酵母文庫實(shí)驗(yàn):MAPK級聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號傳導(dǎo)過程中的關(guān)鍵事件,MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子,**終響應(yīng)病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級聯(lián)的重要目標(biāo),在植物對各種病原體的抗性中起著關(guān)鍵作用。蘋果如何響應(yīng)炭疽菌入侵,將信號傳導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi),以及哪個(gè)轉(zhuǎn)錄因子負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)促進(jìn)GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)由蘋果炭疽菌******誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個(gè)易感蘋果種質(zhì)中,MdWRKY17表達(dá)水平***高于6個(gè)耐受蘋果種質(zhì),同時(shí)對應(yīng)的水楊酸含量降低,證實(shí)了MdWRKY17介導(dǎo)的水楊酸降解在GLS耐受中的關(guān)鍵作用。Gateway方法酵母雙雜交文庫構(gòu)建核系統(tǒng)與膜系。重慶酵母文庫使用
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實(shí)驗(yàn)均顯示,MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達(dá)MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1,結(jié)果顯示過表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用。Pull down 實(shí)驗(yàn)和熒光素酶互補(bǔ)成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制,本研究建立了一個(gè)新的模型:MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作,增強(qiáng)了 MdMYB9 對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。江西運(yùn)用酵母文庫篩選酵母文庫選歐易生物技術(shù)可靠服務(wù)高效多年經(jīng)驗(yàn)。
酵母文庫實(shí)驗(yàn):本研究報(bào)道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達(dá),而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達(dá)。在擬南芥 lec1-1 中異源表達(dá) OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補(bǔ) lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常,種子變長、變窄、變薄,堊白率較高。此外,osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達(dá)紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達(dá)的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達(dá)導(dǎo)致了種子變小。綜上表明,OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。
酵母雙雜交文庫:本研究通過藍(lán)/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達(dá),使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個(gè)WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)表明AaWRKY9通過光依賴JA信號通路調(diào)節(jié),在青蒿素生物合成中發(fā)揮重要作用,AaWRKY9通過與AaDBR2和AaGSW1的啟動子結(jié)合正向調(diào)節(jié)青蒿素的積累。此外,JA信號通路中的抑制因子AaJAZ9與AaWRKY9相互作用,并抑制其轉(zhuǎn)錄***活性,而在MeJA存在情況下,AaJAZ9被降解,AaWRKY9的轉(zhuǎn)錄***活性增加,進(jìn)而促進(jìn)青蒿素生物合成基因的表達(dá)。酵母雙雜交文庫結(jié)果表明,AaWRKY9有助于光和JA信號調(diào)節(jié)青蒿素的生物合成,為兩種信號途徑在植物次生代謝物合成中的整合調(diào)控提供了新見解。酵母雙雜交技術(shù)服務(wù)酵母雙雜交文庫構(gòu)建。
母文庫實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021年3月16日,寧波大學(xué)陳劍平院士、孫宗濤研究員為共同通訊作者,在PNAS雜志(IF:9.412)在線發(fā)表了題為“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究論文,深入報(bào)道了在不同植物RNA病毒中一種***存在的、通過劫持茉莉酸信號途徑以協(xié)同促進(jìn)病毒傳播和介體昆蟲攝食的新機(jī)制。植物病毒基因組通常*編碼少數(shù)幾個(gè)蛋白,它們必需依賴寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通過其編碼的蛋白來劫持或者利用寄主因子來實(shí)現(xiàn)自身的復(fù)制,并在植物體內(nèi)傳播,產(chǎn)生系統(tǒng)性***。酵母雜交技術(shù)兼具通量高、結(jié)果直觀、操作簡易,重復(fù)性好的優(yōu)勢。青海篩庫酵母文庫
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目前,歐易生物負(fù)責(zé)該水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫的維護(hù)和保存工作,并對廣大水稻科研工作者提供轉(zhuǎn)錄因子篩選服務(wù)。如去年歐易生物助力中國科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心的王二濤老師應(yīng)用該文庫對水稻-叢枝菌根進(jìn)行了深入研究,成功構(gòu)建了水稻-叢枝菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò),結(jié)果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表,該文庫已收錄了1683個(gè)水稻轉(zhuǎn)錄因子,隸屬于54個(gè)家族,覆蓋預(yù)測的水稻轉(zhuǎn)錄因子總量的70%。文庫中水稻轉(zhuǎn)錄因子的a基因信息來源于PlantTFDB和KOME數(shù)據(jù)庫。文庫載體使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子菌株**保存于96孔板中。重慶酵母文庫使用
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司正式組建于2009-03-10,將通過提供以科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢等服務(wù)于于一體的組合服務(wù)。歐易生物經(jīng)營業(yè)績遍布國內(nèi)諸多地區(qū)地區(qū),業(yè)務(wù)布局涵蓋科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢等板塊。我們強(qiáng)化內(nèi)部資源整合與業(yè)務(wù)協(xié)同,致力于科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢等實(shí)現(xiàn)一體化,建立了成熟的科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢運(yùn)營及風(fēng)險(xiǎn)管理體系,累積了豐富的醫(yī)藥健康行業(yè)管理經(jīng)驗(yàn),擁有一大批專業(yè)人才。值得一提的是,歐易生物致力于為用戶帶去更為定向、專業(yè)的醫(yī)藥健康一體化解決方案,在有效降低用戶成本的同時(shí),更能憑借科學(xué)的技術(shù)讓用戶極大限度地挖掘歐易生物的應(yīng)用潛能。