吉林多組學(xué)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺鄭重承諾

  上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系還可包括進(jìn)行pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的試劑。所述“進(jìn)行pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的試劑”不包括pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的引物。上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系可為20μl，由10μl2×mastermix、上述任一所述引物組合和模板組成。2×mastermix具體可為德國qiagen公司的產(chǎn)品。所述模板具體可為濃度為1ng/μl的標(biāo)準(zhǔn)品2800m的水溶液或樣品的基因組dna。所述樣品可為人口腔拭子。所述標(biāo)準(zhǔn)品2800m具體可為promega公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為dd7251。含有上述任一所述引物組合的試劑盒也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍；所述試劑盒的用途可為(h1)-(h5)中的至少一種：(h1)str分型；(h2)y-str分型；(h3)個(gè)體識別；(h4)親權(quán)鑒定；(h5)種族推斷。本發(fā)明還保護(hù)上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系或上述任一所述試劑盒的制備方法；該制備方法包括將上述任一所述引物組合中的各條引物單獨(dú)包裝的步驟。本發(fā)明還保護(hù)上述任一所述引物組合或上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系在制備試劑盒中的應(yīng)用；所述試劑盒的用途可為(h1)-(h5)中的至少一種：?！具~杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)】開發(fā)的dMMR抗體檢測試劑,檢測費(fèi)用低,技術(shù)成熟,臨床易開展。吉林多組學(xué)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺鄭重承諾

    細(xì)胞鑒定：表面標(biāo)志物鑒定（流式細(xì)胞術(shù)），分化能力鑒定（間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化、間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化、間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化），核型分析；細(xì)胞轉(zhuǎn)染：慢病毒、腺相關(guān)病毒、腺病毒、質(zhì)粒、microRNA、lncRNA等轉(zhuǎn)染服務(wù)；免疫學(xué)分析：免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光、激光共聚焦、westernblot、Co-IP、ELISA等；分子技術(shù)：qPCR、PCR、***定量PCR等。關(guān)鍵詞：人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞、人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞、人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞、人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、犬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)、原代細(xì)胞弗元生物，中國自己的生物品牌。吉林多組學(xué)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺鄭重承諾邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)有多年的藥企服務(wù)經(jīng)驗(yàn)，緊跟藥物研發(fā)趨勢，熟悉新藥研發(fā)動(dòng)向。

    吸棄上清。f.每孔加入100uL80％乙醇，靜置30秒，吸棄上清。重復(fù)一遍。短時(shí)離心，吸棄上清。g.晾干3-5分鐘，觀察磁珠表面不再潮濕反光，成霧面狀，可離開磁力架，每孔加入30uLNFW，吹打混勻重懸磁珠，室溫孵育1分鐘。h.孔板再次放上磁力架，等待2分鐘，溶液澄清后，轉(zhuǎn)移上清到新的孔板中。實(shí)施例3.多重PCR一、***輪多重PCRa.按照QubitdsDNAHSAssayKit操作手冊檢測樣品濃度，根據(jù)Qubit檢測的樣本濃度，每個(gè)樣品取同樣的量(10ng)，每5～10個(gè)樣本混合在一起轉(zhuǎn)移到新的孔板中。b.***輪特異性引物是普通的PCR擴(kuò)增引物，共20個(gè)左右的堿基，Tm值設(shè)定在60℃，序列根據(jù)目標(biāo)區(qū)域設(shè)計(jì)得到，多個(gè)引物混成一個(gè)OP引物池做為***輪PCR的上游引物。配置PCR總體系,按照理論值的125％配，震蕩混勻，短時(shí)離心。c.孔板放入PCR儀中，選擇MAPlex-1st程序運(yùn)行2個(gè)小時(shí)。二、PCR產(chǎn)物純化，取下孔板，打開蓋子，每孔加入60uL的磁珠，吹打混勻，室溫下孵育5分鐘。b.將孔板或八聯(lián)管放上磁力架，等待2分鐘，溶液澄清后，吸棄上清。c.每孔加入100uL80％乙醇，靜置30秒，吸棄上清。重復(fù)一遍。d.晾干3-5分鐘，觀察磁珠表面不再潮濕反光，成霧面狀，可離開磁力架，每孔加入20uLNFW，吹打混勻重懸磁珠。

    圖7IHC檢測FGF-19過表達(dá)（左：正常膽囊組織(陽性對照)；右：肝細(xì)胞*組織(弱陽性)）??方案4：RNAscope法評估FGFR1/2/3/4的mRNA表達(dá)水平此外，RNAscope在細(xì)胞原位評估m(xù)RNAs水平方面，能夠更直接精細(xì)地確定基因的擴(kuò)增狀況。邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)在數(shù)字病理平臺上已經(jīng)建立了檢測FGFR過表達(dá)的RNAscope的方法，可以原位檢測FGFR1-4mRNAs表達(dá)水平，為FGFR抑制劑的生物標(biāo)志物檢測和研究提供了更多可能（圖8）。圖8RNAscope檢測肺*總FGFR1/2/3/4的mRNA表達(dá)水平除以上示范，邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)還可提供其他類型（如PD/PK生物標(biāo)志物）解決方案并已有相關(guān)經(jīng)驗(yàn)（表7）。References:[1]HelstenT,ElkinS,ArthurE,[J].ClinicalCancerResearchAnOfficialJournaloftheAmericanAssociationforCancerResearch,2016,22(1):259.[2]TurnerN,.[J].NatureReviewsCancer,2010,10(2):116-129.[3]PetersKG,MarieJ,WilsonE,[J].Nature,1992,358(6388):678-681.[4]KangS,ElfS,DongS,.[J].MolecularandCellularBiology,2009,29(8):2105-2117.[5]BabinaIS,[J].NatureReviewsCancer,2017,17(5):318.[6]NataliaPor?bska,Marta,.[J].JournalofClinicalMedicine。 邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)為全球合作伙伴提供包括生物標(biāo)記物挖掘、藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證、伴隨診斷開發(fā)等一體化解決方案。

    h1)str分型；(h2)y-str分型；(h3)個(gè)體識別；(h4)親權(quán)鑒定；(h5)種族推斷。本發(fā)明還保護(hù)上述任一所述引物組合或上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系的應(yīng)用，可為(h1)-(h5)中的至少一種：(h1)str分型；(h2)y-str分型；(h3)個(gè)體識別；(h4)親權(quán)鑒定；(h5)種族推斷。上述任一所述68個(gè)基因座具體可由amelogenin、dys19、dys385a/b、dyf387s1a/b、dys388、dys389-i、dys389-ii、dys390、dys391、dys392、dys393、dyf399s1、dyf404s1a/b、dys437、dys438、dys439、dys443、dys444、dys446、dys447、dys448、dys449、dys456、dys458、dys459a/b、dys460、dys481、dys485、dys504、dys505、dys508、dys510、dys518、dys520、dys522、dys527a/b、dys531、dys533、dys549、dys552、dys557、dys570、dys576、dys587、dys593、dys596、dys612、dys617、dys622、dys626、dys627、dys630、dys635、dys641、dys643、dys644、dys645、dys710、dys720、y-gata-a10和y-gata-h4組成。其中，amelogenin為性別決定基因座。dyf399s1包含三個(gè)分型片段。dys385a/b、dyf387s1a/b、dyf404s1a/b、dys459a/b和dys527a/b均包含兩個(gè)分型片段。本發(fā)明提供的試劑盒可以檢測68個(gè)基因座。 邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)擁有豐富的伴隨診斷開發(fā)經(jīng)驗(yàn)，高質(zhì)量的管理體系和高素質(zhì)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)。北京提供邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺技術(shù)指導(dǎo)

邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)開發(fā)的伴隨診斷試劑盒,基因突變檢測試劑盒,檢測范圍全。吉林多組學(xué)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺鄭重承諾

    pcrpurificationkit為德國qiagen公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為y5-28006。。qubittmdsdnahsassaykit為thermofisher公司的產(chǎn)品，貨號為q32854。truseqdnapcr-freehtlibraryprepkit為illumina公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為fc-121-3003。kapalibraryquantificationkit為kapa公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為kk4824。miseqreagentkitv3-600cycles測序試劑為illumina公司的產(chǎn)品，貨號為ms-102-3003。miseqfgx二代測序儀為illumina公司的產(chǎn)品。實(shí)施例1、基于二代測序技術(shù)檢測68個(gè)基因座的試劑盒的制備一、68個(gè)基因座的篩選本發(fā)明的發(fā)明人通過查閱文獻(xiàn)和現(xiàn)有二代測序str分型產(chǎn)品獲得大量候選的y-str基因座，然后根據(jù)中國人群str群體遺傳多態(tài)性分析結(jié)果，**終篩選獲得68個(gè)基因座，包括67個(gè)y-str基因座和1個(gè)性別決定amelogenin基因座。 吉林多組學(xué)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺鄭重承諾