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Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基是一種專(zhuān)門(mén)用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細(xì)菌的培養(yǎng)基,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些特點(diǎn):1.**無(wú)血培養(yǎng)基**:Karmali氏培養(yǎng)基是一種無(wú)血的培養(yǎng)基,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟(jì)。2.**選擇性培養(yǎng)**:該培養(yǎng)基含有萬(wàn)古霉素(vancomycin)和兩性霉素B(amphotericinB)等選擇性添加劑,這些添加劑有助于抑制其他非目標(biāo)微生物的生長(zhǎng),從而提高目標(biāo)彎曲桿菌的分離率。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,Karmali氏培養(yǎng)基通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長(zhǎng)。4.**菌落特征**:在42°C下培養(yǎng)42小時(shí)后,空腸彎曲桿菌菌株在這種培養(yǎng)基上通常產(chǎn)生灰色、濕潤(rùn)、平鋪的菌落,這些特征有助于識(shí)別彎曲桿菌。5.**配方**:Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、活性碳和血晶素(hemin),以及瓊脂作為固化劑。這些成分為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供了必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并且活性碳有助于中和代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物。6.**應(yīng)用**:這種培養(yǎng)基被ISO委員會(huì)推薦使用,適用于從食品、動(dòng)物飼料和臨床樣本中分離彎曲桿菌。在DCR培養(yǎng)基中,添加不同的植物素,如2,4-D、6-BA、KT等,可以調(diào)節(jié)植物細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。AGS平板
TGE肉湯(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉湯,是一種用于微生物培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作為指示劑的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉湯(含TTC)的主要用途和特點(diǎn)如下:1.**用途**:TGE肉湯主要用于水、牛奶和乳制品中異養(yǎng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)。它適用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定,也可用于檢測(cè)乳品中的耐熱細(xì)菌。2.**成分**:典型的TGE肉湯配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類(lèi)提供能量。3.**pH值**:TGE肉湯的pH值通常調(diào)節(jié)在7.0±0.2(25℃)。4.**制備方法**:將TGE肉湯的干粉溶解在蒸餾水中,加熱煮沸以幫助成分溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。5.**使用**:通常取一定量的培養(yǎng)基加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌,然后用于微生物的培養(yǎng)。6.**指示劑**:TTC作為指示劑,當(dāng)細(xì)菌代謝時(shí),TTC會(huì)被還原成紅色的三苯基甲烷,從而便于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。7.**保存條件**:未開(kāi)封的TGE肉湯通常在室溫下避光保存,開(kāi)封后應(yīng)旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊,并根據(jù)存放條件適當(dāng)延長(zhǎng)保存期。
M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基(M-EndoAnti-corrosionMedium)是一種用于微生物檢測(cè)的培養(yǎng)基,主要用于水中大腸菌群的膜過(guò)濾法檢測(cè)。以下是它的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方**:M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基的配方包含胰胨、蛋白胨、酵母浸粉、乳糖、氯化鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、硫酸十二烷基鈉、去氧膽酸鈉和亞硫酸鈉等成分,以及作為指示劑的堿性品紅。2.**配制方法**:通常稱(chēng)取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的無(wú)水乙醇和蒸餾水,加熱至沸騰以幫助溶解。配制好的培養(yǎng)基通常需要在121℃下高壓滅菌15分鐘。3.**用途**:這種培養(yǎng)基專(zhuān)門(mén)用于檢測(cè)飲用水、廢水、乳制品和食品中的大腸菌群,是執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)方法的一部分,如美國(guó)公共衛(wèi)生協(xié)會(huì)(APHA)所推薦的方法。4.**貯藏條件**:配制好的培養(yǎng)基通常需要在2-8°C下避光保存,以保持其有效性。5.**結(jié)果觀察**:在M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基上,乳糖發(fā)酵型的大腸桿菌和大腸菌群會(huì)產(chǎn)生紅色至深紅色的菌落,帶有金色金屬光澤,而非乳糖發(fā)酵型微生物則產(chǎn)生無(wú)色透明菌落。6.**產(chǎn)品規(guī)格**:M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基通常以250g/瓶的規(guī)格出售,并且有較長(zhǎng)的保存期限,一般為3年。7.**注意事項(xiàng)**:在配制和使用過(guò)程中,應(yīng)避免攝入、吸入和皮膚接觸,以確保操作安全。
SlantzandBartley培養(yǎng)基是一種專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于分離和計(jì)數(shù)腸球菌的選擇性培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于水和食品樣本中的腸球菌檢測(cè)。以下是它的一些特點(diǎn):1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氫鉀、疊氮鈉和瓊脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),葡萄糖作為碳源,磷酸二氫鉀作為緩沖劑,疊氮鈉作為抑菌劑抑制革蘭氏陰性菌的生長(zhǎng),瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),為腸球菌提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**選擇性**:疊氮鈉對(duì)革蘭氏陰性菌具有抑制作用,確保培養(yǎng)基的選擇性。4.**應(yīng)用**:開(kāi)始設(shè)計(jì)用于通過(guò)膜過(guò)濾技術(shù)檢測(cè)和計(jì)數(shù)腸球菌,但也證明作為直接涂布培養(yǎng)基同樣有效。5.**配制方法**:通常稱(chēng)取41.5g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至沸騰以溶解瓊脂,高壓滅菌20分鐘。滅菌后冷卻至45-50°C,并分裝進(jìn)培養(yǎng)皿。6.**質(zhì)量控制**:通過(guò)特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測(cè)試,確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)菌株的生長(zhǎng)。例如,腸球菌ATCC29212在該培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng),而大腸桿菌ATCC25922則應(yīng)被抑制。7.**儲(chǔ)存條件**:未配制的培養(yǎng)基粉末應(yīng)密封保存在15-30°C的陰涼干燥處。配制好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2-8°C。KI培養(yǎng)基有上層和下層培養(yǎng)基。上層培養(yǎng)基成分有血消化湯、瓊脂、硫代硫酸鈉、硫酸亞鐵銨、乳糖和酚紅溶液。
改良R2A瓊脂(ModifiedR2Amedium)是一種應(yīng)用的低營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于微生物的分離、計(jì)數(shù)和鑒定,特別是在水質(zhì)檢測(cè)中用于測(cè)定細(xì)菌總數(shù)。以下是改良R2A瓊脂的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氫二鉀-無(wú)水硫酸鎂-酸鈉-瓊脂2.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:-主要用于純化水中菌落總數(shù)的測(cè)定。-適用于EP(歐洲藥典)、USP(美國(guó)藥典)、ChP(中國(guó)藥典)標(biāo)準(zhǔn)。4.**配制方法**:-稱(chēng)取適量的培養(yǎng)基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍。-進(jìn)行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘。5.**保存條件**:通常在2-8°C下保存。6.**注意事項(xiàng)**:-在稱(chēng)量和操作過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免微生物污染。-使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。7.**應(yīng)用**:-在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測(cè)和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域有廣的應(yīng)用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:質(zhì)控菌株接種后于30-35℃需氧培養(yǎng)48-120小時(shí),用于評(píng)估培養(yǎng)基的性能。改良R2A瓊脂因其營(yíng)養(yǎng)豐富、操作簡(jiǎn)便和應(yīng)用廣,成為實(shí)驗(yàn)室中常用的培養(yǎng)基之一。在冷凍保存過(guò)程中,使用保護(hù)劑如甘油、血清、糖類(lèi)等,可以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害 。無(wú)鹽麥康凱瓊脂培養(yǎng)皿
細(xì)菌保存培養(yǎng)基的基本原理是通過(guò)降低細(xì)菌的新陳代謝速度,使細(xì)菌的生命活動(dòng)處于半永久性的休眠狀態(tài)。AGS平板
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)輕型唾液鏈球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是使用輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)進(jìn)行細(xì)菌分離和鑒定的步驟:1.**制備培養(yǎng)基**:-稱(chēng)取90gMSA粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-加熱煮沸至完全溶解。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入1mL無(wú)菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中。2.**接種樣本**:-將待測(cè)樣本如咽拭子、尿液或其他臨床樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅?將稀釋后的樣本均勻地涂布在MSA平板上。3.**培養(yǎng)**:-將接種后的培養(yǎng)皿置于35-37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48小時(shí)。4.**觀察菌落生長(zhǎng)**:-觀察培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落,注意菌落的顏色、形態(tài)和大小。-腸球菌在MSA上通常形成藍(lán)色-黑色的菌落。5.**挑選可疑菌落**:-挑取可疑的菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)。6.**進(jìn)行生化試驗(yàn)**:-對(duì)純化后的菌株進(jìn)行一系列的生化試驗(yàn),如糖發(fā)酵試驗(yàn)、CAMP試驗(yàn)、膽汁七葉苷試驗(yàn)等,以進(jìn)一步鑒定菌種。7.**結(jié)果分析**:-根據(jù)菌落特征和生化試驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合菌株的形態(tài)學(xué)特征,進(jìn)行菌種的鑒定。8.**報(bào)告結(jié)果**:-將鑒定結(jié)果整理成報(bào)告,包括菌株的名稱(chēng)、數(shù)量和相關(guān)的生化特性。AGS平板