黑龍江酵母文庫質(zhì)量

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-08

酵母文庫實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1 與 MdMYB9 結(jié)合可以增強(qiáng)后者對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結(jié)合,可以干擾其與 MdMYB9 的互作,進(jìn)而負(fù)向調(diào)控 MdTRB1 介導(dǎo)的對花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9 復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究 JA 對花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。本研究鑒定了一個(gè)可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。酵母單雙雜交服務(wù)促銷季技術(shù)服務(wù)。黑龍江酵母文庫質(zhì)量

酵母雙雜交、GSTpull-down實(shí)驗(yàn)顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實(shí)驗(yàn)顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實(shí)驗(yàn)證實(shí)HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍(lán)光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)顯示,藍(lán)光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強(qiáng)。表明藍(lán)光***的 CRY1 可能通過藍(lán)光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。云南技術(shù)酵母文庫Gateway方法酵母雙雜交文庫構(gòu)建核系統(tǒng)與膜系。

酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)表明,PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用(圖 C),并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(shí)(圖 D-E)。為進(jìn)一步研究在年齡信號調(diào)控中的作用機(jī)制,分別構(gòu)建了過表達(dá)PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對照相比,過表達(dá)PtDAL1***提前了擬南芥的營養(yǎng)-生殖時(shí)相轉(zhuǎn)換(圖A),證實(shí)PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過表達(dá)PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過早終止,表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運(yùn)起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點(diǎn)關(guān)鍵基因突變體進(jìn)行功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示過表達(dá)PtDAL1可以恢復(fù)由于過表達(dá)miR156導(dǎo)致的開花延遲,但ft缺失會(huì)導(dǎo)致PtDAL1失活,PtDAL1過表達(dá)也不能恢復(fù)soc1-1-2突變體的表型,表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達(dá)PtMADS11可以恢復(fù)由過表達(dá)miR156或ft缺失導(dǎo)致的開花延遲,表明PtMADS11對開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。

本研究通過酵母雙雜交篩選,鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復(fù)合物關(guān)鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合,共同以藍(lán)光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍(lán)光***的 CRY1 可以增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合,將 SWR1 復(fù)合物募集到 HY5 靶向位置,調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá),進(jìn)而影響擬南芥下胚軸的伸長據(jù)此,本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機(jī)制:CRY1 通過增強(qiáng) SWR1 復(fù)合物活性和 HY5 介導(dǎo) SWR1 復(fù)合物向 HY5 靶基因的募集,共同促進(jìn) H2A.Z 染色質(zhì)沉積,以調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá)和藍(lán)光條件下光形態(tài)建成。酵母單雜篩庫酵母文庫篩選酵母雙雜交篩庫步驟。

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