免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry）又稱 免疫細(xì)胞化學(xué)。它是 組織化學(xué)的分支，它是用標(biāo)記的 特異性抗體（或抗原）對(duì)組織內(nèi)抗原（或抗體）的分布進(jìn)行組織和細(xì)胞原位檢測(cè)技術(shù)。 中文名 免疫組化技術(shù) 外文名 Immunohistochemistry 又 稱 免疫細(xì)胞化學(xué) 屬 于 組織化學(xué) 目錄 1 前言 ? 發(fā)展介紹 ? 技術(shù)分類 ? 標(biāo)記物 ? 應(yīng)用 2 免疫組織化學(xué) 免疫組化技術(shù)前言 編輯 免疫組化技術(shù)發(fā)展介紹 ——1941年 Coons 首先用 熒光素 標(biāo)記抗體—檢測(cè)肺組織內(nèi)的肺炎雙球菌獲得成功。 —— 60年代 Nakane建立酶標(biāo)抗體技術(shù)——鐵蛋白標(biāo)記Ab技術(shù)。 —— 70年代 Stemberger 改良上述技術(shù)，建立 辣根過(guò)氧化物酶——抗體過(guò)氧化物酶（***）技術(shù)，使免疫細(xì) 胞化學(xué)得到廣泛應(yīng)用。 —— 80年代 Hsu 等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金—銀染色法、半抗原標(biāo)記法、 免疫電鏡 技術(shù)相繼問(wèn)世。 上海免疫組化切片 不掉片，厚薄均勻找上海融享生物科技有限公司價(jià)格更低 服務(wù)更好。安徽熒光免疫組化檢測(cè)哪里有
色反應(yīng)的控制 免疫酶染色應(yīng)注意控制：①成色質(zhì)濃度和溫育時(shí)間可調(diào)節(jié) ，增加成色質(zhì)的量和/或增加底物溫育時(shí)間，可增加反應(yīng)產(chǎn)物強(qiáng)度。著色太深可減少溫育反應(yīng)時(shí)間。②過(guò)氧化物酶顯色時(shí)，H2O2較大濃度將使顯色反應(yīng)過(guò)快而致背景加深；過(guò)量H2O2可能88酶的活性。
4．復(fù)染 根據(jù)所用的染色方法和呈顯顏色等，可選用適當(dāng)?shù)膹?fù)染方法。如陽(yáng)性結(jié)果呈紅或棕色，則用蘇木素將細(xì)胞核染成蘭色，以便定位檢測(cè)。也可用1%～2%甲基綠復(fù)染。
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非特異性染色彌散性均勻）2．組織切片制作過(guò)程的影響①固定不良—非特異性染色，顯示不均。②邊緣干燥—非特異性染色（常見(jiàn)），加抗體時(shí)勿干片。3．人工假象與特異性結(jié)果顯示不在同一平面上。陽(yáng)性對(duì)照：用已知抗原陽(yáng)性的切片與待檢標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色。對(duì)照切片呈陽(yáng)性結(jié)果，標(biāo)為陽(yáng)性對(duì)照。陰性對(duì)照：用確證不含已知抗原的標(biāo)本作對(duì)照，應(yīng)呈陰性結(jié)果，稱陰性對(duì)照。其實(shí)這只是陰性對(duì)照中的一種，陰性對(duì)照還應(yīng)包括空白、替代、吸收和***實(shí)驗(yàn)?！旧〉膸追N原因：（1）所染的全部切片均為陰性結(jié)果，包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi)。全部（－）原因可能：①染色未完全嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行；②漏加一種抗體，或抗體失效；③緩沖液內(nèi)含疊氮化鈉，***了酶的活性；④底物中所加H2O2量少或失效；⑤復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)（2）所有切片均呈陽(yáng)性反應(yīng)，原因可能是：①切片在染色過(guò)程中抗體過(guò)濃，或干燥了。②緩沖液配置中未加氯化鈉和PH值不準(zhǔn)確，洗滌不徹底。③使用已變色的呈色底物溶液，或呈色反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。④抗體溫育的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。⑤H2O2濃度過(guò)高，呈色速度過(guò)快。粘附劑太厚。（3）所有切片背景過(guò)深，原因可能是：①未加酶消化處理切片。②切片或涂片過(guò)厚。③漂洗不夠。
芯片與常規(guī)切片免疫組化標(biāo)記的比較 常規(guī)制片免疫組化陰性，而組織芯片免疫組化陽(yáng)性者包括ER2例，PR1例;常規(guī)制片免疫組化陽(yáng)性，而組織芯片免疫組化陰性者包括nm23、Her-2各1例。而部分病例常規(guī)制片免疫組化和組織芯片免疫組化陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度略有不同。組織芯片的免疫組化結(jié)果與常規(guī)制片免疫組化比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異無(wú)顯現(xiàn)性。3.3 規(guī)格組織芯片免疫組化效果的比較 在本觀察中，使用1.0mm大小的組織芯進(jìn)行免疫組化染色所得的結(jié)果和使用0.5mm組織芯所得結(jié)果一致，表明組織芯大小并不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，關(guān)鍵是在組織芯片制作過(guò)程中認(rèn)真觀察原始常規(guī)切片，選取表示性區(qū)域并準(zhǔn)確標(biāo)記，在受體蠟塊相應(yīng)位置采取組織芯塊。在同樣面積的芯片，可以排列較多數(shù)量的小尺寸組織芯塊，較容易包含大量研究病例病理實(shí)驗(yàn) 免疫熒光,HE染色服務(wù)實(shí)驗(yàn)找融享生物。
固定若想得到理想的ICC染色結(jié)果、正確地判斷抗原物質(zhì)在組織細(xì)胞內(nèi)的位置，除需有良好酶和抗體外，保持組織細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的不動(dòng)性（Immobility）和免疫活性也是至關(guān)重要的。換言之，如果抗原物質(zhì)在組織細(xì)胞間彌散、丟失或失去免疫活性，無(wú)論如何努力染色都是徒勞的，所以說(shuō)固定是ICC染色中非常重要的一環(huán)。ICC與其它組織學(xué)技術(shù)不同，除要求保存良好的結(jié)構(gòu)外，還需保存組織抗原的免疫活性。一般認(rèn)為，新鮮組織能夠比較大限度地保存組織抗原的免疫活性，但結(jié)構(gòu)較差，易出現(xiàn)抗原彌散丟失現(xiàn)象。Cumming（1980）報(bào)告，不固定的組織切片ICC染色時(shí)，環(huán)鳥(niǎo)苷酸含量丟失80%以上上海融享專注免疫組化服務(wù)。山東特殊染色免疫組化哪家好
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免疫熒光方法
是較好早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，先將已知抗體標(biāo)上熒光素，以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便，所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣。2）免疫酶標(biāo)方法
免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)?；驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過(guò)光鏡或電鏡，對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是較好常用的技術(shù)。該方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點(diǎn)是：定位準(zhǔn)確，對(duì)比度好，染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速，已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法，且隨著方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來(lái)越方便。在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測(cè)系統(tǒng)等。
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