南京計(jì)算機(jī)輔助精子分析ALH

檢查具備條件受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后，禁房事5－7天（上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）；[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè)，以**方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間；貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。精液常規(guī)觀察：精液總?cè)萘浚ê辽踊顒?dòng)情況，精子密度（個(gè)/毫升），精液液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間），不動(dòng)精子（個(gè)/高倍視野）等。見不動(dòng)精子，須染色方可區(qū)分：不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn)，仍然找不到精子；方可報(bào)告無(wú)精。經(jīng)三次取樣化驗(yàn)，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無(wú)精子癥。Hamilton Thorne精子分析儀具有良好的數(shù)據(jù)管理和報(bào)告生成功能，能夠方便用戶查閱和分享分析結(jié)果。南京計(jì)算機(jī)輔助精子分析ALH

精液檢查前有什么注意事項(xiàng)？一、留精液前，病人應(yīng)停止**4～7天。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、**睪丸酮、苯丙酸諾龍。采取精液時(shí)，可用軟皂或石蠟油做**按摩，將標(biāo)本收集在無(wú)菌的試管中；也可用避孕套（沖洗干凈，不含殺精子藥物）或采用**中斷法收集精液，但這樣收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液，可經(jīng)直腸內(nèi)按摩精囊及輸精管末端、壓迫采尿，檢查沉渣中有無(wú)精子。不要將精液暴露在過熱和過冷的環(huán)境中。及時(shí)交給醫(yī)生備查，不得超過30分鐘。冷天要注意保暖，送檢時(shí)可放在內(nèi)衣口袋里保溫。二、如果要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，應(yīng)先沖洗、消毒尿道口，再將精液收集在無(wú)菌試管中。夫妻同居3年以上，沒有采取任何避孕措施而未能受孕的稱不孕癥。如果是不孕癥，在雙方未進(jìn)行檢查前，不能盲目懷疑某一方，更不能認(rèn)為不孕的原因是女方。妊娠是夫妻雙方的事。實(shí)現(xiàn)受孕，男方的精液含量應(yīng)正常，形態(tài)和動(dòng)力也應(yīng)正常。女方能正常排卵，精子和卵子能結(jié)合成受精卵，這種受精卵能在子宮內(nèi)膜種植。上述的幾個(gè)環(huán)節(jié)中的某一個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)生障礙，都可引起不孕。三、如果上述檢查結(jié)果精液是正常的，女方也應(yīng)去醫(yī)院檢查，包括全身情況、生殖***、卵巢排卵功能、輸卵管通暢否、免疫檢查。美國(guó)慢速運(yùn)動(dòng)精子分析DAPCASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的參數(shù)，這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動(dòng)特性。

方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無(wú)***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。

CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：3.2**分析儀閾值的確定（1）精子灰度、對(duì)比度閾值：由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來(lái)判斷精子的真?zhèn)?，?duì)亮度和對(duì)比度要求特別高，檢測(cè)時(shí)應(yīng)多次試用，尋找能準(zhǔn)確識(shí)別精子的比較好灰度閾值[8]。（2）碎片：測(cè)定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾，測(cè)定活動(dòng)精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9]，這些也是需要注意的。對(duì)于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分，如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等，可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對(duì)于無(wú)精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計(jì)數(shù)在內(nèi)，應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后，再涂片檢查，確認(rèn)無(wú)精后再出報(bào)告。傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法，準(zhǔn)確率有待提高。

全自動(dòng)的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出?？梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜?fù)的載玻片，深度從10um～100um。每次分析捕捉100幀圖像，掃描速度每秒60幀。**的軟件升級(jí)。IVOS能提供：精確、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果。高速分析，在60Hz下半秒掃描30幀，為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省成本。[1]主要功能IVOS自動(dòng)精子活動(dòng)、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng)。HamiltonThorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床、研究實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域，成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)?？梢詰?yīng)用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動(dòng)物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，前向性（STR）?：平均路徑的直線性。北京前向運(yùn)動(dòng)精子分析W.H.O 5

IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件，能夠自動(dòng)識(shí)別和計(jì)算精子的各項(xiàng)參數(shù)，減少了人工操作的誤差。南京計(jì)算機(jī)輔助精子分析ALH

CASA，即計(jì)算機(jī)輔助精子分析，是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào)，相比人工檢測(cè)，CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng)，以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示，CASA檢測(cè)的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀，通常通過相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子，適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確?？煽拷Y(jié)果，操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡，更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國(guó)內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀，通常進(jìn)行兩次分析，每次至少200個(gè)精子，結(jié)果通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí)，需精確測(cè)量精子體積，確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵，每次檢測(cè)需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**，可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面，CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段，尾部缺陷可通過活力評(píng)估。對(duì)于碎片過多或黏稠的**，可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語(yǔ)，如VCL（曲線速度）、VSL（直線速度）等，它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。南京計(jì)算機(jī)輔助精子分析ALH