湖北空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域

來源: 發(fā)布時間:2021-11-30

如果只是通過空間轉(zhuǎn)錄組或者單細胞轉(zhuǎn)錄組,研究人員在兩個樣本中均可以發(fā)現(xiàn)淋巴細胞相關(guān)基因或者淋巴細胞群,無法解釋兩個樣本預后之間的差異。但是通過空間轉(zhuǎn)錄組,就能很清晰看到兩個樣本之間的差異。作者借助空間轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)探究人類心臟在發(fā)育過程中的基因表達特征和細胞圖譜變化,發(fā)現(xiàn)對于每個發(fā)育階段的不同解剖區(qū)域,都有獨特的基因表達特征。結(jié)合單細胞轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù),作者進一步確定和豐富了胚胎心臟基因表達的空間注釋信息。 10x? Genomics空間轉(zhuǎn)錄組用于文庫構(gòu)建的每張載玻片上有四個捕獲區(qū)域,每個捕獲區(qū)域的大小為6.5x6.5mm。湖北空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域

空間轉(zhuǎn)錄組是在組織原位檢測基因表達的一種技術(shù),與bulk RNA-seq或單細胞轉(zhuǎn)錄組測序相比,空間轉(zhuǎn)錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失,使得我們在檢測基因表達的同時獲得基因在組織內(nèi)部的空間位置信息。已發(fā)表的關(guān)于空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)有Slide-seq , LCM-seq , seqFISH, MERFISH , Liver single cell zonation , Geo-seq and Tomo-seq。這些方法或是在細胞數(shù)量上限制較大,或是存在有效測序深度不足等問題。正是由于空間轉(zhuǎn)錄組可以從多維度解析生物學過程的特點,近年來關(guān)于空間轉(zhuǎn)錄組無論是在技術(shù)開發(fā),還是大規(guī)模應用或商業(yè)化,都得到蓬勃發(fā)展。


四川宣傳空間轉(zhuǎn)錄組空間轉(zhuǎn)錄組的條形碼逆轉(zhuǎn)錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著。

1. 空間轉(zhuǎn)錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數(shù)據(jù)的技術(shù),從而解析單個組織切片中的所有mRNA??臻g條形碼逆轉(zhuǎn)錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,使得在mRNA樣品處理和后續(xù)測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。單細胞RNA測序或組織樣本RNA測序,均無法為研究人員提供精確的空間信息。通過空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)可獲取組織中具體的位置的轉(zhuǎn)錄信息,為研究和診斷提供有效數(shù)據(jù)支撐。10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)可以應用于免疫、發(fā)育、神經(jīng)和病理等研究方向。

 空間轉(zhuǎn)錄組學(ST)是一種方法,允許在組織樣本中可視化和定量分析轉(zhuǎn)錄組與空間分辨率。通過在載玻片上排列含有位置條形碼的寡核苷酸的組織切片,該方法聲稱可以生成具有精確位置信息的高質(zhì)量的RNA-seq cDNA文庫。條形碼芯片有1007個帶有獨特條形碼序列的引物位點。每個位置都有一個直徑100μm(對應于一個組織域)中心到中心的距離是200μm。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,在空間轉(zhuǎn)錄組樣本處理、實驗和數(shù)據(jù)挖掘上的成功經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務,助力各位科研工作者取得新的突破??臻g轉(zhuǎn)錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數(shù)據(jù)的技術(shù),從而解析單個組織切片中的所有mRNA。

1. 空間轉(zhuǎn)錄組實驗步驟A。切片制備和優(yōu)化:取新鮮組織、冷凍、切片,并進行HE染色成像,優(yōu)化確定切片是否覆蓋靶向區(qū)域。空間轉(zhuǎn)錄組實驗步驟B。切片固定和透化:將組織切片放置在含有與RNA結(jié)合捕獲探針的載玻片上,并進行固定和透化,使細胞中的 mRNA 得到釋放,并結(jié)合到相應的捕獲探針上,從而獲取基因表達信息。空間轉(zhuǎn)錄組實驗步驟c。逆轉(zhuǎn)和文庫構(gòu)建:以捕獲的 RNA 為模板,進行 cDNA 合成,和測序文庫制備??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟d。高通量上機測序:對制備好的測序文庫,進行二代高通量短讀長測序??臻g轉(zhuǎn)錄組實驗步驟e。數(shù)據(jù)可視化分析:結(jié)合HE結(jié)果,確定哪些基因有表達,表達量高低,以及這些基因的空間位置信息。10X Genomics 繼單細胞測序后也推出了空間轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)。什么是空間轉(zhuǎn)錄組

空間轉(zhuǎn)錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失。湖北空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域

第二,數(shù)據(jù)庫的建立。盡管當前空間轉(zhuǎn)錄組的數(shù)據(jù)在快速地增長,但尚未有對應的數(shù)據(jù)庫來對這些數(shù)據(jù)進行匯總集成。第三,研究物種及組織的多樣化。在當前時代,除 LCM 之外,研究的***主要集中于人類和小鼠的大腦,而其他***(例如肝臟)的空間轉(zhuǎn)錄組學研究相對滯后。對除人類和小鼠以外的其他生物以及除大腦以外的其他***的技術(shù)現(xiàn)代化,將為開發(fā)有用的空間轉(zhuǎn)錄組學地圖集提供廣闊的前景。第四,集成度高、交互性強、易擴展、文檔信息完善的開源工作流程的開發(fā)。該類工具的開發(fā)將簡化不同類型空間轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)的整合和分析。湖北空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域

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