遼寧作用dMMR抗體檢測試劑共同合作

    1：1000稀釋)4℃孵育過夜。用tbs-t洗膜后，加入1：5000稀釋的羊抗鼠二抗，室溫孵育1小時。再次tbst洗膜，加入ecl超敏顯色液(北京普利萊基因技術有限公司)，以chemidocmp多色熒光成像系統(tǒng)(bio-rad)進行化學發(fā)光圖像數(shù)據(jù)的采集。實施例5組織芯片染色和鑒定一、芯片制備過程對各樣本先進行he切片染色，以確定liu部位。對liu靶位點畫圈，預備打孔。制作空白受體蠟塊時，將塑料架置于模具上，將融化的石蠟(熔點在55～58℃)倒入模具，冷卻至室溫后將模具放入-20℃冰箱6min，將蠟塊從模具中取出。在組織樣品機上選擇1mm直徑的樣品針在受體蠟塊上打孔，孔深3～4mm，用另一直徑1mm的打孔針在蠟塊的標記部位打孔采集組織芯，其長度比受體蠟塊的孔深淺。將采集到的組織芯直接插入或用鑷子小心夾取插入受體蠟塊的空孔內。如此反復直至完成全部樣品點的制備。***用載玻片將所有組織芯按平，使組織芯片蠟塊平坦光滑。將制成的組織芯片蠟塊再放入蠟塊制作模具，放入60℃烤箱內15min，使組織芯與受體臘塊的蠟融為一體，然后輕輕從烤箱中取出模具，讓半融狀態(tài)的石蠟在室溫條件下冷卻約30min，再放入-20℃冰箱冷凍6min后將組織芯片蠟塊從模具中取出?！具~杰轉化醫(yī)學】開發(fā)的dMMR抗體檢測試劑,檢測費用低,技術成熟,臨床易開展。遼寧作用dMMR抗體檢測試劑共同合作

    除非整個家族的結直腸ai發(fā)病率明顯上升，否則很難發(fā)現(xiàn)單個個體攜帶者。因此，從MSI-H結直腸ai中篩選出可疑的Lynch綜合征患者，不*有利于患者本人的liu***和預防篩查策略的制定，而且有利于發(fā)現(xiàn)Lynch綜合征家系，為患者家族成員的liu預防提供重要信息。與以往以家系調查和臨床信息為主導的篩查方法比，采用分子檢測等輔助手段對本病進行篩查不*準確且更高效和可行。研究表明，如果嚴格按照修訂的Bethesda指南進行MSI檢測，將遺漏％的MSI結直腸ai和％的Lynch綜合征。因此，E***P工作組(EvaluationofGenomicApplicationsinPracticeandPreventionWorkingGroup)推薦對所有(或<70歲)的新診斷所有(或<70歲)的新診斷結直腸ai結直腸ai進行MSI檢測(圖4)。五、小結與展望MSI結直腸ai占結直腸ai的15％，因其具有獨特的發(fā)生機制、預后、***方案以及與Lynch綜合征的密切關系而日益得到重視。目前，國際上很多大型醫(yī)院和liu***中心均已開始采取對所有新診斷的結直腸ai進行MSI和／或免疫組織化學檢測的策略，有的機構甚至開始對所有新診斷的子宮內膜ai也進行***檢測。我國結直腸發(fā)病率持續(xù)上升，但對MSIliu和Lynch綜合征進行篩查的觀念尚待普及。分子機制的研究進展和檢測手段的進步。北京dMMR抗體檢測試劑創(chuàng)新服務邁杰轉化醫(yī)學同時擁有符合GMP和ISO 13485的要求的GMP生產(chǎn)車間及倉儲，可以充分滿足客戶的需求。

    RAF***對多種**的發(fā)生、發(fā)展產(chǎn)生重要影響，RAF突變以BRAF常見，BRAF是RAS-RAF-MAPK信號通路的重要基因，BRAF突變常見于V600E位點，其在結腸ai的突變率為。BRAF突變的ai癥患者中右半結腸ai占95%，在BRAF野生型的ai癥患者中右半結腸ai患者占48%。研究發(fā)現(xiàn)在右半結腸aiBRAF突變率為，左半結腸ai、直腸ai的突變率分別為、。BRAF突變與右半結腸ai相關，并且BRAF基因突變和位置有***的線性相關關系，隨著**位置由升結腸移至直腸，BRAF的突變率由40%降至不到。2.預測EGFR***作用NicolantonioF等人對113例Cetuximab耐藥的轉移性結腸ai患者進行了檢測，發(fā)現(xiàn)對這兩種藥物耐受的患者，有30%~40%存在KRAS突變，而野生型的KRAS患者中有14%發(fā)生BRAFV600E突變。BRAF突變者對這兩種藥存在耐藥，且生存率較其它患者明顯降低。但一項關于CRYSTAL和OPUS試驗的meta分析發(fā)現(xiàn)BRAF突變似乎不影響西妥昔單抗的療效，**是一個重要的預后指標。3.預測預后無論是早期還是晚期轉移CRC，BRAF突變狀態(tài)都是較強的生存預測因素，與KRAS基因突變相比，BRAF基因突變常見于尚未發(fā)生遠處轉移的結腸ai，以Ⅱ、Ⅲ期CRC患者多見，BRAF突變型CRC的惡性程度高、淋巴結轉移率和局部晚期發(fā)生率高。

dMMR 是 MMR 表達缺失，pMMR 是 MMR 表達正常。dMMR 表現(xiàn)為高頻度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-H）， pMMR 表現(xiàn)為低頻度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-L）或微衛(wèi)星穩(wěn)定（MS-S）。 目前，*常用的篩查結直腸ai MMR 表達有無缺失的方法有 2 種：免疫組化檢測 MMR 相關蛋白的表達，以及 PCR 檢測多個微衛(wèi)星位點以判斷有否存在 MSI。

下面重點來了： 免疫組化：有缺失，dMMR；無缺失，pMMR 免疫組化主要檢測ai組織中 MLH1，PMS2，MSH2 及 MSH6 這 4 種蛋白的表達： 

1. 若結果顯示任一蛋白完全缺失，則判讀為  dMMR； 

2. 若顯示無蛋白缺失，則判度為 pMMR。 所以回到上面的病例： MLH1，PMS2，MSH2 及 MSH6 蛋白均未缺失，應判讀為 pMMR，可以用單藥 5-Fu 進行輔助化療。 PCR 檢測：≥40%，MSI-H；<40%，MSI-L/MS-S MSI 的分類是基于不同單核或雙核苷酸重復序列的改變（如： BAT25、 BAT26、 D5S346、 D2S123 和 D17S250，即 Bethesda 標準微衛(wèi)星位點）。 邁杰轉化醫(yī)學具備從樣本制備到H&E，IHC、FISH、RNAscope及多重免疫組化等全套組織病理和分子病理檢測能力。

dMMR（MSH6/MLH1/PMS2/MSH2）抗體檢測試劑錯配修復〈MismatchRepair,MMR)發(fā)生于DNA復制、重組及損傷修復過程，能夠識別和修復錯誤的插入、缺失和整合。人體內常見的4種錯配修復蛋白，即hMLH1、hMSH2、hMSH6、hPMS2協(xié)同發(fā)揮DNA錯配修復功能。MMR系統(tǒng)任何一種蛋白缺失，都會導致DNA錯配修復功能缺陷(MismatchRepairDeficiency,dMMR)，產(chǎn)生復制錯誤或微衛(wèi)顯不穩(wěn)定(MicrosatelliteInstability,MSI)，進而誘導liu發(fā)生。

邁杰轉化醫(yī)學的dMMR抗體檢測試劑采用免疫組織化學法（IHC）檢測liu組織中MLH1、MSH2、MSH6和、PMS2四種蛋白的表達。

備案號

PMS2抗體試劑蘇蘇械備20180570號

MSH6抗體試劑蘇蘇械備20180569號

MSH2抗體試劑蘇蘇械備20180568號

MLH1抗體試劑蘇蘇械備20180519號

產(chǎn)品特點**使用北歐免疫組化質控中心NordiQC推薦的IHC抗體組合。精確經(jīng)多平臺平行驗證（MSI-PCR、MSI-NGS)，一致性高，特異性好普適覆蓋多個主流IHC自動染色平臺，適用范圍廣便捷方法簡單易行，醫(yī)保覆蓋。 邁杰轉化醫(yī)學可以提供覆蓋肺ai、腸ai、肝ai、胃ai、乳腺ai、前列腺ai等多種實體瘤的上百項檢測項目。北京dMMR抗體檢測試劑創(chuàng)新服務

邁杰dMMR抗體檢測試劑采用免疫組織化學法（IHC）檢測組織中MLH1、MSH2、MSH6 和、PMS2 四種蛋白的表達!遼寧作用dMMR抗體檢測試劑共同合作

    當liu細胞出現(xiàn)一種或幾種錯配修復蛋白核表達的丟失，則提示liu為MSI-H。MLH1和MSH2作為錯配修復復合體的共用亞單位，在發(fā)生功能缺陷時常同時伴有其同源錯配修復蛋白的表達缺失。另外，如前所述，部分Lynch綜合征是由于EpCAM基因胚系突變導致下游MSH2基因功能缺陷所致。Musulen等發(fā)現(xiàn)，在MSH2表達缺失的liu中檢測出EpCAM蛋白缺失，與EpCAM基因突變的吻合率達100％，所以推薦將EpCAM免疫組織化學檢測加入到Lynch綜合征的篩查流程中。日常工作中用于鑒別肺腺ai與惡性間皮瘤的抗體Ber-EP4即是檢測EpCAM的常用克隆之一。免疫組織化學檢查錯配修復蛋白表達缺失的作用如下：(1)提示哪個錯配修復基因發(fā)生了功能缺失(表1)；(2)與MLH1啟動子甲基化檢測和／或BRAFV600E突變檢測結合，區(qū)分散發(fā)性MSI-H結直腸ai和可疑Lynch綜合征患者；(3)與EpCAM免疫組織化學檢查結合，為后續(xù)的Lynch綜合征遺傳學突變檢測提示方向。目前，4種主要的錯配修復蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2均已有穩(wěn)定的商品化抗體，但受組織固定、染色條件、抗體克隆號不同等因素的影響，可能會出現(xiàn)假陽性或假陰性結果。在判讀免疫組織化學染色結果時應注意：(1)內對照是否陽性；(2)著色部位是否為細胞核；。遼寧作用dMMR抗體檢測試劑共同合作