病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)有哪些?病毒基因組大小相差較大。病毒基因組可以由DNA組成,也可以由RNA組成。多數(shù)RNA病毒的基因組是由連續(xù)的核糖核酸鏈組成,還沒有發(fā)現(xiàn)有節(jié)段性的DNA分子構(gòu)成的病毒基因組。病毒基因組的大部分是用來編碼蛋白質(zhì)的。病毒基因組DNA序列能上相關(guān)的蛋白質(zhì)的基因或rRNA的基因往往叢集在基因組的一個或幾個特定的部位,形成一個功能單位或轉(zhuǎn)錄單元。除了反轉(zhuǎn)錄病毒以外一切病毒基因組都是單倍體,每個基因在病毒顆粒中只出現(xiàn)一次。噬菌體(細(xì)菌病毒)的基因是連續(xù)的;而真核細(xì)胞病毒的基因是不連續(xù)的,具有內(nèi)含子。二代測序可以用于對病毒的全基因組進(jìn)行測序有哪些挑戰(zhàn)?RNA病毒二代測序突變分析公司
探普生物對病毒的全基因組進(jìn)行測序的實(shí)驗(yàn)基于二代測序技術(shù)。樣本經(jīng)過核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這3大基本流程后轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先,在核酸純化環(huán)節(jié),探普提供專門針對性的核酸純化樣本指南,以提高目的物種的核酸純度和得率,與此同時探普生物也提供核酸純化服務(wù)。第二,文庫構(gòu)建環(huán)節(jié),樣本的核酸具備濃度低,總量少的特點(diǎn)。探普生物專門針對這一點(diǎn)開發(fā)了超微量核酸文庫構(gòu)建,可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測序文庫。第三,生物信息學(xué)分析環(huán)節(jié)。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對病毒的全基因組進(jìn)行測序的下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點(diǎn),優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,搭載了的生物信息學(xué)分析流程,可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。病毒序列測序突變分析診斷病毒全基因組測序要注意什么?
哪些應(yīng)用場景需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序呢?在探普生物長時間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對病毒的全基因組進(jìn)行測序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時省力省經(jīng)費(fèi),同時能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測疫病的目的。
高通量測序在病毒準(zhǔn)種研究中如何應(yīng)用在采用高通量測序技術(shù)研究準(zhǔn)種耐藥性方面,人類免疫缺陷病毒(HIV)較為突出。人類免疫缺陷病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶有非常大的錯配傾向,造成幾乎每復(fù)制1輪出現(xiàn)1個堿基對替換突變。被侵染的個體中存在非常巨大的病毒群,每天有1010個病毒粒子產(chǎn)生和死亡,在侵染后這種行為導(dǎo)致病毒快速形成一個多樣性的群,即準(zhǔn)種。高通量測序是研究大群體中序列突變體特征的先進(jìn)方法,它的一種應(yīng)用是對個體抗病毒治療失敗時產(chǎn)生的數(shù)量很少的耐藥突變的定量研究。病毒全基因組測序產(chǎn)品特點(diǎn):病原診斷更準(zhǔn)確。
病毒全基因組測序,基因測序技術(shù)能鎖定個人病變基因,提前預(yù)防和調(diào)整。自上世紀(jì)90年代初,學(xué)界開始涉足“人類基因組計(jì)劃”。而傳統(tǒng)的測序方式是利用光學(xué)測序技術(shù)。用不同顏色的熒光標(biāo)記四種不同的堿基,然后用激光光源去捕捉熒光信號從而獲得待測基因的序列信息。雖然這種方法檢測可靠,但是價格不菲也是有目共睹的,一臺儀器的價格大約在50萬到75萬美元,而檢測一次的費(fèi)用也高達(dá)5千到1萬美元。新的基因測序儀中,芯片代替了傳統(tǒng)激光鏡頭、熒光染色劑等,芯片就是測序儀。病毒株往往都需要獲得盡量完整的基因組序列來指導(dǎo)下一步的研究。武漢病毒全序列測序服務(wù)
病原學(xué)的診斷始終是傳染性疾病診斷的重要一環(huán)。RNA病毒二代測序突變分析公司
目前對我國首例輸入性裂谷熱病例病毒進(jìn)行全基因組測定,分析其進(jìn)化來源及潛在變異.方法提取樣本核酸,非特異性反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增病毒基因組RNA,使用IonTorrent二代測序儀進(jìn)行病毒全基因組測定.對獲得的基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行序列拼接、比對、進(jìn)化樹構(gòu)建和關(guān)鍵位點(diǎn)分析.結(jié)果通過測定獲得了病毒全基因組11979nt,該測定病毒屬E基因分支,序列與先前南非分離株Kakamas相似度較高(>98%).病毒Gn蛋白C端信號肽區(qū)存在1個氨基酸突變.結(jié)論本研究分析測定的裂谷熱病毒全基因組與目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出現(xiàn)明顯變異。RNA病毒二代測序突變分析公司