6mA技術服務經(jīng)驗豐富

來源: 發(fā)布時間:2021-08-30

安捷倫公司芯片平臺因其強大的eArray探針設計平臺,可以進行芯片的定制。在甲基化領域同樣適用。合作伙伴利用Agilent芯片平臺設計了一款專門針對**啟動子區(qū)域CpG島的甲基化芯片。絕大多數(shù)基因是針對基因的啟動子區(qū)域的CpG島設計探針。這款芯片上一共有4160個功能注釋比較明確的基因,其中2128個和**發(fā)生有關系。從功能上分,有256基因和細胞凋亡有關,1273個基因和信號傳導有關,487個基因和壓力和衰老有關。采用的是8*60K的芯片格式。利用MeDIP原理進行甲基化檢測的方法探針的分辨率可以精確到100 bp。在哺乳動物中CpG以兩種形式存在。6mA技術服務經(jīng)驗豐富

熒光定量法(Methylight)


這種技術是在MSP技術上發(fā)展起來的,在MSP擴增過程中利用熒光染料進行定量。TaqMan? 探針法的應用使得該技術具有更高的精確性。其原理與SNP檢測類似,針對亞硫酸氫鹽處理之后的DN**段,在甲基化位點上會存在單堿基的差異,根據(jù)這種差異進行探針設計,隨后進行實時定量PCR,就能夠檢測甲基化的差異。這種方法**的優(yōu)勢在于其高敏感性和較高通量,且無需在PCR后電泳、雜交等操作,減少了污染和操作誤差。但是TaqMan? 探針訂購費用較高,適用于少數(shù)位點大量樣本篩選。 江蘇技術服務售后分析焦磷酸測序技術服務基于QIAGEN公司的PyroMark Q96 ID平臺。

    全基因組甲基化測序(WholeGenomeBisulfiteSequencing,WGBS)是結(jié)合重亞硫酸鹽Bisulfite處理和高通量測序,對有參考基因組進行全基因組的單堿基分辨率的甲基化檢測“金標準”方案,***用于人、哺乳動物及農(nóng)林牧漁方向的高水平甲基化研究。WGBS滿足全基因組DNA甲基化圖譜及疾病關聯(lián)分析、基因調(diào)控分析、疾病的甲基化標志物篩選等探索性課題的研究。靈長類早期著床前胚胎發(fā)育中的DNA甲基化重編程研究——(團隊成員發(fā)表).(IF=)靈長類胚胎發(fā)生的關鍵表觀遺傳調(diào)控需要DNA甲基化重編程。我們首先建立了基于轉(zhuǎn)座酶的超微量WGBS測序技術,詳細研究了獼猴早期著床前胚胎7個階段(Sperm、Oocytes、Zygotes、2-cell、8-cell、Morula和ICM)的DNA甲基化動態(tài)變化過程。******闡明了DNA甲基化動力學的“盈與虧”階段特征,并通過DNA甲基轉(zhuǎn)移酶功能缺失實驗表明DNA甲基化影響早期猴胚胎發(fā)育。

    DNA甲基化(DNAmethylation)是指在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNMT)催化下,以S-腺苷甲硫氨酸為甲基供體,將活性甲基轉(zhuǎn)移至DNA鏈中特定堿基上的化學修飾過程。哺乳動物基因組中,DNA甲基化多發(fā)生在CpG二核苷酸中的胞嘧啶的5位碳原子。DNA甲基化是一種表觀(epigenetic)修飾,它在不改變DNA序列的情況下,對個體的生長、發(fā)育、基因表達模式以及基因組的穩(wěn)定性起到重要的調(diào)控作用,這種修飾是可逆的,并且這種修飾在發(fā)育和細胞增殖的過程中是可以穩(wěn)定傳遞的。近年來的大量研究表明,DNA異常甲基化與**的發(fā)生、發(fā)展、細胞*變有著密切的聯(lián)系。DNA甲基化在**中的作用主要表現(xiàn)在以下幾個方面:一是甲基化的CpG島二核苷酸中的胞嘧啶以較高的頻率脫氨基變成胸腺嘧啶,造成堿基突變;二是抑*基因和DNA修復基因由于超甲基化而沉默;三是*基因甲基化水平降低而活化;四是基因組總體甲基化水平降低使轉(zhuǎn)座子、重復序列活化導致染色體穩(wěn)定性下降。這些因素是導致**發(fā)展、轉(zhuǎn)移、惡化**終導致患者死亡的重要原因。其中后三個方面源于甲基化水平的改變,而甲基化的過程是可逆的,因此可以甲基化位點為靶點,靶向用藥進行**的預防、***。 850K芯片為半金標準,價格低,分析簡單,較為適合EWAS類型的課題。

DNA甲基化作為表觀遺傳學研究的重要范疇,已經(jīng)越來越受到研究者的關注。近些年來,隨著DNA甲基化與組蛋白甲基化的聯(lián)合作用機制、RNA干擾機制及去甲基化機制的發(fā)現(xiàn),使得DNA甲基化研究受到***關注,從醫(yī)學領域擴展到動植物研究當中,同時在研究方法上也取得了很大的突破?,F(xiàn)在用于DNA甲基化檢測的方法大概有十多種,從應用上來分,大致可以分成兩類:全基因組甲基化分析及特異位點甲基化檢測。下面,我們就這兩大類檢測技術進行分析比較,以便于在實際的科研工作中進行選擇。篩選耐藥的相關biomaker及表觀調(diào)控機制。焦磷酸測序技術服務口碑推薦

云生物提供DNA甲基化和羥甲基化的表觀實驗和信息分析技術服務。6mA技術服務經(jīng)驗豐富

    芯片平臺作為目前比較成熟的篩選工具,已經(jīng)在很多領域有了相應的應用。多家芯片公司在DNA甲基化這塊兒有了相應的產(chǎn)品提供,其中應用**為***的就Agilent平臺和Illumina平臺,相應的產(chǎn)品包括AgilentHumanCpGIslandMicroarrayKit,InfiniumHumanMethylation27BeadChip和InfiniumHumanMethylation450KBeadChip。另外RocheNimbleGen和Affymetrix也有相應的芯片推出,但是NimbleGen的芯片今年下半年已經(jīng)停產(chǎn)。不同的芯片平臺,各自的實驗過程也是不一樣的。安捷倫前期采用的甲基化DNA免疫共沉淀(MeDIP)技術。將基因組DNA分成兩份,一份用來做MeDIP,另一份作為對照。兩個樣品都標記熒光(富集的樣品用Cy5標記,對照用Cy3標記),然后與芯片雜交。芯片上每個探針的Cy5/Cy3強度比例顯示出該區(qū)域的甲基化程度。 6mA技術服務經(jīng)驗豐富