高靈敏度與特異性該試劑采用熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合抗體封閉技術(shù),有效避免了低溫條件下的非特異性擴增,提高了反應(yīng)的特異性和靈敏度。探針法qPCR通過熒光探針與目標(biāo)基因的特異性結(jié)合,避免了非特異性產(chǎn)物的干擾,檢測靈敏度和特異性高于傳統(tǒng)的SYBR Green方法。低濃度ROX校正染料試劑中含有低濃度ROX作為被動參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號的差異,減少因移液誤差或樣品蒸發(fā)等因素引起的熒光波動,確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性。UDG防污染系統(tǒng)內(nèi)置UDG(Uracil-DNA Glycosylase)防污染系統(tǒng),通過降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止了實驗室中殘留的PCR產(chǎn)物對實驗結(jié)果的干擾,避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)??焖贁U增與多重檢測優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速擴增程序,可在短時間內(nèi)完成高靈敏度檢測,同時適用于多重PCR檢測,可在單個反應(yīng)孔中同時檢測多個基因。適用性該試劑適用于多種樣本類型,包括cDNA、基因組DNA等,尤其適合低豐度基因的定量檢測,如低表達的mRNA、lncRNA、小RNA等。Phusion DNA Polymerase 應(yīng)在后面加入反應(yīng)體系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。Fibronectin CS1 Peptide
牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)與細菌DNA拓撲異構(gòu)酶的主要區(qū)別如下:1.**來源不同**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I來源于牛痘病毒,是一種真核生物病毒中的酶。-細菌DNA拓撲異構(gòu)酶則來源于原核生物,如大腸桿菌的ω蛋白等。2.**功能特性**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I能夠解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu),并且識別并切割雙鏈DNA末端[5’C(T)CCTT],與DNA形成共價連接形成穩(wěn)定復(fù)合物,遇到DNA的5’-OH基團后,重新連接形成完整DNA鏈。-細菌DNA拓撲異構(gòu)酶,如大腸桿菌的ω蛋白,主要功能是催化DNA鏈斷開和結(jié)合的偶聯(lián)反應(yīng),以改變DNA的拓撲結(jié)構(gòu)。3.**活性條件**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I即使在Mg2+不存在的條件下也顯示活性。-細菌DNA拓撲異構(gòu)酶可能需要Mg2+等金屬離子作為輔因子來發(fā)揮活性。4.**作用的DNA鏈**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I能使正負兩方的超螺旋分子均形成松散型。-原核生物由來的DNA拓撲異構(gòu)酶I只作用負鏈的超螺旋分子。5.**共價鍵形成**:-牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I與DNA形成共價連接,此酯鍵中所貯存的能量可能在切斷端的再結(jié)合上起著作用。-細菌DNA拓撲異構(gòu)酶在原核生物中是游離型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端與酶形成共價鍵。
DNA Marker I plusTn5轉(zhuǎn)座酶高通量測序建庫、ATAC-seq 等多種先進的分子生物學(xué)技術(shù),能夠與這些技術(shù)很好地結(jié)合。
高密度設(shè)計,確保樣品沉降6×DNALoadingBuffer是一種六倍濃縮的上樣緩沖液,其主要成分包括甘油或蔗糖等高密度物質(zhì)。這些成分能夠增加樣品的密度,使DNA樣品在加樣后能夠迅速沉入瓊脂糖凝膠的加樣孔底部,避免樣品漂浮,從而確保電泳過程的順利進行。雙色指示劑,直觀監(jiān)控電泳進程該緩沖液通常含有兩種示蹤染料——溴酚藍和二甲苯青。溴酚藍的遷移速度接近300bp的雙鏈DNA,而二甲苯青的遷移速度則接近4-5kb的雙鏈DNA。通過觀察這兩種染料的遷移情況,研究人員可以直觀地判斷電泳的進程,從而避免電泳時間過長或不足。穩(wěn)定樣品,防止降解6×DNALoadingBuffer中還含有EDTA等成分,能夠螯合鎂離子,防止核酸酶對DNA的降解,從而保護DNA樣品的完整性。此外,其配方優(yōu)化后,能夠在電泳過程中維持DNA的穩(wěn)定狀態(tài),確保電泳結(jié)果的可靠性。兼容性強,適用范圍廣6×DNALoadingBuffer適用于多種類型的核酸電泳,包括瓊脂糖凝膠電泳和非變性丙烯酰胺凝膠電泳。其優(yōu)化的配方使其在不同濃度的瓊脂糖凝膠中均能表現(xiàn)出良好的性能,且與常見的電泳緩沖液(如TAE和TBE)完全兼容。
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問題一直是影響實驗準確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對單鏈和雙鏈DNA均有效,但對RNA或長度不超過6個堿基的DNA寡核苷酸無活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價陽離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對高離子強度(>200mM)敏感,因此在使用時需注意反應(yīng)體系的離子濃度。Pfu DNA Polymerase的突變體研究:通過研究Pfu DNA Polymerase的突變體,可進一步優(yōu)化其性能和應(yīng)用范圍。
蛋白A-微球菌核酸酶(pA-MNase)是一種特殊的融合蛋白,它結(jié)合了蛋白A和微球菌核酸酶(MNase,MicrococcalNuclease)的特性。以下是pA-MNase的一些關(guān)鍵特點和應(yīng)用:1.**融合表達產(chǎn)物**:pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達產(chǎn)物,因此它同時具有ProteinA的抗體結(jié)合活性和MNase的核酸內(nèi)切酶活性。2.**雙重功能**:由于其雙重功能,pA-MNase常用于蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究,特別是在ChIC(ChromatinImmunocleavage)和CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)技術(shù)中。3.**ProteinA的特性**:ProteinA是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的細胞壁表面蛋白,分子量為42kDa,能特異性地與哺乳動物免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)結(jié)合,通常結(jié)合部位為免疫球蛋白的Fc區(qū)。4.**微球菌核酸酶(MNase)的特性**:MNase是一種核酸內(nèi)切酶,能夠降解核酸,常用于降解蛋白質(zhì)制備中存在的核酸,減少細胞裂解液的粘度,以及用于染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析和快速RNA測序。5.**反應(yīng)條件**:MNase的反應(yīng)條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer,需要補充100μg/ml重組白蛋白,分子生物學(xué)級,并在37°C下孵化。FnCas12a可以識別不同的PAM序列,例如5'-TTN-3',這增加了它可以靶向的基因組區(qū)域 。Recombinant Mouse CD164 Protein,hFc Tag
牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I是TOPO克隆技術(shù)的關(guān)鍵組分,該技術(shù)允許快速、簡便地將PCR產(chǎn)物克隆到質(zhì)粒載體中。Fibronectin CS1 Peptide
Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease,簡稱λExonuclease)是一種具有特定特性和應(yīng)用的酶,以下是其主要特點和應(yīng)用:1.**特異性作用**:λExonuclease是一種5'→3'核酸外切酶,能選擇性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的雙鏈DNA。2.**酶切活性**:對單鏈DNA和5'端未磷酸化修飾的DNA的酶切活性較低,不能從DNA的切刻或缺口處起始消化。3.**嗜磷酸性**:該酶具有非常強的嗜磷酸性,磷酸化的核酸鏈與非磷酸化的核酸鏈的切割效率相差達200倍以上。4.**切割效率**:Lambda核酸外切酶是一種具有高度持續(xù)性的堿性核酸外切酶,可以連續(xù)地將核酸切割成為單個堿基,切割比較高速率可以達到1000nt/S。5.**應(yīng)用領(lǐng)域**:-生成單鏈PCR產(chǎn)物用于DNA測序。-DNA單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)分析。-滾環(huán)擴增。-從雙鏈DNA片段生成單鏈DNA。-PCR產(chǎn)物的克隆。-質(zhì)粒制備凈化。6.**酶活性定義**:Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoproduce10nmolofacid-solubledeoxyribonucleotidefromdouble-strandedsubstrateinatotalreactionvolumeof50μlin30minutesat37oCin1XLambdaExonucleaseReactionBufferwith1μgsonicatedduplex[3H]-DNA。Fibronectin CS1 Peptide