寧夏作用dMMR抗體檢測(cè)試劑創(chuàng)新服務(wù)

dMMR（MSH6/MLH1/PMS2/MSH2）抗體檢測(cè)試劑錯(cuò)配修復(fù)〈MismatchRepair,MMR)發(fā)生于DNA復(fù)制、重組及損傷修復(fù)過(guò)程，能夠識(shí)別和修復(fù)錯(cuò)誤的插入、缺失和整合。人體內(nèi)常見(jiàn)的4種錯(cuò)配修復(fù)蛋白，即hMLH1、hMSH2、hMSH6、hPMS2協(xié)同發(fā)揮DNA錯(cuò)配修復(fù)功能。MMR系統(tǒng)任何一種蛋白缺失，都會(huì)導(dǎo)致DNA錯(cuò)配修復(fù)功能缺陷(MismatchRepairDeficiency,dMMR)，產(chǎn)生復(fù)制錯(cuò)誤或微衛(wèi)顯不穩(wěn)定(MicrosatelliteInstability,MSI)，進(jìn)而誘導(dǎo)liu發(fā)生。

邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的dMMR抗體檢測(cè)試劑采用免疫組織化學(xué)法（IHC）檢測(cè)liu組織中MLH1、MSH2、MSH6和、PMS2四種蛋白的表達(dá)。

備案號(hào)

PMS2抗體試劑蘇蘇械備20180570號(hào)

MSH6抗體試劑蘇蘇械備20180569號(hào)

MSH2抗體試劑蘇蘇械備20180568號(hào)

MLH1抗體試劑蘇蘇械備20180519號(hào)

產(chǎn)品特點(diǎn)**使用北歐免疫組化質(zhì)控中心NordiQC推薦的IHC抗體組合。精確經(jīng)多平臺(tái)平行驗(yàn)證（MSI-PCR、MSI-NGS)，一致性高，特異性好普適覆蓋多個(gè)主流IHC自動(dòng)染色平臺(tái)，適用范圍廣便捷方法簡(jiǎn)單易行，醫(yī)保覆蓋。 邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)建立了符合質(zhì)量體系規(guī)定的覆蓋全平臺(tái)的伴隨診斷產(chǎn)品研發(fā)實(shí)驗(yàn)室、質(zhì)檢實(shí)驗(yàn)室，擁有GSP證書(shū)。寧夏作用dMMR抗體檢測(cè)試劑創(chuàng)新服務(wù)

    發(fā)明人還提供上述任一所述的抗msh6蛋白單克隆抗體，在msh6蛋白免疫檢測(cè)中的用途。進(jìn)一步地，所述免疫檢測(cè)包括免疫組織化學(xué)法，免疫印跡法和酶聯(lián)免疫法。區(qū)別于現(xiàn)有技術(shù)，上述技術(shù)方案依據(jù)msh6蛋白、抗原性、組成氨基酸的親疏水性以及二級(jí)結(jié)構(gòu)，選擇msh6蛋白第1-100位氨基酸序列與gst蛋白融合表達(dá),其dna編碼序列為seqid**,用大腸桿菌進(jìn)行表達(dá)，得到免疫原。對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，經(jīng)細(xì)胞融合、篩選和亞克隆，獲得高效分泌抗msh6蛋白單克隆抗體的單克隆細(xì)胞系abm58060-20a2-pu,以及由該細(xì)胞系所分泌的抗msh6蛋白單克隆抗體。本方案得到的抗體具有高特異性、敏感性，可以特異性識(shí)別表達(dá)msh6蛋白的細(xì)胞，適用于免疫學(xué)檢測(cè)，特別是免疫組化檢測(cè)?；旧Y(jié)果圖(左為abm58060-20a2-pu分泌的msh6，右為市售msh6)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1重組msh6蛋白片段的制備一、抗原片段選擇依據(jù)uniprot中登錄號(hào)為p52701的蛋白質(zhì)序列進(jìn)行序列和二級(jí)結(jié)構(gòu)分析，全長(zhǎng)為1360個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的msh6蛋白含有muts超家族區(qū)域，其分子量約為152kda左右，依據(jù)通過(guò)在線服務(wù)器測(cè)的蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)(secondarystructure)和表面可及性(surfaceaccessibility)參數(shù)，并通過(guò)對(duì)其抗原性指數(shù)(jamesonba,:(1):181-6.)的分析結(jié)果。廣西一體化dMMR抗體檢測(cè)試劑經(jīng)驗(yàn)豐富方法簡(jiǎn)單易行，醫(yī)保覆蓋，適于臨床推廣。

    且尚未被國(guó)際認(rèn)可。3.缺乏**別結(jié)直腸ai數(shù)據(jù)平臺(tái)：不同地區(qū)、不同人群的篩查資料同質(zhì)性差，無(wú)法統(tǒng)一形成大宗數(shù)據(jù)，這嚴(yán)重地制約了我國(guó)結(jié)直腸ai流行病學(xué)研究及相關(guān)政策制定。同時(shí)也限制了結(jié)直腸ai領(lǐng)域相關(guān)的臨床及基礎(chǔ)科研進(jìn)步。有必要以城市科研院所為中心，以地區(qū)為試點(diǎn)，努力建成代表性區(qū)域性結(jié)直腸ai數(shù)據(jù)平臺(tái)，并進(jìn)一步推廣至國(guó)家范圍。六、結(jié)語(yǔ)結(jié)直腸ai由于自身特點(diǎn)，早期篩查預(yù)防對(duì)疾病控制和***有重大意義。當(dāng)前主要的結(jié)直腸ai篩查包括FOBT、FIT及結(jié)腸鏡檢查，我國(guó)學(xué)者根據(jù)國(guó)情研制出結(jié)直腸ai篩查高危因素量化問(wèn)卷。但上述篩查方法均存有弊端，臨床醫(yī)師期待未來(lái)能有更加方便、更為高效及依從性更好的篩查方法。糞便DNA試劑盒等技術(shù)正在進(jìn)行臨床驗(yàn)證，或許能給出令人滿意的答案。國(guó)內(nèi)外結(jié)直腸ai篩查開(kāi)展已有近50年歷史，相關(guān)篩查策略并無(wú)**性改進(jìn)。隨著傳統(tǒng)結(jié)直腸ai篩查策略結(jié)果的陸續(xù)報(bào)道，筆者有理由開(kāi)始反思其短板和不足并思索改進(jìn)辦法，如改進(jìn)傳統(tǒng)結(jié)直腸ai篩查高危因素量化問(wèn)卷、融入上述創(chuàng)新的篩查技術(shù)等，有望帶來(lái)全新高效的篩查策略。結(jié)直腸ai是liu中為國(guó)內(nèi)外學(xué)者認(rèn)識(shí)、***、研究較早的疾病，其篩查工作目前已初具成效。

dMMR 是 MMR 表達(dá)缺失，pMMR 是 MMR 表達(dá)正常。dMMR 表現(xiàn)為高頻度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-H）， pMMR 表現(xiàn)為低頻度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-L）或微衛(wèi)星穩(wěn)定（MS-S）。 目前，*常用的篩查結(jié)直腸ai MMR 表達(dá)有無(wú)缺失的方法有 2 種：免疫組化檢測(cè) MMR 相關(guān)蛋白的表達(dá)，以及 PCR 檢測(cè)多個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)以判斷有否存在 MSI。

下面重點(diǎn)來(lái)了： 免疫組化：有缺失，dMMR；無(wú)缺失，pMMR 免疫組化主要檢測(cè)ai組織中 MLH1，PMS2，MSH2 及 MSH6 這 4 種蛋白的表達(dá)： 

1. 若結(jié)果顯示任一蛋白完全缺失，則判讀為  dMMR； 

2. 若顯示無(wú)蛋白缺失，則判度為 pMMR。 所以回到上面的病例： MLH1，PMS2，MSH2 及 MSH6 蛋白均未缺失，應(yīng)判讀為 pMMR，可以用單藥 5-Fu 進(jìn)行輔助化療。 PCR 檢測(cè)：≥40%，MSI-H；<40%，MSI-L/MS-S MSI 的分類是基于不同單核或雙核苷酸重復(fù)序列的改變（如： BAT25、 BAT26、 D5S346、 D2S123 和 D17S250，即 Bethesda 標(biāo)準(zhǔn)微衛(wèi)星位點(diǎn)）。 邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)開(kāi)發(fā)的伴隨診斷試劑盒,基因突變檢測(cè)試劑盒,檢測(cè)范圍全。

    具有兩個(gè)或兩個(gè)以上位點(diǎn)改變)、低頻MSI(MSI-L，*有一個(gè)位點(diǎn)發(fā)生改變)以及微衛(wèi)星穩(wěn)定型(MSS，沒(méi)有位點(diǎn)發(fā)生改變)。由于MSI-L結(jié)直腸ai在臨床表現(xiàn)和病理改變上與MSSliu無(wú)明顯差別，因此通常被歸入MSSliu。約15％的結(jié)直腸ai經(jīng)MSI途徑發(fā)生，其中3％左右為家族遺傳性(Lynch綜合征)，12％為散發(fā)性。二、遺傳性MSI-H結(jié)直腸ai(Lynch綜合征)與散發(fā)性MSI-H結(jié)直腸ai1．Lynch綜合征與散發(fā)性MSI-H結(jié)直腸ai發(fā)生機(jī)制的異同：作為經(jīng)MSI途徑發(fā)生的結(jié)直腸ai的典型**，Lynch綜合征**初由Michigan大學(xué)病理系的Warthin博士于1913年**先發(fā)現(xiàn)并報(bào)道，至1966年Lynch醫(yī)師明確了本病是一種常染色顯性遺傳的liu綜合征，在迄今100年的發(fā)現(xiàn)和研究過(guò)程中，“ai癥家族綜合征(cancerfamilysyndrome)”、“Lynch綜合征”、“遺傳性非息肉病性結(jié)直腸ai(hereditarynon．polyposiscolorectalcancer)”等名稱曾先后在不同時(shí)期被使用。隨著近年來(lái)錯(cuò)配修復(fù)基因在本病發(fā)生中的作用逐漸明確，現(xiàn)在WHOliu分類將Lynch綜合征這一名稱用于攜帶有錯(cuò)配修復(fù)基因胚系缺陷的常染色體顯性遺傳性liu綜合征。目前在Lynch綜合征患者中發(fā)現(xiàn)的DNA錯(cuò)配修復(fù)缺陷包括三種類型：(1)錯(cuò)配修復(fù)基因的胚系突變。邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)為創(chuàng)新藥企開(kāi)展全球多中心臨床試驗(yàn)研究，提供中心實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及伴隨診斷開(kāi)發(fā)服務(wù)。福建專業(yè)dMMR抗體檢測(cè)試劑值得推薦

使用北歐免疫組化質(zhì)控中心NordiQC推薦的IHC抗體組合。寧夏作用dMMR抗體檢測(cè)試劑創(chuàng)新服務(wù)

    在臨床中，對(duì)于Ⅱ期結(jié)腸ai病人，考慮使用5-Fu單藥化療時(shí)，主要考慮因素是什么？可能有的醫(yī)生會(huì)說(shuō)，「Soeasy！檢測(cè)下MMR啊，看看是dMMR還是pMMR」。來(lái)吧，我們看1個(gè)病例患者女，51歲，診斷為T(mén)3N0M0（伴有普危因素），免疫組化結(jié)果：HER2(1+)，GPC3(-)，MSH2(+)，MSH6(+)，PMS2(+)，MLH1(+)，CK19(-)，CK20(+)，Ki67(60%+)。這名患者該不該用單藥5-Fu進(jìn)行輔助化療？一拿到免疫組化結(jié)果，很多醫(yī)生的表情是這樣的：大家都知道，MSI-H/dMMR患者不能從單藥5-Fu的***中獲益。但問(wèn)題是，面對(duì)由英文字母、數(shù)字、括號(hào)和加減號(hào)組成的免疫組化結(jié)果，如何確定是dMMR還是pMMR？到底怎樣算H-MSI，怎樣算L-MSI，怎樣又算MS-S？下面我們就來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題。MMR基因是DNA錯(cuò)配修復(fù)基因，它的表達(dá)缺失可引起DNA復(fù)制過(guò)程中錯(cuò)配的累積，導(dǎo)致微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）的發(fā)生，約15%的結(jié)直腸ai是經(jīng)由MSI途徑引發(fā)的。寧夏作用dMMR抗體檢測(cè)試劑創(chuàng)新服務(wù)