染色免疫組化可以輔助病理診斷、指導(dǎo)、評(píng)估預(yù)后，所以在做免疫組化過程中的質(zhì)控問題處理尤其重要［1］。隨著免疫組化試劑新種類不斷出現(xiàn)及方法的改進(jìn)，特別是即用型試劑盒的出現(xiàn)，使抗體的標(biāo)記更加簡(jiǎn)便、快捷，更加規(guī)范化。免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化染色技術(shù)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的技術(shù)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都可以直接影響免疫組化結(jié)果，
【摘要】目的研究CEA免疫組化染色在檢測(cè)系膜微轉(zhuǎn)移及環(huán)周切緣(CRM)侵犯方面的價(jià)值。方法選取經(jīng)纖維結(jié)腸鏡及病理證實(shí)為直腸*病人40例，應(yīng)用大組織切片技術(shù)對(duì)術(shù)后標(biāo)本處理，分別行常規(guī)染色及CEA免疫組化染色，比較分析兩種染色方法在檢測(cè)系膜微轉(zhuǎn)移及CRM侵犯方面的價(jià)值。結(jié)果CEA染色檢測(cè)**浸潤(rùn)程度大于常規(guī)病理染色，差異有性（t=5.2**<0.001）
上海融享生物免疫組化 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)，可以提供有效保障。上海組織免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)
目的 探討不同規(guī)格組織芯片在乳腺相關(guān)基因產(chǎn)物檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。方法 采用微波修復(fù)免疫組織化學(xué)S-P法和組織芯片技術(shù)，檢測(cè)ER、PR、nm23、Her-2、p53在31例乳腺組織中的表達(dá)，并與常規(guī)病理學(xué)方法進(jìn)行比較分析。結(jié)果 不同規(guī)格組織芯相比較，免疫組化結(jié)果幾乎完全一致。常規(guī)制片免疫組化陰性，而組織芯片免疫組化陽(yáng)性者包括ER2例，PR1例;常規(guī)制片免疫組化陽(yáng)性，而組織芯片免疫組化陰性者包括nm23、Her-2各1例。部分病例常規(guī)制片免疫組化和組織芯片免疫組化陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度略有不同。結(jié)論 組織芯片的免疫組化結(jié)果與常規(guī)制片免疫組化比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異無(wú)顯現(xiàn)性（P>0.05）。組織芯片技術(shù)有良好應(yīng)用價(jià)值和廣闊發(fā)展前景。黑龍江熒光免疫組化服務(wù)免疫組化服務(wù)優(yōu) 周期短，效率高。
冰凍切片是借助低溫冷凍將活檢組織快速凍結(jié)達(dá)到一定的硬度進(jìn)行制片的一種方法，手術(shù)中等待冰凍快速病理報(bào)告，以病變性質(zhì)而決定手術(shù)方式和范圍。而及時(shí)、準(zhǔn)確的發(fā)出報(bào)告需要高質(zhì)量的冰凍切片，鑒于冰凍切片常出現(xiàn)染色模糊不清的現(xiàn)象，對(duì)病理判斷造成困難，甚至造成誤診或漏診，實(shí)踐中我們發(fā)現(xiàn)和組織固定、染色時(shí)返藍(lán)有一定關(guān)系，為了提高冰凍制片質(zhì)量，我們將FAA、Bouin氏液、88酒精三種固定液作了比較，并在染色中加用促藍(lán)液，認(rèn)為用88酒精固定液及染色時(shí)加用促藍(lán)液制作的冰凍切片質(zhì)量較理想，
—20℃）凍存——應(yīng)選較佳稀度凍存。③若工作濃度大于1∶500則要先將原液稀釋十倍，而后分裝10μl/瓶→凍存（-20℃）于冰箱備用。④關(guān)于Ab保存應(yīng)參照說明書。（3）Ab濃度的選擇Ab濃度不可太高或太低，因?yàn)锳g-Ab結(jié)合需在一定濃度范圍內(nèi)進(jìn)行，若一方過剩則形成復(fù)合物小且少；極過剩時(shí)已形成的復(fù)合物亦會(huì)解體而呈現(xiàn)假陰性。——并非Ab濃度越高越好。3．Ab滴片技術(shù)——所滴的抗體應(yīng)與切片上的組織剛好吻合。[注意]滴抗體前需把切片上的水弄干，但不能干片。要領(lǐng)：甩凈組織周圍的水。4．PBS洗滌技術(shù)（1）洗滌的目的①保證離子濃度和PH值。②減少非特異反應(yīng)（平時(shí)Ab不可靠很純）（2）方法：洗三次，每次5分鐘。5．Ab孵育技術(shù)（1）必須在濕盒內(nèi)進(jìn)行，以防抗體的蒸發(fā)和干片。（2）溫度與時(shí)間4℃：過夜；37℃：2hor參考說明書6．光鏡控制顯色方法（1）室內(nèi)操作：注意溫度與時(shí)間的關(guān)系，室溫較宜5分鐘。（2）染色稍淺亦可拿出，脫水，封片后顏色可加深。對(duì)照組和染色結(jié)果的評(píng)價(jià)從以下幾個(gè)方面綜合評(píng)價(jià)：1．陽(yáng)性染色特點(diǎn)①Ag定位，胞漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。（非特異性～細(xì)胞與組織無(wú)區(qū)別）②染色強(qiáng)度不同：顏色深淺不一。上海融享專注免疫組化服務(wù)。
酶消化法 常用的消化酶有胰蛋白酶、胃蛋白酶，應(yīng)嚴(yán)格掌握好消化時(shí)間、溫度和濃度。胰蛋白酶使用濃度為0.05%～0.1%，消化溫度為37℃，消化時(shí)間為10～40**要用于細(xì)胞內(nèi)抗原的顯示:胃蛋白酶使用濃度為0.4%，消化溫度為37℃，消化時(shí)間為30～180要用于細(xì)胞間質(zhì)抗原的顯示，如:Laminin（層粘蛋白），Collagen IV（IV型膠原蛋白）等。熱修復(fù)法 現(xiàn)常用微波修復(fù)、高溫高壓修復(fù)、水浴加熱修復(fù)法。較常用的修復(fù)法是pH6.0枸櫞酸緩沖液。修復(fù)過程中的注意要點(diǎn)是:（1）達(dá)到規(guī)定的溫度（92℃～95℃以上）;（2）維持一定的時(shí)間，微波修復(fù)、水浴加熱須控制在10～15min，高溫高壓修復(fù)須控制在2min左右;（3）避免切片干涸，如果切片干涸，抗原則可能完全丟失;（4）加熱后必須經(jīng)過室溫自然冷卻20～30min，使未折疊的蛋白分子鏈恢復(fù)天然構(gòu)型。融享生物是免疫組化，切片技術(shù)服務(wù)商之一，從事轉(zhuǎn)錄組測(cè)序/mRNA測(cè)序已經(jīng)多年。安徽免疫學(xué)免疫組化檢測(cè)機(jī)構(gòu)
免疫組化檢測(cè)服務(wù)找融享生物。上海組織免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)
（1）ABC復(fù)合物的制備：（2）ABC法反應(yīng)原理6．SP或SAP法（過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素或過氧化物酶標(biāo)記的堿性磷酸酶染色）Streptavidin/peroxidaseorstrepta-vidin/alkalinephosphatase）※該法是ABC法基礎(chǔ)上的進(jìn)一步改良，使卵白素與鏈霉（而非生物素）結(jié)合，而后再結(jié)合PO。它有4個(gè)亞基可與生物素結(jié)合，靈敏特異，背景低，成本低?，F(xiàn)在還有plus盒。優(yōu)點(diǎn)是：更簡(jiǎn)便，放大倍數(shù)↑，等電點(diǎn)中性更適合組織。分子量小，穿透力↑。7．蛋白A—金法（Protein—Agoldmethod）~多用于電鏡8．雙重組化染色法應(yīng)用雙重免疫組織化學(xué)可在同一張切片，同一細(xì)胞或亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)內(nèi)同時(shí)顯示兩種不同的抗原。9．免疫金—銀染色法（Immunogold—silverstainingIGSS）固定——見前述注意事項(xiàng)：1．固定劑的選擇：因組織而不同，注意質(zhì)量和性能。2．固定方式的選擇：①浸漬固定（參考文獻(xiàn)）②灌注固定（+后固定）③蒸汽固定免疫組化染色步驟（以ABC法為例）1．切片脫蠟入水，入PBS洗三次/15分鐘。2．封閉內(nèi)源性過氧化物酶。用新配置的（在PAS或—HCL緩沖液）室溫，30分鐘。3．水洗，入PBS，洗三次，每次5分鐘。4．減少非特異性著色用稀釋20倍的正常血清（產(chǎn)生二次抗體動(dòng)物血清?。覝?，30分鐘。上海組織免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)