青島scRNA單細(xì)胞多組學(xué)數(shù)據(jù)分析可視化

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-09-04

reads數(shù)、基因表達(dá)量及細(xì)胞數(shù)量判定過(guò)程中:以捕獲5000個(gè)細(xì)胞、100G的測(cè)序量為標(biāo)準(zhǔn),每個(gè)細(xì)胞的reads數(shù)大約在50k左右;每個(gè)細(xì)胞的基因中位數(shù)取決于樣本的細(xì)胞類(lèi)型,例如成熟的B,T,粒細(xì)胞數(shù)量較多的組織中,由于該類(lèi)型細(xì)胞表達(dá)的基因數(shù)普遍較少,導(dǎo)致基因中位數(shù)下降。而某一疾病組織、或者體外培養(yǎng)的如干細(xì)胞等,他們的基因表達(dá)數(shù)較高,甚至可以超過(guò)1萬(wàn),這就導(dǎo)致該類(lèi)樣本基因中位數(shù)非常高。因此,我們對(duì)細(xì)胞數(shù)量以及基因中位數(shù)確認(rèn)時(shí),需要考察實(shí)際組織的細(xì)胞組成。單細(xì)胞多學(xué)可包括基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、影像組學(xué)。青島scRNA單細(xì)胞多組學(xué)數(shù)據(jù)分析可視化

當(dāng)蜂巢孔內(nèi)同時(shí)落入細(xì)胞和磁珠后,接下去可以往BDCartridge板中加入細(xì)胞裂解液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行裂解,使細(xì)胞內(nèi)的RNA與磁珠上的標(biāo)簽進(jìn)行結(jié)合,完成每個(gè)細(xì)胞內(nèi)RNA的捕獲和標(biāo)記。這時(shí),再將捕獲了RNA的磁珠進(jìn)行回收,待所有質(zhì)控結(jié)果確認(rèn)通過(guò)后就可以進(jìn)行后續(xù)的RNA反轉(zhuǎn)錄、cDNA第二鏈合成等實(shí)驗(yàn)操作。而B(niǎo)DCartridge板則需要再進(jìn)行一次成像,獲得磁珠收集后的掃描圖,判斷磁珠是否已經(jīng)被有效收集。根據(jù)每一步的質(zhì)控結(jié)果,烈冰科技(NovelBio)單細(xì)胞測(cè)序?qū)嶒?yàn)團(tuán)隊(duì)會(huì)根據(jù)單細(xì)胞分選的實(shí)驗(yàn)結(jié)果生成實(shí)驗(yàn)總結(jié)報(bào)告,判斷每一步驟是否通過(guò)質(zhì)控,并得到捕獲的單細(xì)胞數(shù)量以及雙細(xì)胞比例,對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行總結(jié)評(píng)估。若所有過(guò)程通過(guò)質(zhì)控,實(shí)驗(yàn)樣本即可進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)操作。成都single cell RNA單細(xì)胞多組學(xué)數(shù)據(jù)分析可視化功能研究型單細(xì)胞多組學(xué)測(cè)序技術(shù)結(jié)合了CRISPR基因編輯技術(shù), 深度挖掘基因表達(dá)調(diào)控與細(xì)胞功能。

FluidigmC1平臺(tái)基于富魯達(dá)(Fluidigm®)的微流控技術(shù)應(yīng)用于單細(xì)胞測(cè)序(SingleCellRNASequencing)領(lǐng)域的商業(yè)化中,該技術(shù)大約在幾個(gè)小時(shí)中可以捕獲96個(gè)左右的細(xì)胞,進(jìn)行各類(lèi)的Single-Cell測(cè)序建庫(kù)。當(dāng)然,通量還是比較小。但不可否認(rèn)的是,現(xiàn)在很多非RNA類(lèi)SingleCell測(cè)序,仍然在采用這樣的技術(shù),如SingleCellDNA-Seq,SingleCellATAC-Seq等,都是采用此技術(shù)進(jìn)行單細(xì)胞分選后再分別用不同試劑盒建庫(kù)。所以可以說(shuō),至少在10XGenomics、BD或者其他企業(yè)推出有效的SingleDNA測(cè)序技術(shù)之前,C1仍然會(huì)是市場(chǎng)上的重要組成部分。

機(jī)體為響應(yīng)各種應(yīng)激,其細(xì)胞會(huì)從一種功能“狀態(tài)”轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N功能“狀態(tài)”;當(dāng)細(xì)胞在不同狀態(tài)之間轉(zhuǎn)變時(shí),往往會(huì)經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄重組,導(dǎo)致一些基因被“沉默”,一些基因被重新“喚醒”,但純化這些瞬態(tài)細(xì)胞進(jìn)行研究是很困難或不可能的;scRNA-seq擬時(shí)序分析可以讓我們?cè)诓恍枰兓那闆r下查看這些細(xì)胞狀態(tài)。擬時(shí)序分析,即根據(jù)不同細(xì)胞亞群基因表達(dá)量隨時(shí)間的變化情況,構(gòu)建細(xì)胞譜系發(fā)育,但這里的時(shí)間并不是真時(shí)間,而是一個(gè)虛擬的時(shí)間,是指的細(xì)胞與細(xì)胞之間的轉(zhuǎn)化和演替的順序和軌跡。即使在同一個(gè)樣本中,也會(huì)存在多種不同的細(xì)胞形態(tài)。因此,不論測(cè)定了多少樣本,我們都可以采用擬時(shí)序分析對(duì)樣本中的細(xì)胞轉(zhuǎn)化和變化進(jìn)行描述。多組學(xué)技術(shù)結(jié)合了不同的生物數(shù)據(jù)集,如基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)。

BD的技術(shù)不再采用利用微流控孔道射出細(xì)胞和射出的磁珠碰撞的過(guò)程,進(jìn)行單細(xì)胞捕獲的技術(shù),轉(zhuǎn)而采用CytoSeq特有的蜂窩板技術(shù)。該技術(shù)用20萬(wàn)+的微孔(該數(shù)量級(jí)遠(yuǎn)大于Input細(xì)胞數(shù)量),保證單孔中的單細(xì)胞捕獲。同時(shí)避免了10X中存在的概率碰撞影響捕獲效率的問(wèn)題,采用微孔捕獲相對(duì)會(huì)有更好的捕獲效率(來(lái)自?xún)杉移髽I(yè)商業(yè)宣傳資料比對(duì)),保證Input細(xì)胞的高效使用。對(duì)于Input細(xì)胞的量更少的情況,可以基于百萬(wàn)級(jí)別的細(xì)胞總量開(kāi)始進(jìn)行前期處理以及后期捕獲操作。而在細(xì)胞捕獲完成后,進(jìn)行細(xì)胞裂解后,同樣的也進(jìn)行細(xì)胞中RNApolyA序列的抓取工作。在單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域,將轉(zhuǎn)錄組與蛋白質(zhì)結(jié)合的代表性例子只有單細(xì) 胞RNA測(cè)序方法。成都single cell RNA單細(xì)胞多組學(xué)數(shù)據(jù)分析可視化

首先 出現(xiàn)的單細(xì)胞多組學(xué)方法就是將轉(zhuǎn)錄組與其他組學(xué)技術(shù)結(jié)合。青島scRNA單細(xì)胞多組學(xué)數(shù)據(jù)分析可視化

如行家預(yù)判,服務(wù)型發(fā)展即將步入黃金時(shí)代,眾多企業(yè)圍繞醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)、商業(yè)領(lǐng)域及新興的互聯(lián)網(wǎng)醫(yī)藥等領(lǐng)域正在進(jìn)行廝殺。在我國(guó)政策的支持下,在社會(huì)資本的推動(dòng)下以及技術(shù)升級(jí)的帶動(dòng)下,互聯(lián)網(wǎng)巨頭、科技巨頭、地產(chǎn)巨頭等企業(yè)紛紛跨界進(jìn)入服務(wù)型。以單細(xì)胞測(cè)序,生物大數(shù)據(jù)云分析平臺(tái),空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,單細(xì)胞多組學(xué)測(cè)序?yàn)槔?,主打運(yùn)動(dòng)健康A(chǔ)PP停留在工具層面,缺少完整的消費(fèi)場(chǎng)景閉環(huán),較強(qiáng)的工具屬性停留在實(shí)現(xiàn)用戶(hù)基礎(chǔ)的功能需求,并未涉及足夠高的用戶(hù)使用價(jià)值實(shí)現(xiàn),同時(shí)缺乏數(shù)字化運(yùn)營(yíng)的效能也是運(yùn)動(dòng)健康A(chǔ)PP發(fā)展的明顯桎梏,經(jīng)營(yíng)模式有待進(jìn)一步探索。目前全球銷(xiāo)售產(chǎn)業(yè)發(fā)展主要有美國(guó)波士頓—?jiǎng)虻尼t(yī)藥產(chǎn)業(yè)集聚區(qū)、德國(guó)圖特林根的醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)集聚區(qū)、日本富山縣的醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)集聚區(qū)、印度班加羅爾的仿制藥產(chǎn)業(yè)集聚區(qū)等九大發(fā)展模式。而我國(guó)仍以醫(yī)藥服務(wù)和醫(yī)藥商品為主,整體收入規(guī)模偏小。美國(guó)銷(xiāo)售產(chǎn)業(yè)與中國(guó)有所不同,和美國(guó)相比,中國(guó)的產(chǎn)業(yè)仍處于初創(chuàng)期。在經(jīng)濟(jì)新常態(tài)下,中國(guó)大銷(xiāo)售產(chǎn)業(yè)憑借獨(dú)特資源和市場(chǎng)優(yōu)勢(shì),一舉成為資本角逐的重點(diǎn)領(lǐng)域之一。有關(guān)機(jī)構(gòu)預(yù)測(cè),中國(guó)銷(xiāo)售產(chǎn)業(yè)規(guī)模未來(lái)5年年均復(fù)合增長(zhǎng)率約為27.26%。青島scRNA單細(xì)胞多組學(xué)數(shù)據(jù)分析可視化

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