行支原體檢查,以符合規(guī)定。

支原體預防的主要成分通常是指用于預防支原體污染的抗*素或化學試劑。在細胞培養(yǎng)中,預防支原體污染的措施包括在培養(yǎng)基中添加抗*素,以及采取其他預防措施來保持實驗室環(huán)境的清潔和無菌操作。以下是一些用于預防支原體污染的主要成分:
1. 四環(huán)素類抗*素:這類抗*素對支原體具有抑制作用,常用于治*和預防支原體感*。
2. 大環(huán)內(nèi)酯類抗*素:例如羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素等,用于治*肺炎支原體感*。
3. 喹諾酮類藥物:如氧氟沙星、司帕沙星等,也用于治*肺炎支原體感*。
4. 其他抗*素:例如氨基糖苷類、氯霉素等,對支原體有較小的抑制作用。
細胞被支原體污染了會有什么影響?

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方法

靈敏度

優(yōu)勢

劣勢

培養(yǎng)法

☆☆☆

ü 便捷

ü 便宜

ü 金標準

ü 費勞力

ü 耗時長

ü 需要特定的培養(yǎng)基

ü 特定支原體種類需要特定的培養(yǎng)基

DNA染色

(DAPI or Hoescht)

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 可能難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 可能假陽性可能性

間接染色

☆☆☆

ü 迅速

ü 便宜

ü 易檢測

ü 費時

ü 需要細胞系指示

ELISA

☆☆

ü 迅速

ü 客觀,易判讀結(jié)果

ü 可以鑒別支原體種屬

ü 受抗體限制

ü 價格高

免疫染色

☆☆

ü 迅速

ü 可檢測支原體種屬

ü 價格略高

ü 可檢測的支原體種屬有限

放射自顯影

☆☆

ü 迅速

ü 難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 費勞力

生物發(fā)光

☆☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

PCR

☆☆☆

ü 便宜

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

Real-Time PCR

☆☆☆

ü 便捷

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 結(jié)果可靠

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

LAMP

☆☆

ü 便捷

ü 無需DNA提取

ü *需10min左右的實驗操作時間

ü 具有特異性

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性 支原體檢測方法LAMP法?支原體去除試劑現(xiàn)貨

支原體去除和支原體預防有什么區(qū)別?深圳細胞培養(yǎng)支原體檢測試劑

需要定期檢測支原體污染的客戶主要包括以下幾類:
1. 生物醫(yī)藥企業(yè):生產(chǎn)涉及細胞培養(yǎng)的生物制品的公司,包括疫苗、生物藥物、基因產(chǎn)品等。
2. 細胞公司:進行細胞產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)的企業(yè),需要確保所用細胞的安全性和有效性。
3. 科研機構(gòu):從事細胞生物學、分子生物學、遺傳學等研究的學術機構(gòu),需要保證實驗結(jié)果的準確性。
4. 臨床單位:使用細胞技術進行的醫(yī)院或診所,需要確保用細胞的質(zhì)量。
5. 細胞庫:保存和供應細胞株的細胞庫,需要對細胞資源進行定期檢測以保證其無污染。
6. 生物技術公司:提供生物技術服務的公司,如細胞培養(yǎng)、基因編輯等,需要確保服務過程中細胞的質(zhì)量。
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