空間基因表達技術(shù)能夠在保留空間背景信息的同時,多角度測量轉(zhuǎn)錄組譜。然而,現(xiàn)有的分析方法并沒有解決技術(shù)分辨率有限或有效利用空間信息的問題。來自美國的科研團隊開發(fā)了BayesSpace,這是一種完全貝葉斯統(tǒng)計方法,它使用來自空間鄰域的信息來增強空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的分辨率并進行聚類分析?;鶞蕼y試證明BayesSpace在識別具有相似表達譜的空間簇和提高空間轉(zhuǎn)錄組學分辨率方面的效用,其既克服了有效利用空間信息進行表達數(shù)據(jù)聚類的挑戰(zhàn),又克服了目前空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)分辨率有限的問題。了解R語言基礎(chǔ)語法及數(shù)據(jù)類型,了解空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析整體流程。北京空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域
歐易生物高級技術(shù)支持陳老師首先給大家介紹了空間轉(zhuǎn)錄組學的發(fā)展歷程、測序流程及原理。緊接著,歐易生物技術(shù)支持姚老師針對目前空間轉(zhuǎn)錄組學發(fā)表的一系列高分文章進行了方案設(shè)計的解析。姜老師給大家詳細介紹了空間轉(zhuǎn)錄組項目樣本準備、切片、貼片等實驗過程及注意事項,并帶領(lǐng)大家到實驗室實地觀摩了整個實驗過程,并就其中細節(jié)進行了講解。董老師針對空間轉(zhuǎn)錄組10x Space Ranger的分析原理及結(jié)果進行了詳細解析,并介紹了使用Seurat包進行數(shù)據(jù)挖掘的標準分析流程。歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域空間轉(zhuǎn)錄組樣本的組織切片的細胞中會釋放出mRNA,遷移到每個spot的mRNA會被標記上相應(yīng)的barcode序列。
第二,數(shù)據(jù)庫的建立。盡管當前空間轉(zhuǎn)錄組的數(shù)據(jù)在快速地增長,但尚未有對應(yīng)的數(shù)據(jù)庫來對這些數(shù)據(jù)進行匯總集成。第三,研究物種及組織的多樣化。在當前時代,除 LCM 之外,研究的***主要集中于人類和小鼠的大腦,而其他***(例如肝臟)的空間轉(zhuǎn)錄組學研究相對滯后。對除人類和小鼠以外的其他生物以及除大腦以外的其他***的技術(shù)現(xiàn)代化,將為開發(fā)有用的空間轉(zhuǎn)錄組學地圖集提供廣闊的前景。第四,集成度高、交互性強、易擴展、文檔信息完善的開源工作流程的開發(fā)。該類工具的開發(fā)將簡化不同類型空間轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)的整合和分析。
空間轉(zhuǎn)錄組的一般流程2。這使得在后續(xù)步驟中覆蓋細胞組織圖像和基因表達數(shù)據(jù)成為可能。用我們的滲透試劑對組織進行滲透,這意味著在細胞膜上形成小孔。RNA分子可以通過這些通道離開細胞,并與芯片上相鄰的捕獲探針結(jié)合。因此,基因表達信息被捕獲在芯片上。需要通過以下步驟將捕獲的RNA分子中存儲的信息轉(zhuǎn)換為數(shù)據(jù)。cDNA合成是為了創(chuàng)造穩(wěn)定的雙鏈DNA分子。這是必要的,因為cdna - rna -雜交體的降解速度很快。此外,這是構(gòu)建可測序文庫之前的必要步驟。所有之前收集的信息都被匯集起來,可以在線訪問。這意味著在實踐中,您可以查看組織切片的圖像并選擇組織中的不同區(qū)域。然后你可以確定哪些基因在這些區(qū)域中以什么數(shù)量表達。因此,你可以在一個單一的實驗中進行新分析??臻g轉(zhuǎn)錄組是在組織原位檢測基因表達的一種技術(shù)。
本文利用空間轉(zhuǎn)錄組學研究了在AD小鼠模型中,淀粉樣斑塊周圍直徑為100mm的組織域中發(fā)生的轉(zhuǎn)錄變化。發(fā)現(xiàn)了富含髓鞘和少突膠質(zhì)細胞基因(OLIGs)的基因共表達網(wǎng)絡(luò)的早期改變,而斑塊誘導的基因(PIGs)的多細胞基因共表達網(wǎng)絡(luò)涉及補體系統(tǒng)、氧化應(yīng)激、溶酶體和炎癥,在疾病的后期非常突出。此外作者通過對小鼠和人腦切片進行原位測序(ISS),證實了大多數(shù)觀察到的細胞水平的變化??臻g轉(zhuǎn)錄組學分析為探究AD和其他腦部疾病致病特征附近失調(diào)的細胞網(wǎng)絡(luò)提供了可能??臻g轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果為未來人類心臟發(fā)育的研究提供重要的借鑒意義。廣東歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組質(zhì)量
了解空間轉(zhuǎn)錄組樣本準備注意事項。北京空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域
1. 空間轉(zhuǎn)錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數(shù)據(jù)的技術(shù),從而解析單個組織切片中的所有mRNA。空間條形碼逆轉(zhuǎn)錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,使得在mRNA樣品處理和后續(xù)測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。單細胞RNA測序或組織樣本RNA測序,均無法為研究人員提供精確的空間信息。通過空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)可獲取組織中具體的位置的轉(zhuǎn)錄信息,為研究和診斷提供有效數(shù)據(jù)支撐。10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)可以應(yīng)用于免疫、發(fā)育、神經(jīng)和病理等研究方向。北京空間轉(zhuǎn)錄組領(lǐng)域
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