海南空間轉錄組使用

來源: 發(fā)布時間:2021-11-06

歐易生物自引進10x Visium空間轉錄組以來已經完成了上百例樣本測序,在樣本包埋、切片、實驗和數據分析上積累了大量寶貴的經驗。本次培訓班旨在跟廣大科研工作者介紹空間轉錄組的研究熱點和方案設計,分享歐易生物在樣本處理、實驗和數據挖掘上的成功經驗,助力各位科研工作者取得新的突破。招生對象:A、對空間轉錄組感興趣,期望了解空間轉錄組技術,或近期準備開展空間轉錄組測序項目B、項目已經開展,需要深入挖掘數據的科研工作者。空間轉錄組測序技術在進行 HE 染色的同時需要保證獲取組織基因表達信息。海南空間轉錄組使用

許多當前時代空間轉錄組技術的基礎都是在自七十年代以來的幾十年間建立的。例如,于1976 年首先使用紫外線激光來切割組織。當前流行的技術,例如空間轉錄組學(ST)和 10X Visium 依靠這種微陣列技術,區(qū)別就在于是從放置在微陣列載玻片上的組織上而不是從溶液中來捕獲轉錄本信息。當前時代的空間轉錄組技術大致分為五類方向:激光顯微切割(LCM),單分子熒光原位雜交(smFISH),靶向原位測序(ISS),原位陣列捕獲和 其他非成像技術。吉林技術空間轉錄組盡管前傳時代的空間技術被迅速棄用,但其思想和方法是當今時代空間轉錄組學發(fā)展的基礎。

美國腦計劃啟動的 BICCN 項目,該項目將整合不同類型細胞的分子、解剖學和生理學特性,創(chuàng)建小鼠腦細胞 3D 參考圖譜,同時也將基于人類和非人類靈長類腦組織樣本,繪制腦細胞參考圖譜 ,其涉及空間轉錄組學技術主要包括 MERFISH 和 seqFISH。一些實現空間轉錄組學的重要技術,可以追溯到二十世紀七十年代,長期以來,各種形式的原位雜交技術(ISH)已用于可視化空間中的基因表達。從技術原理中不難看出,空間轉錄組技術重要為特殊的載玻片。

和單細胞轉錄組一樣,空間轉錄組也可以進行細胞間通訊分析,區(qū)別在于空間位置信息可以同時用于識別潛在的細胞間相互作用。通常通過了解配體受體(LR)對并測試 LR 對是否更有可能在鄰近細胞或 spot 中表達來完成。還有很多其他類型的分析可用于空間轉錄組學數據,包括基因模式的識別,空間區(qū)域的轉錄組定義, 基因間的相互作用推斷,轉錄本的亞細胞定位以及基于H&E圖像的基因表達估算等。1. 歐易生物具有上百例空間轉錄組項目執(zhí)行經驗,致力通過質量的服務,助力各位科研工作者取得新的突破。空間轉錄組的條形碼逆轉錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著。

轉錄本的空間位置信息可以通過在原位陣列上捕獲的組織切片中的轉錄本來獲取,目前已有多種技術策略被開發(fā)報道, 如空間轉錄組技術(Spatial Transcriptomics,ST)和 Visium 技術,通過將包含空間位置信息的條形碼、UMI 標簽、poly-dT 的探針固定在商用微陣列載玻片上,來捕獲包含 poly(A) 尾巴的轉錄本,并獲取全轉錄組水平的基因表達及位置信息。一些無需成像即可計算重建空間基因表達模式所需信息的技術也被開發(fā)了出來,其中之一就是是 DNA 顯微技術,它記錄 cDNA 之間的接近度,該信息可用于重建轉錄本之間的相對位置??臻g轉錄組細胞通訊分析方法簡介及實操。浙江歐易生物空間轉錄組多少錢

空間轉錄組這對于發(fā)育生物學等眾多領域的研究都具有重要的意義。海南空間轉錄組使用

10x Genomics空間轉錄組的實現原理是什么?10x Genomics空間轉錄組用于文庫構建的每張載玻片上有四個捕獲區(qū)域,每個捕獲區(qū)域的大小為6.5x6.5mm,包含5000個被條形碼標記的點(barcoded spots),每個點的直徑為55 μm,點和點之間中心的距離為100 μm,并且每個點都有一個barcode序列。組織切片的細胞中會釋放出mRNA,遷移到每個spot的mRNA會被標記上相應的barcode序列,然后進行文庫構建并進行測序。根據數據的條形碼信息對數據進行分析,以確定哪些數據來自哪個位置,從而實現空間基因表達的可視化。 海南空間轉錄組使用

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