逆轉(zhuǎn)錄病毒生命周期的兩個獨特步驟,即逆轉(zhuǎn)錄和整合,是慢病毒載體功能的重要組成部分。脫殼后,剩余的病毒核酸和蛋白復(fù)合物稱為逆轉(zhuǎn)錄復(fù)合物(RTC),RTC通過主動運輸進入細(xì)胞核。轉(zhuǎn)運過程中,病毒RNA在RTC中通過以下方式逆轉(zhuǎn)錄為前病毒DNA。首先tRNA與病毒RNA基因組5'端引物結(jié)合位點(primer binding site,PBS)結(jié)合,并生成一個短片段的反義單鏈DNA,稱為強終止拷貝DNA(strong-stop copy DNA,sscDNA)。該sscDNA段隨后被轉(zhuǎn)移至病毒RNA的3'端,作為合成負(fù)鏈DNA的引物。在此過程中,重建了病毒生命周期必不可少的U3RU5序列。ELISA試...
實驗注意事項:建議先做幾個孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時,建議斜貼著培養(yǎng)板壁加,不要插到培養(yǎng)基頁面下加,容易產(chǎn)生氣泡,會干擾OD值讀數(shù)。白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時,貼壁細(xì)胞的*小接種量至少為1,000 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于2,500 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗,請先計算每孔相應(yīng)的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。如果沒有450nm的濾光片,可...
擴增潛力高:每次傳代可實現(xiàn)10倍以上細(xì)胞擴增,14天細(xì)胞數(shù)量達(dá)到1×106;多種培養(yǎng)形式兼容:可在多種容器形式下進行各種規(guī)模培養(yǎng):基質(zhì)膠、低吸附孔板和生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng);簡化的工作流程:而無需在培養(yǎng)或傳代過程中使用微載體或細(xì)胞濾網(wǎng),可在基質(zhì)膠中形成球狀體;較好的成本效益比:GMP級別生產(chǎn)條件下制備,批次質(zhì)量穩(wěn)定,試劑含量是常規(guī)市售干細(xì)胞培養(yǎng)基的2倍,培養(yǎng)基可通過補液方式維持細(xì)胞生長。14天實現(xiàn)**類器guan細(xì)胞數(shù)量達(dá)到1×106可實現(xiàn)手術(shù)組織、穿刺組織及胸腹水來源的樣本很大程度維持非小細(xì)胞肺ai類器guan與體內(nèi)**組織細(xì)胞的生物學(xué)特征及遺傳分子特征。熒光亮度更高,熒光偶聯(lián)物特異性好...
來源于生物體內(nèi)的熒光素,常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶。這些熒光素酶作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,這種技術(shù)被稱為報告基因檢測法或螢光素酶檢測法(LuciferaseAssay)。跟普通融合蛋白標(biāo)簽不同,使用熒光素酶構(gòu)建的報告基因可用作目的基因的定量分析。因此常用于研究啟動子、miRNA3'UTR克隆的功能與調(diào)控,因為它們對目的基因的調(diào)控可以是漸變的,而不是簡單的開和關(guān)兩種狀態(tài)。優(yōu)點:靈敏度高,檢測幅度寬;不是哺乳動物細(xì)胞內(nèi)源性基因;重復(fù)性好;與HTS兼容等。螢火蟲和海腎熒光素酶已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于協(xié)同報告并進行均一化研究。由于它們都是快速,容易和高靈敏的監(jiān)測...
在酶聯(lián)免疫實驗操作中,加樣是必不可少的項步驟,這步驟在整個實驗中都有著很大的影響。那么酶聯(lián)免疫加樣步驟問題應(yīng)如何解決處理呢? 一、加樣問題的可能原因 1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣; 2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3.加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。 二、解決方法 1.標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,**后必須立即顛倒**管混合5-10次,放置段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢...
常用的病毒載體有腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體只能感ran分裂期細(xì)胞,而且容量有限,腺病毒一般不能整合到染色體上,只能進行瞬時感ran。與其它逆轉(zhuǎn)錄病毒相比,慢病毒(LV)具有可以感ran非分裂期細(xì)胞、容納外源性基因片段大,可以長期表達(dá)等xian zhu優(yōu)點。慢病毒不產(chǎn)生任何有效的細(xì)胞免疫應(yīng)答,可作為一種體外基因運輸?shù)墓ぞ?。慢病毒載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因表達(dá)能持續(xù)數(shù)月,且無可觀察到的病理學(xué)現(xiàn)象。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達(dá)載體和包裝質(zhì)粒同時共轉(zhuǎn)...
自然殺傷(NK)細(xì)胞在識別和殺死**和病毒感ran的先天和后天免疫反應(yīng)中扮演著關(guān)鍵的角色。因此,已有許多研究嘗試研發(fā)在體外激huo和擴增NK細(xì)胞的方法,以用于和免疫細(xì)胞相關(guān)研究,而目前的方法包括使用細(xì)胞因子、化學(xué)試劑以及飼養(yǎng)細(xì)胞1,其中細(xì)胞因子在調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的活性中具有核xin作用。據(jù)報道,IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21和IFN-γ被歸類為NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性和增殖的活化細(xì)胞因子,并增強NK細(xì)胞對各種**的細(xì)胞毒性作用2。然而,這些激huoNK細(xì)胞的細(xì)胞因子組合仍需研究人員進一步優(yōu)化。該試劑盒中提供了所有必需的PCR試劑。只需添加DNA模板并進行PCR反應(yīng)。...
隨著病毒生物學(xué)的發(fā)展,種類繁多的病毒載體已越來越成為向各種實驗系統(tǒng)(如細(xì)胞系、原代細(xì)胞、組織臟器等)轉(zhuǎn)運核酸的重要工具。除了在實驗室的組織培養(yǎng)和動物模型生產(chǎn)中發(fā)揮重要作用,它們還被用于zhi 療遺傳性疾病的臨床試驗中。目前主流的病毒載體系統(tǒng)主要包括慢病毒(LV)、(γ-)逆轉(zhuǎn)錄病毒(RV)、腺病毒(Ad)和腺相關(guān)病毒(AAV)。我們分述之。慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒均屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科。其典型特征為其RNA基因組能逆轉(zhuǎn)錄為cDNA副本,cDNA副本又能穩(wěn)定整合至宿主細(xì)胞基因組中(這就是常說的穩(wěn)轉(zhuǎn))。逆轉(zhuǎn)錄病毒通常分兩種:簡單的(有時又稱為致ai病毒或γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒,如鼠白血病病毒)和復(fù)雜的(如慢病毒)。...
慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入。該載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達(dá)到持久性表達(dá)。在感ran能力方面可有效地感ran神經(jīng)元細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、**細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞,從而達(dá)到良好的的基因zhi liao效果,在美國已經(jīng)開展了臨床研究,效果非常理想,因此具有廣闊的應(yīng)用前景。慢病毒也被廣fan地應(yīng)用于表達(dá)RNAi的研究中。由于有些類型細(xì)胞脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效果差,轉(zhuǎn)移到細(xì)胞內(nèi)的siRNA半衰期短,體外合成siRNA對基因表達(dá)的抑zhi作用通常是短暫的,因而使其應(yīng)用受到較大的限制。采用事先在體外構(gòu)建能夠表達(dá)siRNA的載體,然后轉(zhuǎn)移到細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄siR...
就eGFP而言,相對于GFP,其熒光強度更強、熒光性質(zhì)更穩(wěn)定。mCherry是從DsRed演化來的性能*好的一個單體紅色熒光蛋白,可以和GFP系列熒光蛋白共用,實現(xiàn)多色標(biāo)記。熒光蛋白活性和被融合的目標(biāo)蛋白功能相互沒有明顯影響。這些熒光標(biāo)簽蛋白,其融合表達(dá)目的蛋白后具有以下優(yōu)點:1.不用破碎組織細(xì)胞和不加任何底物,直接通過熒光顯微鏡就能在活細(xì)胞中發(fā)出綠色熒光,實時顯示目的基因的表達(dá)情況,而且熒光性質(zhì)穩(wěn)定,被譽為活細(xì)胞探針。2.其自發(fā)熒光,不需用目的基因的抗體或原位雜交技術(shù)就可推知目的基因在細(xì)胞中的定位等情況。3.同時細(xì)胞內(nèi)的其它產(chǎn)物不會干擾標(biāo)簽蛋白檢測,從而使其檢測更顯得快速、簡便、靈敏度高...
WST-1細(xì)胞活力和增殖檢測試劑盒描述: 通過存在于活細(xì)胞中的琥珀酸四唑還原酶將四唑鎓鹽還原成有色甲compounds化合物,提供了測量細(xì)胞活力和增殖的靈敏且準(zhǔn)確的方法。然而,*常用的四唑鹽MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物]的缺點是由MTT產(chǎn)生的甲dye染料極不溶于水,因此分光光度定量需要額外的提取步驟。ScienCell WST-1細(xì)胞活力和增殖測定使用四唑鹽WST-1[2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺苯基)-2H四唑]。WST-1在代謝活性細(xì)胞上產(chǎn)生高度水溶性的福爾馬贊,允許直接和用戶友好的細(xì)胞活力和...
您想要快速、準(zhǔn)確的了解不同處理、來源的組織或細(xì)胞樣品之間某一類信號通路相關(guān)基因的表達(dá)情況嗎?為簡化基因分析研究,美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號通路相關(guān)基因群之間的精確表達(dá)倍數(shù)關(guān)系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標(biāo)志物等方面的研究,可在一個96 孔板內(nèi)同時檢測96個相關(guān)基因的表達(dá),少至0.1ng cDNA 就可快速準(zhǔn)確的檢測和量化靶基因的表達(dá)。除了該試劑盒,還提供單獨的引物進行基因表達(dá)分析,這些引物組能特異性地識別和...
化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的優(yōu)勢1.靈敏度高:靈敏度高是化學(xué)發(fā)光免疫分析關(guān)鍵的優(yōu)越性。化學(xué)發(fā)光免疫分析能夠檢出放射性免疫分析和酶聯(lián)免疫分析等方法無法檢出的物質(zhì),對疾病的早期診斷具有十分重要的意義。2.寬的線性動力學(xué)范圍:發(fā)光強度在4-6個量級之間,與測定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。這與顯色酶聯(lián)免疫分析吸光度(OD值)2.0的范圍相比,優(yōu)勢明顯。雖然同位素放射免疫也有較寬的線性動力學(xué)范圍,但是放射性限制其應(yīng)用。3.光信號持續(xù)時間長:化學(xué)發(fā)光免疫分析的光信號持續(xù)時間可達(dá)數(shù)小時甚至一tian,簡化了實驗操作及測量。4.分析方法簡便快速:絕大多數(shù)分析測定jin需加入一種試劑(或符合制劑)的一步模式。5.結(jié)果穩(wěn)定、...
CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高,操作簡便,使用安全,重現(xiàn)性好的細(xì)胞增殖與活性檢測方法。與傳統(tǒng)的MTT相比無需有機溶劑和放射性同位素,步驟少,無損失,結(jié)果準(zhǔn)確!本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒jin一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作 。無須使用同位素,所有的檢測步驟jin在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。1. MTT實驗生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO等有機溶劑溶解;而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,不僅省去了溶解的步驟,更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差。2. 與MT...
注意事項:1、酚紅和血清對CCK-8法的檢測不會造成干擾,可以通過減去空白孔中本底的吸光度而消除。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。3、當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時,培養(yǎng)板*外一圈的孔容易干燥揮發(fā),導(dǎo)致體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下,*外一圈的孔只加培養(yǎng)基,不作為測定孔用。4、金屬對CCK-8顯色有影響:終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會5%、15%、90%的抑zhi顯色反應(yīng),使靈敏度降低。如果終濃度是10mM,將會100%抑zhi顯色反應(yīng)。5、部分懸浮細(xì)胞由于染色比較困難,一般需要增加細(xì)胞數(shù)量并延長培養(yǎng)時間。熒光亮度更高,熒光偶...
您想要快速、準(zhǔn)確的了解不同處理、來源的組織或細(xì)胞樣品之間某一類信號通路相關(guān)基因的表達(dá)情況嗎?為簡化基因分析研究,美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號通路相關(guān)基因群之間的精確表達(dá)倍數(shù)關(guān)系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標(biāo)志物等方面的研究,可在一個96 孔板內(nèi)同時檢測96個相關(guān)基因的表達(dá),少至0.1ng cDNA 就可快速準(zhǔn)確的檢測和量化靶基因的表達(dá)。除了該試劑盒,還提供單獨的引物進行基因表達(dá)分析,這些引物組能特異性地識別和...
您想要快速、準(zhǔn)確的了解不同處理、來源的組織或細(xì)胞樣品之間某一類信號通路相關(guān)基因的表達(dá)情況嗎?為簡化基因分析研究,美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號通路相關(guān)基因群之間的精確表達(dá)倍數(shù)關(guān)系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標(biāo)志物等方面的研究,可在一個96 孔板內(nèi)同時檢測96個相關(guān)基因的表達(dá),少至0.1ng cDNA 就可快速準(zhǔn)確的檢測和量化靶基因的表達(dá)。除了該試劑盒,還提供單獨的引物進行基因表達(dá)分析,這些引物組能特異性地識別和...
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很...
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很...
人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒對體內(nèi)各種重要生理功能的實現(xiàn)以及疾病的發(fā)生進程不可或缺,如造血作用、淋巴組織發(fā)育、炎癥反應(yīng)、白細(xì)胞遷移、過敏、傷口修復(fù)、新血管生成、cancer發(fā)生和**遷移等。顧名思義,人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒的功能主要是趨化各種細(xì)胞。典型的例子,如人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒通過趨化作用向炎癥部位招募各種白細(xì)胞。 其中包括兩個步驟:首先是白細(xì)胞在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的初始性滾動轉(zhuǎn)換成穩(wěn)定性結(jié)合,并穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞層;然后,引導(dǎo)這些細(xì)胞向gan染部...
來源于生物體內(nèi)的熒光素,常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶。這些熒光素酶作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,這種技術(shù)被稱為報告基因檢測法或螢光素酶檢測法(LuciferaseAssay)。跟普通融合蛋白標(biāo)簽不同,使用熒光素酶構(gòu)建的報告基因可用作目的基因的定量分析。因此常用于研究啟動子、miRNA3'UTR克隆的功能與調(diào)控,因為它們對目的基因的調(diào)控可以是漸變的,而不是簡單的開和關(guān)兩種狀態(tài)。優(yōu)點:靈敏度高,檢測幅度寬;不是哺乳動物細(xì)胞內(nèi)源性基因;重復(fù)性好;與HTS兼容等。螢火蟲和海腎熒光素酶已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于協(xié)同報告并進行均一化研究。由于它們都是快速,容易和高靈敏的監(jiān)測...
不過也有用單抗做檢測抗體的情況,尤其是在科研中。雙抗體夾心法具有高靈敏度、高專一性的優(yōu)勢,但該法只適用于有多個結(jié)合位點的抗原檢測,主要用于檢測各種大分子抗原——例如在醫(yī)學(xué)檢測中測定HBsAg、HBeAg、AFP等疾病相關(guān)的,以及在科研中檢測細(xì)胞因子等。 由于雙抗體夾心法特異性高,在檢測過程中有時會將樣本和酶標(biāo)抗體同時加入進行反應(yīng),稱為雙抗體夾心一步法,因為操作時間短,在商業(yè)化生產(chǎn)中有很大優(yōu)勢。 但雙抗體夾心一步法要特別注意ELISA中的鉤狀效應(yīng)(hook ffect),因為此時如果樣本中抗原含量過高會導(dǎo)致其與固相抗體和酶標(biāo)抗體均有結(jié)合而無法形成“夾心復(fù)合物”,此時測出的結(jié)果將低...
1996年第yi次報道其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)是一個包含有11個β折疊的“桶”形結(jié)構(gòu),發(fā)色團隱藏在結(jié)構(gòu)的中心,不被水溶劑猝滅。這種緊密排列的結(jié)構(gòu)對整個GFP蛋白是很重要的,它幾乎可以完全維持熒光活性;少量的斷裂是可以平衡的,少量的點突變也是可以接受的。與當(dāng)時的傳統(tǒng)熒光染料相比,GFP的主要優(yōu)勢在于它無毒,并且可以在活細(xì)胞中表達(dá),從而能夠用于研究動態(tài)的生理過程。 幾乎就在它的序列被闡明的同時,科學(xué)家們就開始通過誘導(dǎo)突變來設(shè)計新的綠色熒光蛋白版本。1995年,RogerY.Tsien描述了一個S65T點突變,該突變增加了GFP的熒光強度和光穩(wěn)定性。這也使其主激發(fā)峰從395nm轉(zhuǎn)移到488nm,有效地...
慢病毒載體(Lentiviralvector)較逆轉(zhuǎn)錄病毒載體有更廣的宿主范圍,慢病毒能夠有效感ran非周期性和有絲分裂后的細(xì)胞。慢病毒載體能夠產(chǎn)生表達(dá)shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性細(xì)胞、干細(xì)胞、受精卵以及分化的后代細(xì)胞中表達(dá)shRNA,實現(xiàn)在多種類型的細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因小鼠中特異而穩(wěn)定的基因表達(dá)的功能性沉默,為在原代的人和動物細(xì)胞組織中快速而高效地研究基因功能,以及產(chǎn)生特定基因表達(dá)降低的動物提供了可能性。慢病毒作為siRNA的攜帶者,不但具備特異性地使基因表達(dá)沉默的能力,而且充分發(fā)揮了慢病毒載體自身所具備的優(yōu)勢,為基因功能的研究提供了更強有力的工具。慢病毒載體可以將外源基因或外源的...
細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能的研究,是細(xì)胞生物學(xué)的基本課題,其重要的研究手段之一是分離純的亞細(xì)胞組分 。這種拆離的方法,使細(xì)胞中各種生物學(xué)過程彼此分開,互不干擾,便于確定一種復(fù)雜過程中的細(xì)節(jié),從而深化我們對細(xì)胞整體功能的認(rèn)識。 常規(guī)分離提取方法往往一次jin能提取1-2種細(xì)胞組分,同時不僅對設(shè)備要求高,而且操作起來費時費力,*后的效果還不佳。作為生命科學(xué)領(lǐng)域知ming的解決方案供應(yīng)商,艾美捷科技為您推薦市場上唯yi一款能夠一次性提取4種組分的試劑盒,能夠滿足絕大多數(shù)科研工作者的分離需求,不僅高效便捷,更確保蛋白以及組分的完整。 示蹤試劑盒中所使用的熒光探針具有極低細(xì)胞毒性和無生物活性的特點。小...
hela細(xì)胞*早起源于20世紀(jì)50年代早期的一種高度侵襲性的宮頸ai細(xì)胞,作為第yi個不朽的人類細(xì)胞系,hela細(xì)胞是目前世界上*受研究者歡迎的細(xì)胞系之一。hela細(xì)胞在培養(yǎng)過程中很容易繁殖,如果hela細(xì)胞污染了其他細(xì)胞,它們很快就會超過原來的細(xì)胞。因此,hela細(xì)胞污染已成為科學(xué)界的一個重大課題。由于細(xì)胞系中hela細(xì)胞污染的可能性很高,建議進行常規(guī)評估。 Sciencell的Hela細(xì)胞污染檢測試劑盒(HLCC)專為敏感、快速和pcr法檢測人培養(yǎng)細(xì)胞中hela細(xì)胞污染的簡易方法。hela基因組學(xué)DNA(gdna)檢測引物集(hld)識別并放大hela細(xì)胞...
報告基因被廣泛應(yīng)用于篩選轉(zhuǎn)化的細(xì)胞和組織。在過去的10年里,熒光蛋白已經(jīng)成為活細(xì)胞成像研究中不可或缺的一部分。DsRED是可與其他篩選標(biāo)記進行雙標(biāo)記,同時又能避免植物葉綠素自發(fā)熒光的理想報告基因。本研究利用含有表達(dá)DsRED的雙元載體pKGWRR轉(zhuǎn)化核桃體細(xì)胞胚,并對這種紅色熒光蛋白可視報告基因?qū)ε咛ズ驮偕仓甑挠绊戇M行評估。結(jié)果表明,DsRED熒光強度在7~10d達(dá)到*高,24個存活的體細(xì)胞胚中有14個檢測到紅色熒光。這些E0胚每2周可以獲得25個全熒光E1胚和43個全熒光E2胚。DsRED陽性胚的發(fā)芽率達(dá)80%以上,獲得了45株可以檢測到紅色熒光的轉(zhuǎn)基因核桃植株。再生轉(zhuǎn)基因植株的組織中...