1. 空間轉(zhuǎn)錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數(shù)據(jù)的技術,從而解析單個組織切片中的所有mRNA??臻g轉(zhuǎn)錄組的條形碼逆轉(zhuǎn)錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,空間轉(zhuǎn)錄組使得在mRNA樣品處理和后續(xù)測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。單細胞RNA測序或組織樣本RNA測序,均無法為研究人員提供精確的空間信息。通過空間轉(zhuǎn)錄組技術可獲取組織中具體的位置的轉(zhuǎn)錄信息,為研究和診斷提供有效數(shù)據(jù)支撐。10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組技術可以應用于免疫、發(fā)育、神經(jīng)和病理等研究方向。除大腦以外的其他***的技術現(xiàn)代化,將為開發(fā)有用的空間轉(zhuǎn)錄組學地圖集提供廣闊的前景。什么是空間轉(zhuǎn)錄組做什么
10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組用于文庫構建的每張載玻片上有四個捕獲區(qū)域,每個捕獲區(qū)域的大小為6.5x6.5mm,包含5000個被條形碼標記的點(barcoded spots),每個點的直徑為55 μm,點和點之間中心的距離為100 μm,并且每個點都有一個barcode序列。組織切片的細胞中會釋放出mRNA,遷移到每個spot的mRNA會被標記上相應的barcode序列,然后進行文庫構建并進行測序。根據(jù)數(shù)據(jù)的條形碼信息對數(shù)據(jù)進行分析,以確定哪些數(shù)據(jù)來自哪個位置,從而實現(xiàn)空間基因表達的可視化。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過高效的服務,助力各位科研工作者取得新的突破。四川實力空間轉(zhuǎn)錄組空間轉(zhuǎn)錄組的組學板塊包括cDNA的合成、擴增、接頭連接和測序,記錄切片的轉(zhuǎn)錄本信息和空間位置信息 。
10x Genomics 公司提供的 Visium 空間基因表達解決方案是目前***一個高通量空間轉(zhuǎn)錄組的商業(yè)化解決方案。該解決方案巧妙的將單細胞測序技術原理和組織切片染色結合在一起,從而研究空間分辨率下整個轉(zhuǎn)錄組 mRNA 的表達情況,同時在同一組織切片中獲得組織學相關信息??臻g轉(zhuǎn)錄組相關的顯微解剖技術通常分為兩類:機械和光學。前者包括 Tomo-seq 等,通過沿感興趣軸,利用冷凍切片機進行組織切片,然后在每個切片上均進行 RNA 測序。10x 提供的載玻片分為兩種:用于摸索組織比較好透化時間的組織優(yōu)化玻片和用于正式實驗的基因表達玻片。
高通量空間轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)的處理和分析需要新穎的方法和工具支撐,尤其是在預處理、scRNA-seq 數(shù)據(jù)的空間重構、基于微陣列數(shù)據(jù)的細胞類型去卷積、空間高變基因的識別、細胞間相互作用的推導等。scRNA-seq 技術的進步啟發(fā)了利用高分辨率轉(zhuǎn)錄組定量分析與空間轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)的互補性質(zhì)的新方法。對于未進行轉(zhuǎn)錄組測序的 smFISH 和 ISS 數(shù)據(jù),可通過 scRNA-seq 數(shù)據(jù)估算空間數(shù)據(jù)中未分析的基因的表達模式。此外,“空間轉(zhuǎn)錄組學”這一術語的變體,也用于描述將轉(zhuǎn)錄本定位到細胞器的技術(例如 APEX-seq),盡管該技術沒有記錄任何空間坐標??臻g轉(zhuǎn)錄組樣本的組織切片的細胞中會釋放出mRNA,遷移到每個spot的mRNA會被標記上相應的barcode序列。
單細胞轉(zhuǎn)錄組測序技術的如火如荼,伴隨著空間轉(zhuǎn)錄組測序技術的蓬勃發(fā)展,可以看到,在現(xiàn)有的高通量檢測技術領域,這兩種技術已為科學研究的發(fā)展提供了前所未有的技術支撐。從2019年單細胞多組學被評為《Nature Methods》年度技術進展,到2020年空間轉(zhuǎn)錄組技術也被評為年度技術進展,相信在接下來的時間里,單細胞轉(zhuǎn)錄組和空間轉(zhuǎn)錄組將為生命科學的發(fā)展做出極其重要的貢獻。單細胞轉(zhuǎn)錄組測序技術的特點在于提供詳實的每個細胞的轉(zhuǎn)錄表達信息,但是缺失了來源組織的空間組成信息?,F(xiàn)有商用空間轉(zhuǎn)錄組測序技術的特點在于提供了完整的組織空間位置信息,但是每個捕獲spot的信息無法達到單細胞分辨率(10個左右細胞)。因此,這兩個技術的存在是天然互補的,而將兩者的結合也是水到渠成,完美結合。Cell上發(fā)表了一篇利用空間轉(zhuǎn)錄組解析人鱗狀細胞*的文章。云南歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組價格
該類工具的開發(fā)將簡化不同類型空間轉(zhuǎn)錄組學數(shù)據(jù)的整合和分析。什么是空間轉(zhuǎn)錄組做什么
空間轉(zhuǎn)錄組是在組織原位檢測基因表達的一種技術,與bulk RNA-seq或單細胞轉(zhuǎn)錄組測序相比,空間轉(zhuǎn)錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失,使得我們在檢測基因表達的同時獲得基因在組織內(nèi)部的空間位置信息。已發(fā)表的關于空間轉(zhuǎn)錄組技術有Slide-seq , LCM-seq , seqFISH, MERFISH , Liver single cell zonation , Geo-seq and Tomo-seq。這些方法或是在細胞數(shù)量上限制較大,或是存在有效測序深度不足等問題。正是由于空間轉(zhuǎn)錄組可以從多維度解析生物學過程的特點,近年來關于空間轉(zhuǎn)錄組無論是在技術開發(fā),還是大規(guī)模應用或商業(yè)化,都得到蓬勃發(fā)展。
什么是空間轉(zhuǎn)錄組做什么
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