ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。許多用于檢測(cè)各種細(xì)胞內(nèi)條件的生物傳感器都是基于GFP。qPCR試劑盒
端粒是染色體末端的重復(fù)核苷酸元素,保護(hù)染色體免受降解和遺傳信息丟失。正常二倍體細(xì)胞在每個(gè)細(xì)胞周期中都會(huì)丟失端粒。因此,端粒長(zhǎng)度隨著時(shí)間的推移而減少,并可能預(yù)測(cè)壽命。端??s短對(duì)健康狀況有負(fù)面影響,并與許多健康問(wèn)題有關(guān),包括衰老和ai癥。端粒長(zhǎng)度的準(zhǔn)確、一致的定量在染色體不穩(wěn)定、DNA修復(fù)、衰老、凋亡、細(xì)胞功能紊亂和zhong瘤發(fā)生等細(xì)胞生物學(xué)的許多方面都具有重要意義。
ScienCell的絕dui人類端粒長(zhǎng)度定量qPCR檢測(cè)試劑盒(AHTLQ)旨在直接測(cè)量人類細(xì)胞群的平均端粒長(zhǎng)度。端粒引物集識(shí)別并放大端粒序列。單拷貝參考(SCR)引物集識(shí)別并放大人類17號(hào)染色體上一個(gè)100 bp長(zhǎng)的區(qū)域,并作為數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化的參考。已知端粒長(zhǎng)度的參考基因組DNA樣本可作為計(jì)算目標(biāo)樣本端粒長(zhǎng)度的參考。精心設(shè)計(jì)的引物確保:(i)可靠定量的高效性;(ii)無(wú)非特異性擴(kuò)增。每一個(gè)引物組都通過(guò)qPCR、熔融曲線分析和凝膠電泳對(duì)擴(kuò)增特異性進(jìn)行了驗(yàn)證,并通過(guò)模板串聯(lián)稀釋對(duì)擴(kuò)增效率進(jìn)行了驗(yàn)證。 Colorimetric Histone Acetyltransferase Activity Assay細(xì)胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到較好測(cè)定時(shí)間。
腺病毒與其他病毒工具比較,具有以下優(yōu)勢(shì):a.是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng):腺病毒感ran細(xì)胞后,1-2天即可表達(dá),是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng);b.滴度高:腺病毒系統(tǒng)在轉(zhuǎn)有E1基因的HEK293細(xì)胞中可進(jìn)行自我復(fù)制,可產(chǎn)生滴度為1010到1011PFU/mL的病毒;c.載體容量大:可容納不超過(guò)5kb的片段;d.不整合到染色體中,無(wú)插入致突變性:腺病毒除卵細(xì)胞以外,幾乎在所有已知細(xì)胞中都不整合到染色體中,因此避免了因整合而引發(fā)的潛在的基因突變和隨機(jī)效應(yīng)。
AAV在基因傳遞和表達(dá)的優(yōu)勢(shì)1.宿主范圍廣:隨時(shí)可轉(zhuǎn)染的 AAV 可高效感ran分裂和非分裂細(xì)胞;2.多種血清型 :AAV1,AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8 和 AAV9 等;3.安全性高:ITR 序列和 rep/cap 基因分別由獨(dú)li的質(zhì)粒表達(dá);未發(fā)現(xiàn) AAV 對(duì)人體致 病,rAAV 去除了 wtAAV 基因組的96%,進(jìn)一步保證了安全性;4.免疫原性低:AAV2 的基因組jin 4681 個(gè)核苷酸,便于用常規(guī)的重組 DNA 技術(shù)進(jìn)行操作,而且進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)造成的免疫反應(yīng)??;5.擴(kuò)散性強(qiáng):AAV可以穿透血腦屏障,是*理想的神經(jīng)元和膠質(zhì)神經(jīng)下感ran工具。
注意事項(xiàng):1、酚紅和血清對(duì)CCK-8法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾,可以通過(guò)減去空白孔中本底的吸光度而消除。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。3、當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)板*外一圈的孔容易干燥揮發(fā),導(dǎo)致體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下,*外一圈的孔只加培養(yǎng)基,不作為測(cè)定孔用。4、金屬對(duì)CCK-8顯色有影響:終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5%、15%、90%的抑zhi顯色反應(yīng),使靈敏度降低。如果終濃度是10mM,將會(huì)100%抑zhi顯色反應(yīng)。5、部分懸浮細(xì)胞由于染色比較困難,一般需要增加細(xì)胞數(shù)量并延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間。這些檢測(cè)試劑盒旨在為血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品提供準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)定量。
微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MicrosatelliteInstability,MSI),是指由于在DNA復(fù)制時(shí)插入或缺失突變引起的微衛(wèi)星(Microsatellite,MS)序列長(zhǎng)度改變的現(xiàn)象,常由錯(cuò)配修復(fù)功能(Mismatchrepair,MMR)缺陷引起。MS序列,是一些短而重復(fù)的DNA序列,一般由1~6個(gè)核苷酸組成,串聯(lián)重復(fù)排列,常見(jiàn)類型為雙堿基CA/GA/GT或單堿基A/T等。MS序列可以位于基因的重要非編碼區(qū),也可以位于基因的編碼區(qū),多態(tài)性分布于整個(gè)基因組,個(gè)體差異大。MSI現(xiàn)象于1993年被Jacobs等人在結(jié)直腸ai中*先發(fā)現(xiàn)。隨著針對(duì)MSI的研究深入,發(fā)現(xiàn)MSI現(xiàn)象不止存在于結(jié)直腸ai,在子宮內(nèi)膜ai、胃ai、小腸腺ai、胰腺ai、肝膽**、卵巢ai、宮頸ai、乳腺ai等實(shí)體瘤中均有發(fā)生。免疫腫/瘤學(xué)試劑盒可檢測(cè)可溶性免疫檢查點(diǎn)分子,有助于提供ai癥免疫的全/面信息。外泌體檢測(cè)
CCK-8試劑盒可以用于生物活性因子的活性檢測(cè),抗**藥物的篩選,細(xì)胞增值的測(cè)定。qPCR試劑盒
宿主細(xì)胞蛋白(hostcellprotein,HCP)是指生物制品中來(lái)自生產(chǎn)細(xì)胞系的宿主細(xì)胞的蛋白成分,既包括宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu)蛋白也包括宿主細(xì)胞(傳代細(xì)胞)分泌的促生長(zhǎng)因子等。HCP具有潛在的安全風(fēng)險(xiǎn),作為生物制品中的非目標(biāo)成分,HCP可能引發(fā)機(jī)體未知的免疫應(yīng)答而影響生物制品的功效,甚至引起超敏反應(yīng)或其他不良反應(yīng)。因此,建立合適的HCP檢測(cè)方法,有助于生物制品的質(zhì)量控制,提高生物制品的使用安全性。所有生物制劑的工藝開(kāi)發(fā)的都必須經(jīng)過(guò)HCP檢測(cè),并證明已在純化過(guò)程中將它們降低到安全水平,一般要求每mg藥物HCP應(yīng)當(dāng)控制在ng范圍內(nèi)。qPCR試劑盒
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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過(guò)STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。