文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物協(xié)助完成。近日,上海交通大學(xué)/復(fù)旦-交大-諾丁漢植物生物技術(shù)研發(fā)中心主任唐克軒課題組在New Phytologist(IF:8.512)發(fā)表了題為“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究論文,揭示了青蒿轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信號所介導(dǎo)的青蒿素生物合成調(diào)控的新型分子機(jī)制,本研究通過藍(lán)/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達(dá),使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。文庫篩選經(jīng)驗(yàn) 與上千所高校及科研院所合作 完成年均400多個物種的文庫構(gòu)建及篩選 。上海實(shí)力酵母文庫報價
酵母文庫實(shí)驗(yàn)本研究鑒定了一個可以與MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1與MdMYB9結(jié)合可以增強(qiáng)后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而MdTRB1與MdJAZ1的結(jié)合,可以干擾其與MdMYB9的互作,進(jìn)而負(fù)向調(diào)控MdTRB1介導(dǎo)的對花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9復(fù)合物可以動態(tài)調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究JA對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。河北運(yùn)用酵母文庫報價為在校期間為實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建3個高效的水稻酵母雙雜交文庫。
酵母雜交試驗(yàn):隨著分子生物學(xué)研究進(jìn)入以蛋白質(zhì)組學(xué)為標(biāo)志的后基因組時代,蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-DNA相互作用已成為互作組學(xué)研究的熱門主題。人類基因粗略約編碼2萬種蛋白,只算一對一的相互作用種類也有12萬到100萬種。而加上動態(tài)變化,每個物種、個體、細(xì)胞中都存在著一張張不同的互作網(wǎng)絡(luò)圖,這一張張圖譜中,蘊(yùn)藏著各種生命的奧秘。有兩種通用的相互作用組圖譜繪制方式:第一種酵母雜交試驗(yàn),通過偶聯(lián)基因表達(dá)體現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生直接相互作用的蛋白對。第二種是通過抗體/標(biāo)簽分離純化復(fù)合體,然后用質(zhì)譜鑒定復(fù)合體內(nèi)部組分,識別直接相互作用或間接相互作用的蛋白質(zhì)。兩種高通量方法彼此互補(bǔ),相互驗(yàn)證。
歐易酵母文庫助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個成員 TaSRL1,它可以調(diào)控生長素生物合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和信號轉(zhuǎn)到相關(guān)基因的表達(dá),并與生長素轉(zhuǎn)運(yùn)基因 TaPIN2 啟動子序列結(jié)合促進(jìn)其表達(dá),進(jìn)而抑制根的生長。此外,TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用,破壞 TaSRL1 對 TaPIN2 表達(dá)的促進(jìn)作用。因此 TaSRL1 可整合根生長過程中生長素和 JA 信號,負(fù)調(diào)控根的伸長。TaSRL1-4A 標(biāo)記對小麥育種過程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母膜系統(tǒng)文庫構(gòu)建與篩選技術(shù)。
酵母單雜交結(jié)果顯示,磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子OsPHR1/2/3可以***51個目標(biāo)啟動子中的25個,包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以調(diào)控許多菌根共生相關(guān)基因的表達(dá)(圖A)。對叢枝菌根共生響應(yīng)基因啟動子序列預(yù)測分析顯示,有78個轉(zhuǎn)錄因子被富集,87%的菌根共生響應(yīng)基因受到OsPHR1/2/3的調(diào)控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接調(diào)控。因此推測OsPHR1/2/3可能是菌根共生調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個關(guān)鍵調(diào)控樞紐(圖A-B)。EMSA和熒光素酶報告實(shí)驗(yàn)證實(shí),OsPHR12可以直接結(jié)合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3啟動子序列(圖C-F),并且這種結(jié)合依賴于啟動子中的P1BS元件(圖G)。進(jìn)口試劑高服務(wù)質(zhì)量市場份額大酵母文庫。上海實(shí)力酵母文庫報價
結(jié)合自主優(yōu)化的SMART和GATEWAY三框接頭,可滿足各種酵母雙雜交文庫構(gòu)建要求。上海實(shí)力酵母文庫報價
單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導(dǎo)蘋果黃酮醇積累的關(guān)鍵性調(diào)控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌,通過酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫。結(jié)果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應(yīng)、***信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、木質(zhì)素生物合成、果實(shí)成熟發(fā)育等過程,以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中, MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子,由于其在草莓中的同源基因已被報導(dǎo)與黃酮的合成有關(guān),引起了研究者的注意。進(jìn)一步通過Y1H assay驗(yàn)證確認(rèn)了MdSCL8可以與MdFLS1啟動子互作(圖2A)。通過雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)和GUS檢測,發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負(fù)向調(diào)控MdFLS1啟動子活性(圖2B-D)。上海實(shí)力酵母文庫報價
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