通過酵母雙雜篩選實驗，進一步研究AaWRKY9蛋白功能，結果篩選到了與AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白，并通過Y2H、BiFC、CoIP等進行了驗證確認。JAZs是JA介導的植物相應中的負向調(diào)控因子，在毛狀體和老葉中高表達，在芽尖和嫩葉中表達量低。為確認AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促進青蒿素積累過程中的轉錄***功能，通過雙熒光素酶報告基因檢測實驗發(fā)現(xiàn)，當AaWRKY9與AaJAZ9共表達時，其轉錄活性被抑制，而使用MeJA處理后，這種抑制作用被抵消，且AaWRKY9轉錄活性增強，反向驗證實驗結果一致。說明JA可以通過降解JAZ9，提高AaWRKY9轉錄活性，促進青蒿素生物合成。酵母雜交技術是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白，蛋白/DNA等分子互作檢測的技術。浙江歐易生物酵母文庫
酵母雙雜交實驗表明，PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用（圖 C），并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實（圖 D-E）。為進一步研究在年齡信號調(diào)控中的作用機制，分別構建了過表達PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對照相比，過表達PtDAL1***提前了擬南芥的營養(yǎng)-生殖時相轉換（圖A），證實PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關鍵作用。過表達PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結構過早終止，表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點關鍵基因突變體進行功能互補實驗，結果顯示過表達PtDAL1可以恢復由于過表達miR156導致的開花延遲，但ft缺失會導致PtDAL1失活，PtDAL1過表達也不能恢復soc1-1-2突變體的表型，表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達PtMADS11可以恢復由過表達miR156或ft缺失導致的開花延遲，表明PtMADS11對開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。安徽品質(zhì)酵母文庫篩選酵母文庫選歐易生物技術可靠服務高效多年經(jīng)驗。
酵母單雜交測試：為驗證該文庫在Y2H和Y1H體系中的有效性，作者以OsMADS1為誘餌篩選水稻轉錄因子文庫，進行了酵母雙雜交測試。以Ghd7的啟動子片段為誘餌，進行了酵母單雜交測試。結果顯示我們的水稻轉錄因子文庫可以有效且高通量的檢測蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外，該研究中指出，使用該文庫篩選鑒定蛋白-TF互作，采用mating法較為方便，即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫菌液一對一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作，采用Y1HGold系統(tǒng)，即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫質(zhì)粒更簡單高效。此外，可通過降低篩選壓力處理，進行弱相互作用的檢測。
酵母文庫實驗本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實驗表明，MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結合可以增強后者對下游基因的轉錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結合，可以干擾其與MdMYB9的互作，進而負向調(diào)控MdTRB1介導的對花青素和原花青素積累的促進作用。本研究表明，JAZ1-TRB1-MYB9復合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導的花青素和原花青素的積累。本研究為進一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。液態(tài)酵母單雙雜高通量篩庫方法及其應用。
酵母文庫:細菌鞭毛蛋白是一種重要的細菌毒力因子，可刺激動植物細胞中的分子免疫信號轉導。脊椎動物識別鞭毛蛋白和建立有效免疫反應的詳細機制已經(jīng)被揭示；然而，無脊椎動物是否能夠識別鞭毛蛋白仍未可知。2022年1月24日，山東大學王顯偉團隊在PLOSPATHOGENS（IF：6.823）上發(fā)表了題為“Shoc2regnizesbacterialflagellinandmediatesantibacterialErk/Statsignalinginaninvertebrate”的研究論文，揭示了MjShoc2可以與鞭毛蛋白FlaA互作，引發(fā)一系列炎癥反應，促使對蝦抵抗細菌***，為無脊椎動物對鞭毛蛋白的感知機制提供了見解。該項目中所用的對蝦酵母文庫由歐易生物構建。不懂就問,酵母文庫實驗室究竟長啥樣?擁有十余年豐富的文庫構建。貴州酵母文庫質(zhì)量
歐易生物酵母文庫項目發(fā)表 Science 封面文章歐易生物。浙江歐易生物酵母文庫
文章中酵母文庫實驗由歐易生物完成。2021 年 3 月，揚州大學陳忱教授為通訊作者，在 The Plant Journal 雜志（IF: 6.141）在線發(fā)表了題為“The rice LEC1-like transcription factor OsNF-YB9 interacts with SPK, an endosperm specific sucrose synthase protein kinase, and functions in seed development”的研究論文，報道了 OsNF-YB9 在調(diào)控水稻種子發(fā)育中的作用機制。NF-Y轉錄因子家族成員LEC1在擬南芥胚胎發(fā)生和種子發(fā)育中發(fā)揮了重要作用。水稻中的OsNF-YB9和OsNF-YB7是擬南芥LEC1的同源基因。這些LEC1同源基因在水稻中的作用尚未經(jīng)報道。浙江歐易生物酵母文庫
上海歐易生物醫(yī)學科技有限公司在科研服務，科研檢測，學術研究，技術咨詢一直在同行業(yè)中處于較強地位，無論是產(chǎn)品還是服務，其高水平的能力始終貫穿于其中。公司始建于2009-03-10，在全國各個地區(qū)建立了良好的商貿(mào)渠道和技術協(xié)作關系。公司承擔并建設完成醫(yī)藥健康多項重點項目，取得了明顯的社會和經(jīng)濟效益。多年來，已經(jīng)為我國醫(yī)藥健康行業(yè)生產(chǎn)、經(jīng)濟等的發(fā)展做出了重要貢獻。