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    發(fā)明人還提供上述任一所述的抗msh6蛋白單克隆抗體，在msh6蛋白免疫檢測中的用途。進(jìn)一步地，所述免疫檢測包括免疫組織化學(xué)法，免疫印跡法和酶聯(lián)免疫法。區(qū)別于現(xiàn)有技術(shù)，上述技術(shù)方案依據(jù)msh6蛋白、抗原性、組成氨基酸的親疏水性以及二級結(jié)構(gòu)，選擇msh6蛋白第1-100位氨基酸序列與gst蛋白融合表達(dá),其dna編碼序列為seqid**,用大腸桿菌進(jìn)行表達(dá)，得到免疫原。對小鼠進(jìn)行免疫，經(jīng)細(xì)胞融合、篩選和亞克隆，獲得高效分泌抗msh6蛋白單克隆抗體的單克隆細(xì)胞系abm58060-20a2-pu,以及由該細(xì)胞系所分泌的抗msh6蛋白單克隆抗體。本方案得到的抗體具有高特異性、敏感性，可以特異性識(shí)別表達(dá)msh6蛋白的細(xì)胞，適用于免疫學(xué)檢測，特別是免疫組化檢測?；旧Y(jié)果圖(左為abm58060-20a2-pu分泌的msh6，右為市售msh6)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1重組msh6蛋白片段的制備一、抗原片段選擇依據(jù)uniprot中登錄號(hào)為p52701的蛋白質(zhì)序列進(jìn)行序列和二級結(jié)構(gòu)分析，全長為1360個(gè)氨基酸長度的msh6蛋白含有muts超家族區(qū)域，其分子量約為152kda左右，依據(jù)通過在線服務(wù)器測的蛋白的二級結(jié)構(gòu)(secondarystructure)和表面可及性(surfaceaccessibility)參數(shù)，并通過對其抗原性指數(shù)(jamesonba,:(1):181-6.)的分析結(jié)果。邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)擁有專業(yè)的病理醫(yī)生提供相應(yīng)的閱片或遠(yuǎn)程病理閱片服務(wù)。上海作用dMMR抗體檢測試劑誠信合作

    目前較常使用的檢測技術(shù)為聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）和免疫組化（IHC）檢測[4]。PCR檢測，目前公認(rèn)的標(biāo)志物套餐由BAT25、BAT26、NR21、NR24、NR22或NR27組成。當(dāng)檢測的微衛(wèi)星標(biāo)志物中沒有發(fā)現(xiàn)異常，標(biāo)本定義為微衛(wèi)星穩(wěn)定性（MSS）；如果有一個(gè)標(biāo)志物或低于40%的標(biāo)志物顯示異常，則標(biāo)本被認(rèn)定為低水平微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MSI-L)；當(dāng)測試標(biāo)志物的40%或超過40%異常時(shí)，標(biāo)本被認(rèn)定為高水平微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI-H）。免疫組化檢測，建議使用PMS2、MSH6、MLH1和MSH2的抗體套餐來檢測MSI現(xiàn)象。判讀標(biāo)準(zhǔn)如下：在對照組織（即liu周圍的正常上皮細(xì)胞、liu內(nèi)浸潤的淋巴細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞均出現(xiàn)細(xì)胞核著色）中----強(qiáng)陽性表達(dá)的前提下，只要MMR蛋白在liu細(xì)胞出現(xiàn)核著色（），即判定該蛋白為陽性表達(dá)；若MMR蛋白在liu細(xì)胞未出現(xiàn)核著色現(xiàn)象（—）則視為MMR蛋白缺失[5,6]。當(dāng)四個(gè)錯(cuò)配修復(fù)蛋白均表達(dá)時(shí)，可判定為MSS；當(dāng)四個(gè)錯(cuò)配修復(fù)蛋白中只有一個(gè)發(fā)生表達(dá)缺失時(shí)，可判定為MSI-L；當(dāng)四個(gè)錯(cuò)配修復(fù)蛋白2個(gè)或以上表達(dá)缺失時(shí)，可判定為MSI-H。已確定4種MMR蛋白對MSI-H的敏感性、特異性均接近100%。4林奇綜合征（Lynch綜合征）的發(fā)病機(jī)制和臨床特征林奇綜合征是指因錯(cuò)配修復(fù)基因。青海推薦dMMR抗體檢測試劑值得推薦MSH6抗體試劑 蘇蘇械備20180569號(hào).

    與無突變的結(jié)直腸ai相比，BRAF突變型CRC患者的年齡偏大，女性居多，微衛(wèi)星不穩(wěn)定可能性大、組織級別高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率和局部晚期發(fā)生率高。術(shù)后輔助***后，BRAF突變型CRC的無病生存期更短，復(fù)發(fā)后的總生存期更差。PETACC-3研究檢測了1404例Ⅱ~Ⅲ期結(jié)腸ai患者的BRAF和KRAS突變，結(jié)果顯示，BRAF突變型患者的總生存劣于野生型患者。當(dāng)根據(jù)微衛(wèi)星不穩(wěn)定分層后，這種差異更加明顯。PETACC8和N0147試驗(yàn)的匯總分析提示W(wǎng)T組，BRAF突變組的中位SAR分別為，和，其中BRAF突變組（HR：：，P＜），提示BRAFV600E是TTR，SAR和OS的**預(yù)測因子。在以后的臨床試驗(yàn)輔助試驗(yàn)中應(yīng)將這些突變納入為重要分層因素。2.評估Lynch綜合癥Lynch綜合癥的機(jī)制通常是胚系MMR的缺失，SepulvedaAR等報(bào)道BRAFV600突變在胚系MMR缺失的患者中很少發(fā)生，但在具有表現(xiàn)得MMR缺失患者中被報(bào)道有高達(dá)3/4的患者具有BRAFV600E突變。因此BRAF突變可作為區(qū)分胚系與表現(xiàn)dMMR的手段，特別是MLH1缺失的情況下，進(jìn)一步評估Lynch綜合癥。三、MSI/MMR大量研究表明，微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）是由錯(cuò)配修復(fù)（MMR）基因發(fā)生缺陷引起的，當(dāng)錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)功能異常時(shí)，微衛(wèi)星出現(xiàn)的復(fù)制錯(cuò)誤得不到糾正并不斷累積。

    使MSI檢測的靈敏性、特異性和檢測的便利度都有了明顯進(jìn)步。3．錯(cuò)配修復(fù)蛋白免疫組織化學(xué)檢測與PCR-MSI檢測的優(yōu)缺點(diǎn)：文獻(xiàn)報(bào)道錯(cuò)配修復(fù)蛋白免疫組織化學(xué)檢測與PCR-MSI檢測結(jié)果的符合率非常高，達(dá)％，因此采用任何一種方法作為MSI-Hliu的篩查方法均可接受。相比之下，免疫組織化學(xué)法：(1)簡便、經(jīng)濟(jì)、快捷、穩(wěn)定，符合病理科日常工作流程，多數(shù)基層病理科均可開展；(2)所需組織量少，活檢標(biāo)本亦可檢測，且檢測結(jié)果與切除標(biāo)本檢測結(jié)果一致；(3)可直接提示發(fā)生缺陷的錯(cuò)配修復(fù)蛋白類型，對于后續(xù)進(jìn)行錯(cuò)配修復(fù)基因胚系突變檢測以確診Lynch綜合征有明確的指向性；(4)少數(shù)MSH6胚系突變病例的liu由于錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)的功能冗余作用可不表現(xiàn)為MSI，但免疫組織化學(xué)可檢出蛋白表達(dá)缺失，因而可彌補(bǔ)PCR-MSI檢測方法的局限性。PCR-MSI檢測雖然相對復(fù)雜，費(fèi)用相對較高，但優(yōu)點(diǎn)是直接反映liu的MSI狀態(tài)，而且對于少數(shù)錯(cuò)義突變導(dǎo)致蛋白功能異常但并不影響蛋白的轉(zhuǎn)錄和抗原性時(shí)，免疫組織化學(xué)檢測可出現(xiàn)假陽性，而PCR-MSI檢測正好可以彌補(bǔ)。四、***檢測MSI結(jié)直腸ai的必要性及推薦檢測流程區(qū)分MSI結(jié)直腸ai的臨床意義包括以下三個(gè)方面。1．提示預(yù)后：臨床研究發(fā)現(xiàn)，在Ⅱ期結(jié)直腸ai中。邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)致力于解決創(chuàng)新藥物的研發(fā)痛點(diǎn)及患者的用藥痛點(diǎn)，助力精z準(zhǔn)醫(yī)療！

    三、我國結(jié)直腸ai的篩查策略結(jié)直腸ai篩查策略包括篩查對象、篩查方法、篩查流程、篩查頻率、篩查間隔和確診后的規(guī)范***及隨訪等。各國應(yīng)根據(jù)本國國情制訂篩查策略并適時(shí)進(jìn)行更新和補(bǔ)充。依據(jù)2011年10月由中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)頒布的《中國結(jié)直腸liu篩查、早診早治和綜合預(yù)防共識(shí)意見》，我國結(jié)直腸ai篩查的策略如下：1.人群篩查：我國結(jié)直腸ai的篩查目標(biāo)人群為50～74歲者。這符合我國結(jié)直腸ai發(fā)病規(guī)律，從50歲開始明顯上升，75～80歲達(dá)到高峰，然后緩慢下降。國外相關(guān)研究結(jié)果顯示：不必將76～85歲高齡人群作為篩查目標(biāo)人群。結(jié)合我國人均壽命、結(jié)直腸ai高發(fā)年齡等國情，故將人群篩查**高年齡定位在74歲。我國人口基數(shù)較大，且結(jié)直腸ai發(fā)病率逐年上升，潛在患病人群龐大，在篩查中***應(yīng)用纖維結(jié)腸鏡，其衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)成本勢必巨大，且纖維結(jié)腸鏡為有創(chuàng)檢查，在普通人群中***應(yīng)用面臨較大的依從性問題。故我國普遍采用初步篩查發(fā)現(xiàn)高危人群，對于高危人群行全結(jié)腸鏡檢查的序貫式篩查策略。具體的篩查方法包括FOBT、基于高危因素的問卷調(diào)查、乙狀結(jié)腸鏡及全結(jié)腸鏡檢查等，篩查周期建議為3年。對符合以下任意一項(xiàng)者應(yīng)視為高危人群：(1)FOBT陽性。(2)ai癥病史。(3)息肉病史。。邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)嚴(yán)格按照IS013485標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定建立質(zhì)量體系。寧夏一體化dMMR抗體檢測試劑來電咨詢

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    SepulvedaAR等綜合眾多研究發(fā)現(xiàn)其他的RAS突變（包括KRAS3、4號(hào)外顯子及NRAS的2、3、4外顯子）的突變率約為。KRAS屬于RAS基因家族（HRAS，NRAS，KRAS）中的一員，編碼GTP/CDP結(jié)合蛋白，其作為EGFR下游信號(hào)通路的重要效應(yīng)分子，主要***RAF-MAPK通路進(jìn)行后續(xù)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，參與細(xì)胞的生長調(diào)控，在抗細(xì)胞調(diào)亡，介導(dǎo)**侵襲和轉(zhuǎn)移，乃至**引起的新血管生成中起作用。結(jié)直腸ai中約32%~40%的患者存在KRAS基因突變，存在KRAS突變的患者中約85%~90%的突變集中在第2號(hào)外顯子的12、13密碼子上，其余突變中約5%發(fā)生在61密碼子上，5%發(fā)生在146外顯子上。結(jié)腸直腸ai中KRAS基因的突變狀態(tài)對靶向***的選擇有著決定性的作用。CRYSTAL研究將西妥昔單抗聯(lián)合FOLFIRI方案化療對比單純化療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)KRAS突變狀態(tài)與***反應(yīng)率相關(guān)，在RAS野生型的患者中，聯(lián)合組與單純化療組的ORR分別為（P＜），中位PFS分別為（P＜），中位OS分別為（P＜）。而在RAS突變型的患者中，西妥昔單抗的加入并未獲得生存優(yōu)勢，聯(lián)合組與單純化療組的ORR分別為（P=），中位PFS分別為（P=），中位OS分別為（P=）。新RAS突變的患者亦是如此，西妥昔單抗的加入同樣未取得生存獲益，聯(lián)合組與單純化療組的ORR分別為（P=）。上海作用dMMR抗體檢測試劑誠信合作