通過酵母雙雜交文庫進行了互作蛋白的篩選,結(jié)果顯示TaTIFY9可以與TaSRL1相互作用(下圖A),并通過Bi-FC、熒光互補實驗得以證實(圖B-C)。TaTIFY9屬于茉莉酸信號途徑關(guān)鍵因子JAZ家族的成員之一。RT-PCR顯示TaTIFY9也主要表達于小麥根部,外源施加茉莉酸可以***誘導(dǎo)TaTIFY9表達。這一結(jié)果表明,TaSRL1可能通過與TIFY9結(jié)合介導(dǎo)了茉莉酸對根生長的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特異性結(jié)合到靶基因啟動子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 屬于 ERF 家族。在生長素轉(zhuǎn)運基因 TaPIN2 的啟動子序列中含有一個 GCC-box 序列。酵母單雜交實驗顯示,TaSRL1 可以直接與 TaPIN2 啟動子結(jié)合并***其表達(圖 A),但該***作用會被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制(圖 B和C)。酵母雙雜交優(yōu)惠快速出報告品牌歐易生物特色科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)準(zhǔn)確。福建酵母文庫
酵母雜交試驗:隨著分子生物學(xué)研究進入以蛋白質(zhì)組學(xué)為標(biāo)志的后基因組時代,蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-DNA相互作用已成為互作組學(xué)研究的熱門主題。人類基因粗略約編碼2萬種蛋白,只算一對一的相互作用種類也有12萬到100萬種。而加上動態(tài)變化,每個物種、個體、細(xì)胞中都存在著一張張不同的互作網(wǎng)絡(luò)圖,這一張張圖譜中,蘊藏著各種生命的奧秘。有兩種通用的相互作用組圖譜繪制方式:第一種酵母雜交試驗,通過偶聯(lián)基因表達體現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生直接相互作用的蛋白對。第二種是通過抗體/標(biāo)簽分離純化復(fù)合體,然后用質(zhì)譜鑒定復(fù)合體內(nèi)部組分,識別直接相互作用或間接相互作用的蛋白質(zhì)。兩種高通量方法彼此互補,相互驗證。青海什么是酵母文庫酵母文庫構(gòu)建方法酵母篩庫構(gòu)建酵母文庫的意義。
酵母雙雜交文庫:本研究通過藍/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達,使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達。實驗表明AaWRKY9通過光依賴JA信號通路調(diào)節(jié),在青蒿素生物合成中發(fā)揮重要作用,AaWRKY9通過與AaDBR2和AaGSW1的啟動子結(jié)合正向調(diào)節(jié)青蒿素的積累。此外,JA信號通路中的抑制因子AaJAZ9與AaWRKY9相互作用,并抑制其轉(zhuǎn)錄***活性,而在MeJA存在情況下,AaJAZ9被降解,AaWRKY9的轉(zhuǎn)錄***活性增加,進而促進青蒿素生物合成基因的表達。酵母雙雜交文庫結(jié)果表明,AaWRKY9有助于光和JA信號調(diào)節(jié)青蒿素的生物合成,為兩種信號途徑在植物次生代謝物合成中的整合調(diào)控提供了新見解。
利用酵母雙雜交技術(shù)進行篩選,結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作關(guān)系通過酵母一對一互作、BiFC、Co-IP、LCI實驗得以驗證(圖A-C)。利用截短的SP8進行酵母一對一互作和Co-IP檢測表明,與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域(圖D-E);同樣,OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的(圖F)。酵母雙雜交、BiFC實驗表明,OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理,野生對照株根的長度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號傳導(dǎo)相關(guān)基因表達量上升,但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達量上升減少。酵母雜交案例專業(yè)的碩博團隊。
歐易酵母文庫助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個成員 TaSRL1,它可以調(diào)控生長素生物合成、轉(zhuǎn)運和信號轉(zhuǎn)到相關(guān)基因的表達,并與生長素轉(zhuǎn)運基因 TaPIN2 啟動子序列結(jié)合促進其表達,進而抑制根的生長。此外,TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用,破壞 TaSRL1 對 TaPIN2 表達的促進作用。因此 TaSRL1 可整合根生長過程中生長素和 JA 信號,負(fù)調(diào)控根的伸長。TaSRL1-4A 標(biāo)記對小麥育種過程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母單雜交技術(shù)是在酵母雙雜基礎(chǔ)上發(fā)展而來的一種研究核酸。吉林酵母文庫有什么用
眾所周知,酵母雜交技術(shù)存在一定的假陽性。福建酵母文庫
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