您想要快速、準(zhǔn)確的了解不同處理、來(lái)源的組織或細(xì)胞樣品之間某一類信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)情況嗎?為簡(jiǎn)化基因分析研究,美國(guó)sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡(jiǎn)單的獲得這些不同來(lái)源樣品之間您感興趣的信號(hào)通路相關(guān)基因群之間的精確表達(dá)倍數(shù)關(guān)系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標(biāo)志物等方面的研究,可在一個(gè)96 孔板內(nèi)同時(shí)檢測(cè)96個(gè)相關(guān)基因的表達(dá),少至0.1ng cDNA 就可快速準(zhǔn)確的檢測(cè)和量化靶基因的表達(dá)。除了該試劑盒,還提供單獨(dú)的引物進(jìn)行基因表達(dá)分析,這些引物組能特異性地識(shí)別和高效地?cái)U(kuò)增靶基因的cDNA。
可以應(yīng)用以下等領(lǐng)域:
1、探索新型藥物靶向基因,
2、發(fā)現(xiàn)正常和病理細(xì)胞之間的信號(hào)異常,
3、確定藥物作用機(jī)制,
4、預(yù)測(cè)各種疾病的藥物療效,
5、評(píng)估藥物對(duì)基因表達(dá)和信號(hào)傳導(dǎo)的影響。
Hela細(xì)胞污染檢測(cè)試劑盒專為敏感、快速和pcr法檢測(cè)人培養(yǎng)細(xì)胞中hela細(xì)胞污染的簡(jiǎn)易方法。實(shí)時(shí)熒光定量pcr試劑盒
每種試劑都有其佳反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng),會(huì)造成整板本底高,陽(yáng)性率高。溫育般用濕盒或水浴,ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。作為記錄測(cè)定結(jié)果的儀器,酶標(biāo)儀的性能穩(wěn)定與否,決定結(jié)果的可靠度。先酶標(biāo)儀應(yīng)定期進(jìn)行保養(yǎng),對(duì)濾光片要定期校正;其次酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)置要正確,好使用雙波長(zhǎng),個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng),個(gè)參比波長(zhǎng),以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)好先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標(biāo)儀性能有所不同,使用中應(yīng)詳細(xì)閱讀說(shuō)明書。 實(shí)時(shí)熒光定量pcr試劑盒做細(xì)胞遷移和侵襲、細(xì)胞黏附、細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性等實(shí)驗(yàn)時(shí),想監(jiān)測(cè)細(xì)胞變化,能看到細(xì)胞遷移的整個(gè)過(guò)程。
ELISA是一種基于酶的免疫測(cè)定方法,由于酶標(biāo)的放大作用,利用酶標(biāo)記抗體的免疫檢測(cè),因其高特異性和敏感性而日益受到人們的青睞。細(xì)胞因子夾心ELISA是一種敏感的酶免疫分析方法,可以特異性地檢測(cè)和定量可溶性細(xì)胞因子和趨化因子蛋白的濃度。這一方法的基本原理是:①將已知抗體結(jié)合到某種固相載體表面;②加待測(cè)抗原,如兩者是特異的,則發(fā)生結(jié)合,然后把多余抗體洗除;③加入與待測(cè)抗原呈特異反應(yīng)的酶聯(lián)抗體,使形成“夾心”;④加入該酶的底物,若看到有色的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生,說(shuō)明在孔壁上存在相應(yīng)的抗原,利用酶標(biāo)儀測(cè)其OD值。有色產(chǎn)物的量與待測(cè)抗原的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
雙抗體夾心法是夾心法中的一種主要形式,我們先談?wù)剨A心法吧:
夾心法(Sandwich ELISA)分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法:
雙抗體夾心法中抗原的2個(gè)不同的抗原表位被兩個(gè)抗體-捕捉抗體和檢測(cè)抗體,分別結(jié)合。捕捉抗體固定于載體即酶標(biāo)板上,檢測(cè)抗體通過(guò)結(jié)合抗原進(jìn)行顯色分析。
應(yīng)用于雙抗體夾心法檢測(cè)的捕捉抗體通常是單抗,偶爾有用多抗做為捕捉抗體的情況,但很少見,因?yàn)橐远嗫棺鳛椴蹲娇贵w容易出現(xiàn)交叉反應(yīng)而降低特異性。
檢測(cè)抗體通常為多抗,在商業(yè)化的科研試劑盒中經(jīng)常用到生物素標(biāo)記的山羊多抗,再讓生物素標(biāo)記的多抗與HRP標(biāo)記的親和素或者鏈霉親和素結(jié)合,然后再加HRP也就是辣根過(guò)氧化物酶的底物,通常是TMB反應(yīng)顯色,這種方法是在傳統(tǒng)的HRP酶標(biāo)記抗體的雙抗體夾心法ELISA中引入了生物素-親和素放大系統(tǒng)。 熒光素酶普遍具有靈敏度高、檢測(cè)快速、方便等特點(diǎn)。
細(xì)胞凋亡晚期,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè),這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度。emsa試劑盒
以GFP作為標(biāo)記的質(zhì)??商娲股鷖u的作用,可以幫助識(shí)別哪些細(xì)胞成功地轉(zhuǎn)染了質(zhì)粒。實(shí)時(shí)熒光定量pcr試劑盒
競(jìng)爭(zhēng)法也是一種很常用的方法,一起看看:
競(jìng)爭(zhēng)法(Competitive ELISA)是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標(biāo)抗體/抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的分析方法。當(dāng)游離抗體(或抗原)濃度越高,則能與固定抗原(或抗體)結(jié)合的酶標(biāo)抗體(或抗原)就越少,后續(xù)顯色就越淺,即與對(duì)照相比,顯色越淺,表示檢測(cè)樣本中抗體(或抗原)含量越高。
該法特別適合小分子物質(zhì)的檢測(cè)也可用于檢測(cè)比較不純的樣本,且重復(fù)性好,但是檢測(cè)的靈敏度和專一性較差。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原常用于檢測(cè)小分子抗原及半抗原,這類抗原通常缺乏兩個(gè)以上的識(shí)別位點(diǎn),不適用于雙抗夾心法進(jìn)行測(cè)定。該方法在商業(yè)化ELISA試劑盒中被廣fan運(yùn)用。 實(shí)時(shí)熒光定量pcr試劑盒
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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過(guò)STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。