重慶作用dMMR抗體檢測(cè)試劑誠(chéng)信合作

    發(fā)明人還提供上述任一所述的抗msh6蛋白單克隆抗體，在msh6蛋白免疫檢測(cè)中的用途。進(jìn)一步地，所述免疫檢測(cè)包括免疫組織化學(xué)法，免疫印跡法和酶聯(lián)免疫法。區(qū)別于現(xiàn)有技術(shù)，上述技術(shù)方案依據(jù)msh6蛋白、抗原性、組成氨基酸的親疏水性以及二級(jí)結(jié)構(gòu)，選擇msh6蛋白第1-100位氨基酸序列與gst蛋白融合表達(dá),其dna編碼序列為seqid**,用大腸桿菌進(jìn)行表達(dá)，得到免疫原。對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，經(jīng)細(xì)胞融合、篩選和亞克隆，獲得高效分泌抗msh6蛋白單克隆抗體的單克隆細(xì)胞系abm58060-20a2-pu,以及由該細(xì)胞系所分泌的抗msh6蛋白單克隆抗體。本方案得到的抗體具有高特異性、敏感性，可以特異性識(shí)別表達(dá)msh6蛋白的細(xì)胞，適用于免疫學(xué)檢測(cè)，特別是免疫組化檢測(cè)?；旧Y(jié)果圖(左為abm58060-20a2-pu分泌的msh6，右為市售msh6)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1重組msh6蛋白片段的制備一、抗原片段選擇依據(jù)uniprot中登錄號(hào)為p52701的蛋白質(zhì)序列進(jìn)行序列和二級(jí)結(jié)構(gòu)分析，全長(zhǎng)為1360個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的msh6蛋白含有muts超家族區(qū)域，其分子量約為152kda左右，依據(jù)通過在線服務(wù)器測(cè)的蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)(secondarystructure)和表面可及性(surfaceaccessibility)參數(shù)，并通過對(duì)其抗原性指數(shù)(jamesonba,:(1):181-6.)的分析結(jié)果。邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)可以提供覆蓋肺ai、腸ai、肝ai、胃ai、乳腺ai、前列腺ai等多種實(shí)體瘤的上百項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目。重慶作用dMMR抗體檢測(cè)試劑誠(chéng)信合作

    對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前*常用的技術(shù)。本方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點(diǎn)是：定位準(zhǔn)確，對(duì)比度好，染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速，已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法，且隨著方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來越方便。目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法、ABC法、SP法等。3、免疫膠體金技術(shù)免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白，對(duì)蛋白的生物學(xué)活性則沒有明顯的影響。因此，用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針，就能對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位，甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒，且膠體金的電子密度高，所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色，因此也適合進(jìn)行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。四、免疫組化技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)1、特異性強(qiáng)免疫學(xué)的基本原理決定了抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此。黑龍江一體化dMMR抗體檢測(cè)試劑共同合作邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)蛋白免疫產(chǎn)品開發(fā)平臺(tái)可提供基于IHC平臺(tái)的體外診斷試劑盒以及蛋白抗體原料一站式開發(fā)服務(wù)。

    使得微衛(wèi)星序列長(zhǎng)度或堿基組成發(fā)生改變。MSI-H的患者為dMMR，MSI-L和MSS的患者為pMMR。目前推薦用于檢測(cè)微衛(wèi)星不穩(wěn)定的5個(gè)常用位點(diǎn)分別為BAT-25、BAT-26、D2S123、D5S346和D17S250，2個(gè)位點(diǎn)不穩(wěn)定則稱為微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定（MSI-H）；l個(gè)位點(diǎn)不穩(wěn)定稱為微衛(wèi)星低度不穩(wěn)定（MSI-L）；0個(gè)位點(diǎn)不穩(wěn)定則稱為微衛(wèi)星穩(wěn)定（MSS）。微衛(wèi)星狀態(tài)與結(jié)腸ai臨床分期密切相關(guān)，在II期結(jié)直腸ai中，MSI-H/dMMR患者約占20%左右，在III期結(jié)直腸ai中約占12%，而在IV期中**少，約4%左右。1.微衛(wèi)星狀態(tài)在結(jié)腸ai中的預(yù)后作用從2000年Gryfe等發(fā)現(xiàn)Ⅰ~Ⅳ期的MSI-H結(jié)直腸ai患者對(duì)比MSS患者均具有***的生存優(yōu)勢(shì)開始，此后人們進(jìn)行了一系列MS狀態(tài)與結(jié)腸ai預(yù)后的相關(guān)研究，多數(shù)研究結(jié)果提示MSI對(duì)結(jié)腸ai的預(yù)后作用與臨床分期密切相關(guān)。在II期結(jié)腸ai中，MSI-H/dMMR是預(yù)后良好的標(biāo)志已被絕大多數(shù)研究所證實(shí)，基本達(dá)成共識(shí)；而對(duì)于III期結(jié)腸ai的預(yù)后價(jià)值尚存在爭(zhēng)議；對(duì)于IV期結(jié)腸ai，由于MSI-H例數(shù)過少，因此相關(guān)結(jié)果不能說明其是否具有預(yù)后價(jià)值。MS狀態(tài)對(duì)結(jié)腸ai的預(yù)后作用，不*與臨床分期相關(guān)，還與**原發(fā)部位相關(guān)。N0147研究結(jié)果顯示在III期結(jié)腸ai中，近端結(jié)腸（盲腸、升結(jié)腸、橫結(jié)腸）。

微衛(wèi)星不穩(wěn)定（microsatellite instability, MSI）

微衛(wèi)星不穩(wěn)定性是指與同一個(gè)體的正常組織細(xì)胞的DNA相比，liu細(xì)胞的基因組DNA中單個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)或五個(gè)核苷酸組成的重復(fù)序列的長(zhǎng)度發(fā)生了改變。liu組織表現(xiàn)出的微衛(wèi)星不穩(wěn)定性可按照所測(cè)標(biāo)記物的不穩(wěn)定程度分為高不穩(wěn)定性（MSI-H）、低不穩(wěn)定性（MSI-L）和微衛(wèi)星穩(wěn)定（MSS）。

錯(cuò)配修復(fù)缺陷（differentMismatchRepair,dMMR）DNA錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)MMR（MismatchRepair）是由一系列高度保守的基因及其表達(dá)的產(chǎn)物酶構(gòu)成，具有維持DNA復(fù)制的高保真度和基因組穩(wěn)定性、降低自發(fā)突變的功能。DNA錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)缺陷會(huì)造成微衛(wèi)星不穩(wěn)定情況。通常認(rèn)為dMMR與MSI-H在生物學(xué)上具有一致性，而MSI-L和MSS則是MMR正常（proficientmismatchrepair，pMMR）的表型。 【邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)】開發(fā)的dMMR抗體檢測(cè)試劑,檢測(cè)費(fèi)用低,技術(shù)成熟,臨床易開展。

    免疫組化（IHC）技術(shù)服務(wù)根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理，組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合，再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng)，前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結(jié)合，***通過呈色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分，在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。應(yīng)用領(lǐng)域在人類步入新世紀(jì)后，免疫組化技術(shù)在liu研究中的應(yīng)用也進(jìn)入了一個(gè)新時(shí)代，隨著越來越多新型、實(shí)用型抗體的出現(xiàn)及各種抗體新用途不斷被發(fā)現(xiàn)，免疫組化技術(shù)已進(jìn)入多標(biāo)記和定量研究的階段，使得該技術(shù)不**是liu學(xué)研究和診斷的重要方法，它已經(jīng)日益***地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域中，其結(jié)果已成為疾病診斷的依據(jù)或診斷標(biāo)準(zhǔn)的重要內(nèi)容。MLH1抗體試劑 蘇蘇械備20180519號(hào).個(gè)性化dMMR抗體檢測(cè)試劑誠(chéng)信合作

邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)擁有全技術(shù)平臺(tái)及豐富的伴隨診斷開發(fā)經(jīng)驗(yàn)，為藥企合作伙伴提供一體化開發(fā)服務(wù)。重慶作用dMMR抗體檢測(cè)試劑誠(chéng)信合作

    使MSI檢測(cè)的靈敏性、特異性和檢測(cè)的便利度都有了明顯進(jìn)步。3．錯(cuò)配修復(fù)蛋白免疫組織化學(xué)檢測(cè)與PCR-MSI檢測(cè)的優(yōu)缺點(diǎn)：文獻(xiàn)報(bào)道錯(cuò)配修復(fù)蛋白免疫組織化學(xué)檢測(cè)與PCR-MSI檢測(cè)結(jié)果的符合率非常高，達(dá)％，因此采用任何一種方法作為MSI-Hliu的篩查方法均可接受。相比之下，免疫組織化學(xué)法：(1)簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、快捷、穩(wěn)定，符合病理科日常工作流程，多數(shù)基層病理科均可開展；(2)所需組織量少，活檢標(biāo)本亦可檢測(cè)，且檢測(cè)結(jié)果與切除標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果一致；(3)可直接提示發(fā)生缺陷的錯(cuò)配修復(fù)蛋白類型，對(duì)于后續(xù)進(jìn)行錯(cuò)配修復(fù)基因胚系突變檢測(cè)以確診Lynch綜合征有明確的指向性；(4)少數(shù)MSH6胚系突變病例的liu由于錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)的功能冗余作用可不表現(xiàn)為MSI，但免疫組織化學(xué)可檢出蛋白表達(dá)缺失，因而可彌補(bǔ)PCR-MSI檢測(cè)方法的局限性。PCR-MSI檢測(cè)雖然相對(duì)復(fù)雜，費(fèi)用相對(duì)較高，但優(yōu)點(diǎn)是直接反映liu的MSI狀態(tài)，而且對(duì)于少數(shù)錯(cuò)義突變導(dǎo)致蛋白功能異常但并不影響蛋白的轉(zhuǎn)錄和抗原性時(shí)，免疫組織化學(xué)檢測(cè)可出現(xiàn)假陽(yáng)性，而PCR-MSI檢測(cè)正好可以彌補(bǔ)。四、***檢測(cè)MSI結(jié)直腸ai的必要性及推薦檢測(cè)流程區(qū)分MSI結(jié)直腸ai的臨床意義包括以下三個(gè)方面。1．提示預(yù)后：臨床研究發(fā)現(xiàn)，在Ⅱ期結(jié)直腸ai中。重慶作用dMMR抗體檢測(cè)試劑誠(chéng)信合作