江西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶

ImpaRATOR 是一種 O-聚糖依賴性蛋白酶，可催化糖蛋白和糖肽中與糖基化絲氨酸或蘇氨酸殘基相鄰的肽鍵的水解。它切割用粘蛋白型O-聚糖修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基的N-末端，包括唾液酸化物種。粘蛋白型O-聚糖是ImpaRAT活性所必需的，該酶不會消化未修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基，也不會在糖蛋白的N-糖基化位點。該酶接受 O-聚糖結(jié)構(gòu)，包括唾液酸化he心 1 和he心 2 結(jié)構(gòu)以及 Tn 抗原。Genovis的ImpaRATOR 來源于銅綠假單胞菌，在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽，分子量為 97 kDa。GalactEXO 是一種β-半乳糖苷酶混合物，可水解 N-和 O-糖基化蛋白中的 β1-3,4-連接末端半乳糖。江西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶

我們展示了使用兩種蛋白作為底物的OmniGLYZOR的性能。依那西普是一種 Fc 融合蛋白，含有 TNFα 受體的胞外結(jié)構(gòu)域。該結(jié)構(gòu)域用 2 個 N-糖和 8-11 個 1 個具有不同程度唾液酸化的 O-聚糖修飾。在 37°C 下將這種重糖基化蛋白在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時，可完全去除所有 N-和 O-糖，如中級 LC-MS 分析所示。促紅xibao生成素 （EPO） 是一種攜帶 3 個 N-聚糖和 1 個he心 1 個 O-聚糖的小蛋白質(zhì)，其總質(zhì)量的近 40% 由聚糖組成。O-連接聚糖通常存在于蛋白質(zhì)的暴露位置，因為它們在蛋白質(zhì)折疊發(fā)生后附著。只有負責其合成的糖基轉(zhuǎn)移酶才能接觸到這些暴露的位點。江西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶FucosEXO凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在2000單位的小瓶中，用于2mg糖蛋白的去碳基化。

Genovis 是一家瑞典生物技術公司，自2010年起，為生物制藥公司提供SmartEnzymes?工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學工具，主要用于生物制藥行業(yè)和學術界。 我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?，用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應用信息，如果您有興趣，可以和我們一起做一個“SmartStories”，也可以聯(lián)系我們。?

C1抑制劑的去糖基化：在O-糖基化生物制藥的生產(chǎn)過程中，由于he心GalNAc殘基的加工不完全，可能會出現(xiàn)Tn抗原。這表現(xiàn)為具有 203 Da HexNAc 單位差異的重復質(zhì)量位移。為了確認 Tn 抗原的存在，可以應用以下工作流程，此處在重度（26 個位點）O-糖基化 C1 抑制劑上演示。首先，使用PNGaseF修剪糖蛋白的N-糖，使用Genovis的OglyZOR和SialEXO修剪he心1 O-糖。依那西普的磷性能測試?：依那西普是另一種具有挑戰(zhàn)性的生物制藥模型分子，攜帶 13 個 O-聚糖位點，其中平均 9 至 10 個位點被占用。并且該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAcs 上顯示出活性。

Core 1型O-聚糖的水解：O-糖基化不僅難以研究，其自然異質(zhì)性也會導致其他分析出現(xiàn)問題。例如，由于樣品中存在許多不同的糖型，因此對完整或中等水平的重糖基化蛋白質(zhì)進行質(zhì)譜分析可能非常困難。酶法去除N-聚糖的解決方案已經(jīng)存在多年，Genvois的PNGase F是一種非常成熟的工具。O-糖的去除可能更具挑戰(zhàn)性，現(xiàn)有的O-糖釋放化學方法通常會導致蛋白質(zhì)發(fā)生重大修飾，因此不太適合下游分析。1. 用于方法開發(fā)的靈活產(chǎn)品形式；2. 可以結(jié)合酶以提高效率；3. 適用于自動化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可。與絲氨酸或蘇氨酸連接的 GalNAc（稱為 Tn 抗原）被 GalNAcEXO 快速有效地水解。天津固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

為了測試選擇性，將一系列 O-糖基化、N-糖基化和非糖基化蛋白與 GlycOCATCH 一起孵育：洗脫O-糖基化蛋白。江西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶

該酶適用于在釋放的聚糖結(jié)構(gòu)上修剪半乳糖，用于外切糖苷酶陣列，或用于生成具有均相 G0/G0F 聚糖譜的抗體。1. 高效β-半乳糖苷酶混合物 – 快速去除末端 β1-3 和 β1-4-連接的半乳糖；2. 有助于在亞基水平上識別糖基化修飾；3. 可固定在即用型離心柱中。Genovis的GalactEXO是一種外切糖苷酶，含有β-半乳糖苷酶的混合物，可有效去除N-和O-糖基化蛋白或寡糖上的半乳糖殘基。該混合物由兩種半乳糖苷酶組成，可高效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖酶。GalactEXO在天然條件下水解糖蛋白，并在5.5至7.5的寬pH值范圍內(nèi)顯示活性。江西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶