浙江哪里有二代測序提供

來源: 發(fā)布時間:2024-12-10

①二代測序一般多久出結(jié)果?

二代測序(Next-GenerationSequencing,NGS)出結(jié)果的時間會受到多種因素的影響,一般在數(shù)天到數(shù)周不等。

1、樣本類型和質(zhì)量

不同的樣本類型處理時間不同。例如,血液樣本相對容易處理,提取DNA的過程比較常規(guī)。如果是組織樣本,可能需要先進行樣本的解離等復雜操作。如果樣本質(zhì)量高,DNA提取和文庫構(gòu)建等前期工作會比較順利,能加快整體進程。但如果樣本量少或者DNA有降解等質(zhì)量問題,可能需要重新提取樣本或者進行DNA修復等操作,這會**延長時間。例如,對于新鮮血液樣本,DNA提取可能在1-2天內(nèi)完成;而對于一些福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織樣本,可能需要3-5天來完成高質(zhì)量DNA的提取和后續(xù)的優(yōu)化處理。


二代測序的成本比一代測序高嗎?浙江哪里有二代測序提供

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二代測序技術(shù)的一些***研究進展②

植物基因組學研究領(lǐng)域 :

花生四倍體野生種基因組測序:河南農(nóng)業(yè)大學殷冬梅教授團隊和上海交通大學韋朝春教授團隊聯(lián)合發(fā)布了花生四倍體野生種近乎完整基因組 amon2.0 版本。該研究結(jié)合 ONT 超長讀段、二代測序和 Hi-C 等多種測序技術(shù),使基因組的連續(xù)性、完整性和準確性都得到了顯著提高,為花生的遺傳馴化和分子育種提供了重要的基因組數(shù)據(jù)信息資源。

長雄野生稻基因組解析:中科院昆明動物所王文研究組與云南省農(nóng)科院糧食作物研究所胡鳳益研究組等中外機構(gòu)合作,利用二代測序技術(shù)成功組裝出高質(zhì)量的長雄野生稻基因組,并對其與近緣物種的分歧時間、基因的收縮擴張等進行了分析,還鑒定出一批可能影響地下莖以及自交不親和性狀的候選基因及代謝途徑,為解析相關(guān)分子機制提供了重要線索。 寧夏二代測序二代測序的原理是什么?

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二代測序——轉(zhuǎn)錄組測序的實驗流程(上)

樣本采集和 RNA 提取

樣本采集需要考慮研究目的和樣本類型。例如,研究**組織的轉(zhuǎn)錄組,就要準確獲取**組織樣本,同時比較好有對應的正常組織作為對照。RNA 提取方法有多種,常用的如 Trizol 法,它可以有效地從細胞或組織中提取總 RNA,包括 mRNA、rRNA 和 tRNA 等。提取后的 RNA 質(zhì)量至關(guān)重要,需要通過瓊脂糖凝膠電泳或?qū)iT的 RNA 質(zhì)量檢測儀器來評估 RNA 的完整性和純度。

RNA 質(zhì)量檢測和定量

完整性方面,通常使用 RNA 完整性指數(shù)(RIN)來衡量。RIN 值越高(一般認為 RIN > 7 是高質(zhì)量 RNA),說明 RNA 完整性越好。定量方法主要有紫外分光光度法和熒光定量法。紫外分光光度法可以通過測量 RNA 在 260nm 和 280nm 處的吸光度比值來估計 RNA 純度,比值在 1.8 - 2.0 之間表示純度較好。熒光定量法則是使用專門的熒光染料(如 Qubit)來更準確地測量 RNA 濃度。

文庫構(gòu)建

首先要進行mRNA富集,一般使用帶有poly-T的磁珠來特異性地捕獲mRNA,因為真核生物mRNA的3'端都有poly-A尾巴。然后將mRNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA,再通過超聲或酶切等方法將cDNA片段化,片段大小通常在幾百個堿基對左右。之后在片段兩端連接上測序接頭,經(jīng)過PCR擴增來增加文庫的量,使其達到可以上機測序的要求。


二代測序技術(shù)的一些***研究進展①

疾病診斷與***領(lǐng)域 :消化系統(tǒng)**標志物檢測:2024 年的**共識指出,二代測序(NGS)技術(shù)可同時檢測消化系統(tǒng)**中的多種標志物,如錯配修復基因變異、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MSI)狀態(tài)、**突變負荷(TMB)等,為**的精細***提供了更***、準確的信息。例如,MSI-H 的實體瘤患者可使用帕博利珠單抗進行***,而 NGS 技術(shù)能更好地檢測 MSI 狀態(tài)及相關(guān)耐藥機制。

**液體活檢:通過檢測血液中的循環(huán)** DNA(ctDNA)等標志物,實現(xiàn)對**的早期篩查、診斷和***監(jiān)測。NGS 技術(shù)能夠更敏感地檢測到 ctDNA 中的基因突變和變異,為**的無創(chuàng)診斷提供了有力支持。


二代測序可以應用在哪些方面?

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二代測序——基因組測序該測幾個G?③

基因組測序所需的測序量通常用數(shù)據(jù)量來衡量,一般以 G 為單位,不同的測序目的和基因組類型所需要的測序量有所不同。

微生物基因組測序細菌基因組:

細菌基因組

相對較小,一般在1M-10M之間,測序深度通常在50X-100X左右,數(shù)據(jù)量在0.05G-1G左右即可滿足基本的基因組組裝和變異檢測需求。

***基因組:***基因組大小差異較大,從幾M到上百M都有。對于較小的***基因組,測序深度在30X-50X左右,數(shù)據(jù)量在0.1G-5G之間;而對于較大的***基因組,可能需要適當降低測序深度至10X-20X,數(shù)據(jù)量在1G-20G左右。 單細胞測序?qū)儆诙鷾y序嗎?廣西嘉安健達二代測序分析

二代測序使用的是哪種設備?浙江哪里有二代測序提供

二代測序的建庫步驟②

二、片段化處理

物理方法:超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如,在一些文庫構(gòu)建中,將DNA樣本置于超聲破碎儀中,通過調(diào)整超聲功率和時間,可以將DNA片段化到幾百堿基對(bp)的長度范圍,一般在150-300bp左右,這符合二代測序的讀長要求。超聲破碎的優(yōu)點是片段大小比較均勻,但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù),否則可能會導致過度破碎或片段大小不一致。

酶切方法:利用限制性內(nèi)切酶進行片段化。限制性內(nèi)切酶能夠識別特定的DNA序列,并在這些序列處切割DNA。例如,用EcoRⅠ酶可以識別GAATTC序列并進行切割。通過選擇合適的限制性內(nèi)切酶組合,可以將DNA切割成期望大小的片段。不過,這種方法的局限性在于酶切位點的限制,可能無法獲得理想的片段大小分布,而且可能會引入酶切偏好性。 浙江哪里有二代測序提供

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標簽: 二代測序