關(guān)于二代測序的簡介: 二代測序技術(shù)(Next-Generation Seguencing,NGS)也稱為高通量測序技術(shù),是一種能夠同時對數(shù)百萬甚至數(shù)十億個 DNA片段進行測序的方法。與傳統(tǒng)的桑格測序相比二代測序技術(shù)具有高通量、高準確性、高靈敏度和低成...
二代測序的建庫步驟④ 四、接頭連接 接頭選擇:根據(jù)測序平臺的要求選擇合適的接頭。不同的二代測序平臺(如Illumina、IonTorrent等)有各自特定設(shè)計的接頭。這些接頭包含與測序平臺的流動池(flowcell)表面互補的序列,用于將DNA...
二代測序——基因組測序該測幾個G?② 人類全外顯子組測序 人類全外顯子組*占基因組的1%-2%,大小約為30M-60M左右,但通常需要較高的測序深度來確保外顯子區(qū)域的變異檢測準確性,一般測序深度在100X-200X之間,數(shù)據(jù)量大約在3G-12G...
二代測序——數(shù)據(jù)分析類問題 二代測序數(shù)據(jù)分析的主要內(nèi)容和挑戰(zhàn)是什么:主要內(nèi)容包括數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制、序列比對、變異檢測、基因表達定量、功能注釋等。挑戰(zhàn)在于數(shù)據(jù)量巨大,需要高效的計算資源和復(fù)雜的生物信息學(xué)算法來處理;數(shù)據(jù)質(zhì)量參差不齊,需要嚴格的質(zhì)量控制和過...
什么樣本可以做二代測序?③ 細胞樣本 培養(yǎng)細胞:包括各種原代培養(yǎng)細胞和細胞系。在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中,對培養(yǎng)的細胞進行測序可以了解細胞的基因特征和功能變化。例如,在研究細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路時,對經(jīng)過特定刺激處理的培養(yǎng)細胞進行轉(zhuǎn)錄組測序,以分析基因表達的上...
二代測序—全外顯子測序的應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)學(xué)領(lǐng)域:1、疾病診斷:用于診斷各種遺傳性疾病,包括單基因遺傳?。ㄈ缒倚岳w維化、杜氏肌營養(yǎng)不良等)和復(fù)雜疾?。ㄈ?*、心血管疾病等)。在**研究中,通過對**組織和正常組織進行全外顯子測序,可以發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞中的體細胞...
二代測序不同應(yīng)用場景下的速度有多快? 病原微生物檢測:一般來說,二代測序用于檢測病原微生物時,能夠在幾個小時到一天左右出結(jié)果。比如在快速檢測血液中的病原微生物時,通??梢栽趲讉€小時內(nèi)獲得檢測結(jié)果,相比傳統(tǒng)的血液培養(yǎng)方法,時間大幅縮短,傳統(tǒng)血液培養(yǎng)一般...
關(guān)于二代測序的簡介: 二代測序技術(shù)(Next-Generation Seguencing,NGS)也稱為高通量測序技術(shù),是一種能夠同時對數(shù)百萬甚至數(shù)十億個 DNA片段進行測序的方法。與傳統(tǒng)的桑格測序相比二代測序技術(shù)具有高通量、高準確性、高靈敏度和低成...
什么樣本可以做二代測序?③ 細胞樣本 培養(yǎng)細胞:包括各種原代培養(yǎng)細胞和細胞系。在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中,對培養(yǎng)的細胞進行測序可以了解細胞的基因特征和功能變化。例如,在研究細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路時,對經(jīng)過特定刺激處理的培養(yǎng)細胞進行轉(zhuǎn)錄組測序,以分析基因表達的上...
二代測序——蛋白質(zhì)甲基化 概念及位置:蛋白質(zhì)甲基化是指在蛋白質(zhì)的氨基酸殘基上添加甲基基團。常見的甲基化修飾位點包括精氨酸(Arg)和賴氨酸(Lys)殘基。 作用 1、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用:例如,組蛋白(染色體的組成成分)的甲基化...
③二代測序一般多久出結(jié)果? 3、測序深度和覆蓋度要求 測序深度是指每個堿基被測序的平均次數(shù),覆蓋度是指測序獲得的堿基占整個基因組(或目標區(qū)域)的比例。如果要求高測序深度和高覆蓋度,比如進行**全基因組的深度測序(測序深度可能達到100X甚至更高...
二代測序——蛋白質(zhì)甲基化 概念及位置:蛋白質(zhì)甲基化是指在蛋白質(zhì)的氨基酸殘基上添加甲基基團。常見的甲基化修飾位點包括精氨酸(Arg)和賴氨酸(Lys)殘基。 作用 1、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用:例如,組蛋白(染色體的組成成分)的甲基化...
二代測序的建庫步驟① 一、樣本準備 樣本采集:根據(jù)研究目的采**適的樣本,如血液、組織、細胞等。例如,在**研究中,可能會采集**組織和對應(yīng)的正常組織。對于血液樣本,一般采用靜脈穿刺采集外周血,收集在含有抗凝劑(如EDTA)的**管中,以防止血...
一代、二代、三代測序的技術(shù)原理和技術(shù)特點分別是什么? 技術(shù)原理: 一代—雙脫氧終止法 二代—橋式PCR+4色熒光可逆終止+激光掃描成像 三代—PacBio SMRT測序技術(shù) 技術(shù)特點: 一代—只能檢測序列一致的PCR產(chǎn)物...
什么樣本可以做二代測序?② 組織樣本 新鮮組織:如手術(shù)切除的**組織、活檢組織等。新鮮組織樣本中的細胞完整性較好,能夠提供高質(zhì)量的DNA和RNA。在**研究中,對新鮮**組織進行全基因組測序、轉(zhuǎn)錄組測序等,可以深入了解**的基因突變、基因表達變...
什么樣本可以做二代測序?① 1、血液樣本 全血:這是最常見的樣本類型之一。血液中含有白細胞,其細胞核內(nèi)有完整的基因組DNA。通過提取白細胞中的DNA,可以進行全基因組測序、全外顯子組測序等。例如,在遺傳病的基因診斷中,抽取患者的全血,提取DNA...
二代測序的建庫步驟① 一、樣本準備 樣本采集:根據(jù)研究目的采**適的樣本,如血液、組織、細胞等。例如,在**研究中,可能會采集**組織和對應(yīng)的正常組織。對于血液樣本,一般采用靜脈穿刺采集外周血,收集在含有抗凝劑(如EDTA)的**管中,以防止血...
二代測序——技術(shù)原理類問題 二代測序與一代測序的區(qū)別是什么:一代測序技術(shù)如Sanger測序,一次只能讀取一條DNA序列,通量低、速度慢、成本高,但準確性高,適用于對少量基因片段的精確測序。而二代測序技術(shù)具有高通量、速度快、成本低等優(yōu)點,可以同時對大量...
二代測序——基因組測序該測幾個G?② 人類全外顯子組測序 人類全外顯子組*占基因組的1%-2%,大小約為30M-60M左右,但通常需要較高的測序深度來確保外顯子區(qū)域的變異檢測準確性,一般測序深度在100X-200X之間,數(shù)據(jù)量大約在3G-12G...
二代測序技術(shù)在不同人群中的準確性有何差異① **患者 優(yōu)勢:對于**患者,二代測序技術(shù)準確性相對較高,在**的診斷、***及監(jiān)測等方面應(yīng)用***。比如肺*患者,通過檢測**組織或血液中的基因突變,可準確找到如EGFR、ALK等驅(qū)動基因突變,為靶...
什么樣本可以做二代測序?① 1、血液樣本 全血:這是最常見的樣本類型之一。血液中含有白細胞,其細胞核內(nèi)有完整的基因組DNA。通過提取白細胞中的DNA,可以進行全基因組測序、全外顯子組測序等。例如,在遺傳病的基因診斷中,抽取患者的全血,提取DNA...
二代測序——轉(zhuǎn)錄組測序的背景和基本原理 1、背景:在基因表達過程中,DNA 轉(zhuǎn)錄為 RNA,轉(zhuǎn)錄后的 RNA 會經(jīng)過一系列加工,包括剪接等過程形成成熟的 mRNA,然后進行翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)。轉(zhuǎn)錄組測序可以讓我們在全基因組范圍內(nèi)研究基因的表達情況,相比于...
不同二代測序技術(shù)平臺的速度 Illumina 測序平臺:這是目前市場上應(yīng)用較為***的二代測序平臺之一,其測序速度較快。例如 Illumina NovaSeq 系列,一次運行可以在 1-3 天內(nèi)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),通量可達數(shù)億甚至數(shù)十億條讀長,能夠滿足大...
④二代測序一般多久出結(jié)果? 4、數(shù)據(jù)分析的復(fù)雜程度 數(shù)據(jù)分析是二代測序的重要環(huán)節(jié)。簡單的分析,如檢測已知的單核苷酸多態(tài)性(SNP),可以通過與參考基因組比對后利用一些成熟的軟件快速完成。但如果是進行復(fù)雜的分析,如尋找新的基因融合事件、復(fù)雜結(jié)構(gòu)變...
二代測序——RNA甲基化的概念、作用和檢測方法 RNA 甲基化概念及位置:RNA 甲基化是在 RNA 分子上添加甲基基團,其中 N6 - 甲基腺苷(m6A)是最常見的一種 RNA 甲基化修飾形式,它主要發(fā)生在 mRNA(信使 RNA)的腺嘌呤(A)殘...
二代測序的優(yōu)勢和劣勢分別有哪些? 優(yōu)勢:能夠同時得到大量的序列數(shù)據(jù),相比于一代測序技術(shù),通量提高了成千上萬倍;單條序列成本非常低廉。 劣勢:序列讀長較短,Illumina平臺為250-300bp,454平臺也只有500bp左右;由于建庫中利用了...
二代測序——轉(zhuǎn)錄組測序的實驗流程(下) 測序 根據(jù)研究需求和預(yù)算選擇合適的測序平臺,如 Illumina 測序平臺。它的測序原理主要是邊合成邊測序(SBS)。在測序過程中,dNTP(脫氧核糖核苷三磷酸)帶有不同顏色的熒光標記,當新的 dNTP ...
二代測序的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些? 基因組學(xué)研究:用于全基因組測序,快速獲取物種的基因組序列信息,研究基因組結(jié)構(gòu)、變異、進化等;進行全外顯子組測序,重點關(guān)注編碼蛋白質(zhì)的外顯子區(qū)域,發(fā)現(xiàn)與疾病相關(guān)的基因突變。 轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究:通過對轉(zhuǎn)錄組進行測序,可分析基...
二代測序不同應(yīng)用場景下的速度有多快? 病原微生物檢測:一般來說,二代測序用于檢測病原微生物時,能夠在幾個小時到一天左右出結(jié)果。比如在快速檢測血液中的病原微生物時,通??梢栽趲讉€小時內(nèi)獲得檢測結(jié)果,相比傳統(tǒng)的血液培養(yǎng)方法,時間大幅縮短,傳統(tǒng)血液培養(yǎng)一般...
①二代測序一般多久出結(jié)果? 二代測序(Next-GenerationSequencing,NGS)出結(jié)果的時間會受到多種因素的影響,一般在數(shù)天到數(shù)周不等。 1、樣本類型和質(zhì)量 不同的樣本類型處理時間不同。例如,血液樣本相對容易處理,提取D...