基因擴增實驗又稱PCR實驗,其特點是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法,應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域,例如:特定基因的檢測和診斷,DNA指紋、個體識別、親子鑒定及法醫(yī)物證,動、植物檢疫,動物及其衍生產(chǎn)品檢測,動物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測,轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測等。PCR實驗室原則上為試劑準備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域并設(shè)有走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔的,各工作區(qū)有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū),后兩區(qū)為擴增后區(qū),擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應(yīng)嚴格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),即從試劑準備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動。實驗室的氣流也應(yīng)從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),不得逆向流動。各工作區(qū)頂部應(yīng)安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。PCR克隆的一大優(yōu)點是能夠通過克隆將所需突變引入目的基因中,以便進行突變研究。檢驗室國產(chǎn)PCR儀近期價格
完備的實驗室配套設(shè)施是保證實驗工作的必要條件,應(yīng)根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺、離心機、加樣器等。實驗室是科學(xué)的搖籃,是科學(xué)研究的基地,科技發(fā)展的源泉,對科技發(fā)展起著非常重要的作用。PCR實驗室規(guī)范的操作:(1)臨床基因擴增檢驗實驗室的技術(shù)人員必須進行上崗培訓(xùn),經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴增檢驗的工作;(2)在實驗操作過程中,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施;(3)清潔工作及時、正確。實驗工作結(jié)束后,必須立即對本區(qū)進行清潔。除常規(guī)的消毒液體對表面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外,對一些實驗設(shè)備還應(yīng)進行高壓消毒處理。嚴格規(guī)范管理要求(1)嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關(guān)的人員不得隨意進出實驗室,有條件的情況下要設(shè)置的通道和進出整個實驗區(qū)的門;(2)在各個實驗區(qū)域使用帶有明顯區(qū)別標志的工作服(如不同顏色),當(dāng)工作人員離開時不得將本區(qū)的工作服帶至其它區(qū)域;(3)盡量減少在實驗區(qū)內(nèi)不必要的走動以減少交叉污染的可能性。(4)擴增產(chǎn)物分析區(qū)是較主要的擴增產(chǎn)物污染來源,廢液不能在實驗室中傾倒,必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉。力康熒光定量PCR儀廠家直供PCR技術(shù)起初的臨床應(yīng)用就是從檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變開始的。
基因擴增儀因操作方便、運行速度快、實驗結(jié)果準確,受到越來越多的分子生物學(xué)研究者青睞。面對各種不同性能的基因擴增儀,又該如何選擇呢?基因擴增儀的選購誤區(qū)誤區(qū)一:儀器通道越多越好隨著基因擴增技術(shù)的成熟運用,多重擴增越來越熱鬧,基因擴增儀也不能幸免。從單通道基因擴增儀發(fā)展到如今各個廠家都推出4通道、5通道甚至6通道基因擴增儀,眼花繚亂的選擇讓人無所適從,就有人一不小心走進了“通道越多越好”的誤區(qū)。在使用有些廠家5通道的基因擴增儀時,為了確保實驗結(jié)果的精確性和準確性都要在實驗中使用ROX或Referencedye,這些熒光染料都必須單獨使用一個檢測通道。這樣以來,真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個,而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本??紤]多重基因擴增儀的通道數(shù)的時候也應(yīng)該從實驗室實際情況出發(fā),多重基因擴增儀并非人人適用、人人可用,因為它使實驗復(fù)雜化了。誤區(qū)二:基因擴增儀無需梯度功能對于使用染料法的定量PCR反應(yīng),雖然有各種各樣的PCR引物設(shè)計軟件或者經(jīng)驗公式計算熔解溫度(Tm值),但運用的公式不同、引物序列不同,Tm值的差異會很大。引物的熔解溫度決定了退火溫度。而且模版中堿基的組合千變?nèi)f化,對于特殊片斷。
力康GM05智能梯度基因擴增儀(控溫儀),基于WindowsCE智能化操作系統(tǒng),具備多達100余項故障自診斷功能。 連接互聯(lián)網(wǎng),用戶可通過IE瀏覽器登錄力康官網(wǎng)的下載中心進行版本更新,完成PCR儀的遠程維護、診斷和數(shù)據(jù)交換, 提高了工作效率。GM05智能梯度基因擴增儀(控溫儀)支持觸摸和鼠標操作,可外接移動U盤,打破傳統(tǒng)PCR儀的按鍵式操作模式,使得編寫程序及操作更加靈活方便。GM05智能梯度基因擴增儀(控溫儀)率先在行業(yè)領(lǐng)域引入物聯(lián)網(wǎng)概念,具備新一代的信息技術(shù),以互聯(lián)網(wǎng)為基礎(chǔ),實現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)的延伸與拓展,以一臺上位機(PC)為主機,可連接多達200臺下位機(GM05智能梯度基因擴增儀/控溫儀)。PCR儀是分子生物學(xué)相關(guān)實驗的常規(guī)儀器。
PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備區(qū)標本制備區(qū)擴增區(qū)擴增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進行,防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前的區(qū)域。風(fēng)速流向不得混亂。為了保證房間內(nèi)的壓差和避免污染,應(yīng)在空調(diào)面板處寫清楚送風(fēng)機和排風(fēng)機的開啟順序和關(guān)閉順序,先后順序不得混亂??諝鉂崈艏墑e不同的相鄰房間之間的靜壓差應(yīng)大于5帕,潔凈室(區(qū))與室外大氣的靜壓差應(yīng)大于10帕,應(yīng)配備監(jiān)測靜壓差的設(shè)備,并定期監(jiān)控。一般情況下,試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;可以通過控制進風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達到正壓效果。核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品,可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進風(fēng)風(fēng)量達到負壓效果。理想情況下,PCR實驗室緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。PCR實驗室進風(fēng)由原有中央空調(diào)控制的要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到指定定點。由于PCR簡便易行、靈敏度高等有點,該技術(shù)被應(yīng)用于多數(shù)分子實驗的研究中。上海力康國產(chǎn)PCR儀價格比較
PCR擴增儀又稱為PCR基因擴增儀、PCR核酸擴增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴增儀。檢驗室國產(chǎn)PCR儀近期價格
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