青海歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組有什么用

來源: 發(fā)布時間:2021-12-01

人類細胞圖譜項目的主要目標之一是描述所有細胞類型的空間關(guān)系。同時基于表達特征對多種細胞類型進行空間映射,有助于研究不同細胞類型之間的相互作用。已經(jīng)發(fā)展了一些策略來檢測單細胞分辨率的空間基因表達譜,如Slide-seq、seqFISH或MERFISH。為了更有效地為研究群體探索空間基因表達數(shù)據(jù),我們構(gòu)建了SpatialDB數(shù)據(jù)庫用于空間解析的轉(zhuǎn)錄組。

人類細胞圖譜項目極大地推動了單細胞水平的生命科學研究??臻g轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)的發(fā)展和空間基因表達數(shù)據(jù)的快速積累是未來的發(fā)展趨勢。我們將繼續(xù)收集新的技術(shù)和數(shù)據(jù)集來更新SpatialDB。此外,我們將整合更多的工具和數(shù)據(jù)源來分析數(shù)據(jù). 10X Visium空間轉(zhuǎn)錄組的實驗主要分為兩部分:組織學板塊和組學板塊。青海歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組有什么用

 空間轉(zhuǎn)錄組學(ST)是一種方法,允許在組織樣本中可視化和定量分析轉(zhuǎn)錄組與空間分辨率。通過在載玻片上排列含有位置條形碼的寡核苷酸的組織切片,該方法聲稱可以生成具有精確位置信息的高質(zhì)量的RNA-seq cDNA文庫。條形碼芯片有1007個帶有獨特條形碼序列的引物位點。每個位置都有一個直徑100μm(對應于一個組織域)中心到中心的距離是200μm。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,在空間轉(zhuǎn)錄組樣本處理、實驗和數(shù)據(jù)挖掘上的成功經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務,助力各位科研工作者取得新的突破。山東歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域研究通過對 ALS 小鼠疾病進程(癥狀前、發(fā)病、癥狀期和終末期)的脊髓組織進行空間轉(zhuǎn)錄組測序。

空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析的是根據(jù)每個芯片上每個 spot 的基因表達信息進行聚類,然后將 spot 根據(jù)坐標位置序列放回到組織的圖像上,同時可以對每個 gene 在組織上表達的空間位置進行定位。獲得測序數(shù)據(jù)后,首先利用 Space Ranger  軟件可以自動化的對圖像進行處理、數(shù)據(jù)比對和 Barcode 處理。另外一個軟件 Loupe Cell Browser 是一個適用于 Windows 和 MacOS 的桌面應用程序,它可以快速、輕松地可視化和分析10X Visium 數(shù)據(jù)。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務,助力各位科研工作者取得新的突破。

廣義上來說,目前一共有4種解析“空間性轉(zhuǎn)錄組”的策略:2.第一種是利用計算機算法,根據(jù)單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)來模擬重構(gòu)組織的空間形態(tài)。例如Seurat,這是一個在單細胞數(shù)據(jù)分析中***用到的R包,我們可以利用scRNA-seq數(shù)據(jù),加上對markegene進行原位測序的結(jié)果來重構(gòu)組織的空間信息。3.第二種,激光顯微切割+二代測序(LCM+NGS)。這種技術(shù)對儀器和實驗人員的操作要求較高,而且獲取的通量也比較低,如果組織非常珍貴或者研究的內(nèi)容十分精細,可以考慮這個。但是這種策略比較難被官方干運用。4.第三種策略,就是基于高分辨圖像的原位測序。**經(jīng)典的是smFISH當然,這種方法的通量比較低。當然隨著技術(shù)的發(fā)現(xiàn),剛發(fā)布的FISH-seq技術(shù)通過多輪雜交的方式,已經(jīng)把測序通量提高到了10000+個轉(zhuǎn)錄本。5.***就是“基于空間條形碼(spatialbarcodes)的空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)。本文主要討論的也就是這種技術(shù)。后面主要討論的都是基于這種策略。 空間轉(zhuǎn)錄組是在組織原位檢測基因表達的一種技術(shù)。

Visium空間轉(zhuǎn)錄組能夠做何種組織類型以及推薦切片厚度是什么?10X Genomics測試過很多組織類型,絕大多數(shù)都可以用于空間轉(zhuǎn)錄組的分析。下圖是他們官網(wǎng)上測試過的組織類型的列表,測試過的組織都可以運用在空間轉(zhuǎn)錄組的分析上面。但建議用戶用基因表達玻片做正式實驗前,務必用組織優(yōu)化的玻片測試一下,看組織能否用于空間轉(zhuǎn)錄組的實驗,同時也找到比較好的組織通透時間。切片厚度基本上以10μm為主,但也有少量組織例外。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務,助力各位科研工作者取得新的突破。只聽名字就想嘗試,不清楚空間轉(zhuǎn)錄組的原理及通過該技術(shù)究竟能拿到什么結(jié)果。湖南10x空間轉(zhuǎn)錄組

對于 EDA 以外的任務,用戶仍然經(jīng)常需要學習新的語法,轉(zhuǎn)換對象類型,空間轉(zhuǎn)錄組學仍然面臨許多挑戰(zhàn)。青海歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組有什么用

1. 空間轉(zhuǎn)錄組實驗步驟A。切片制備和優(yōu)化:取新鮮組織、冷凍、切片,并進行HE染色成像,優(yōu)化確定切片是否覆蓋靶向區(qū)域??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟B。切片固定和透化:將組織切片放置在含有與RNA結(jié)合捕獲探針的載玻片上,并進行固定和透化,使細胞中的 mRNA 得到釋放,并結(jié)合到相應的捕獲探針上,從而獲取基因表達信息??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟c。逆轉(zhuǎn)和文庫構(gòu)建:以捕獲的 RNA 為模板,進行 cDNA 合成,和測序文庫制備??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟d。高通量上機測序:對制備好的測序文庫,進行二代高通量短讀長測序??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟e。數(shù)據(jù)可視化分析:結(jié)合HE結(jié)果,確定哪些基因有表達,表達量高低,以及這些基因的空間位置信息。青海歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組有什么用

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