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上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系還可包括進(jìn)行pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的試劑。所述“進(jìn)行pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的試劑”不包括pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的引物。上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系可為20μl,由10μl2×mastermix、上述任一所述引物組合和模板組成。2×mastermix具體可為德國qiagen公司的產(chǎn)品。所述模板具體可為濃度為1ng/μl的標(biāo)準(zhǔn)品2800m的水溶液或樣品的基因組dna。所述樣品可為人口腔拭子。所述標(biāo)準(zhǔn)品2800m具體可為promega公司的產(chǎn)品,產(chǎn)品目錄號為dd7251。含有上述任一所述引物組合的試劑盒也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍;所述試劑盒的用途可為(h1)-(h5)中的至少一種:(h1)str分型;(h2)y-str分型;(h3)個(gè)體識別;(h4)親權(quán)鑒定;(h5)種族推斷。本發(fā)明還保護(hù)上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系或上述任一所述試劑盒的制備方法;該制備方法包括將上述任一所述引物組合中的各條引物單獨(dú)包裝的步驟。本發(fā)明還保護(hù)上述任一所述引物組合或上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系在制備試劑盒中的應(yīng)用;所述試劑盒的用途可為(h1)-(h5)中的至少一種:。 邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)擁有全技術(shù)平臺及豐富的伴隨診斷開發(fā)經(jīng)驗(yàn),為藥企合作伙伴提供一體化開發(fā)服務(wù)。遼寧多組學(xué)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺經(jīng)驗(yàn)豐富
上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系還可包括進(jìn)行pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的試劑。所述“進(jìn)行pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的試劑”不包括pcr擴(kuò)增反應(yīng)所需的引物。上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系可為20μl,由10μl2×mastermix、上述任一所述引物組合和模板組成。2×mastermix具體可為德國qiagen公司的產(chǎn)品。所述模板具體可為濃度為1ng/μl的標(biāo)準(zhǔn)品2800m的水溶液或樣品的基因組dna。所述樣品可為人口腔拭子。所述標(biāo)準(zhǔn)品2800m具體可為promega公司的產(chǎn)品,產(chǎn)品目錄號為dd7251。含有上述任一所述引物組合的試劑盒也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍;所述試劑盒的用途可為(h1)-(h5)中的至少一種:(h1)str分型;(h2)y-str分型;(h3)個(gè)體識別;(h4)親權(quán)鑒定;(h5)種族推斷。本發(fā)明還保護(hù)上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系或上述任一所述試劑盒的制備方法;該制備方法包括將上述任一所述引物組合中的各條引物單獨(dú)包裝的步驟。本發(fā)明還保護(hù)上述任一所述引物組合或上述任一所述復(fù)合擴(kuò)增體系在制備試劑盒中的應(yīng)用;所述試劑盒的用途可為(h1)-(h5)中的至少一種:。安徽抗體全邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺推薦咨詢邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)為客戶提供生物標(biāo)記物發(fā)現(xiàn)、 靶點(diǎn)驗(yàn)證、伴隨診斷開發(fā)與商業(yè)化、患者用藥指導(dǎo)等一體化解決方案。
⑦側(cè)翼序列堿基數(shù),各部分之間用tab鍵隔開。按照這種格式依次對68個(gè)基因座進(jìn)行錄入。68個(gè)基因座基因配置文件錄入完成后,運(yùn)行***。該文件給出了①基因座名稱,②基因分型,③擴(kuò)增子堿基數(shù),④擴(kuò)增子序列信息,⑤測序深度五個(gè)部分。根據(jù)國際法醫(yī)遺傳學(xué)會(internationalsocietyforforensicgenetics,isfg)發(fā)表的關(guān)于y-str基因座的str序列指南()和niststr數(shù)據(jù)庫(strbase.)y染色體str情況說明對67個(gè)y-str基因座的序列構(gòu)建**重復(fù)結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。結(jié)果表明,標(biāo)準(zhǔn)品2800m得到了完整的str分型,完全能夠滿足法醫(yī)str檢驗(yàn)的要求。表3-1注:n與其后數(shù)字表示一段堿基序列,其后數(shù)字表示序列的堿基數(shù)目。表3-2注:n與其后數(shù)字表示一段堿基序列,其后數(shù)字表示序列的堿基數(shù)目。二、采用實(shí)施例1制備的試劑盒的應(yīng)用——口腔拭子樣本的基因座分型樣本一、樣本二和樣本三為3名漢族男性無關(guān)個(gè)體的口腔拭子的基因組dna,濃度均為1ng/μl。3名漢族男性均知情同意。將步驟一中的標(biāo)準(zhǔn)品2800m水溶液替換為樣本一、樣本二或樣本三,其它步驟均不變。檢測結(jié)果見表3。結(jié)果表明,樣本一、樣本二和樣本三均獲得了完整的str分型結(jié)果。
且是隨機(jī)錯誤,而不是聚集在讀取的兩端;③數(shù)據(jù)可實(shí)時(shí)讀取;④通量很高(30x人類基因組有望在***內(nèi)完成);⑤起始DNA在測序過程中不被破壞;⑥樣品制備簡單又便宜;⑦可直接測序RNA。2、PacBioSMRT納米孔+熒光可逆終止dNTP技術(shù)原理:PacBioSMRT技術(shù)其實(shí)是應(yīng)用了邊合成邊測序的思想(使用4色熒光標(biāo)記4種堿基),其超長讀長的關(guān)鍵在于使用了活性持久且高保真的DNA聚合酶,并以SMRT芯片為測序載體(ZMW原理)。優(yōu)勢劣勢:①SMRT技術(shù)的測序速度很快,每秒約10個(gè)dNTP;②錯誤率較高,達(dá)到15%,出錯隨機(jī),可通過多次測序來進(jìn)行有效的糾錯(如使用Sparc對30X的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,錯誤率可達(dá)到);③原始DNA不被破壞;④讀長可達(dá)10kbp。3、HelicosHeliscope單分子熒光可逆終止技術(shù)原理:該技術(shù)基于邊合成邊測序的思想,將DNA隨機(jī)打斷成小片段分別進(jìn)行dNTP熒光標(biāo)記,經(jīng)過不斷地重復(fù)合成、洗脫、成像、淬滅過程完成測序。主要步驟:①制備:DNA打斷加polyA+Cy3②測序:dNTP熒光可逆終止特點(diǎn):①讀取長度約為30-35bp,每個(gè)循環(huán)的數(shù)據(jù)產(chǎn)出量為21-28Gb;在測序完成前,各小片段的測序進(jìn)度不同;②可根據(jù)同聚物的合成會導(dǎo)致熒光信號的減弱這一特點(diǎn)來推測同聚物的長度。邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)--伴隨診斷整體解決方案提供者,檢測技術(shù)平臺全涵蓋.
降低引物的擴(kuò)增效率,也需要重新設(shè)計(jì)并合成引物。3、初次復(fù)合擴(kuò)增時(shí),各個(gè)引物在反應(yīng)體系中的濃度均為μm;之后對引物濃度進(jìn)行調(diào)整,獲得進(jìn)行pcr擴(kuò)增時(shí)各個(gè)引物的**佳濃度。經(jīng)過上述步驟,獲得引物組合。引物組合由120條引物組成,用于檢測68個(gè)基因座。各個(gè)基因座的名稱、擴(kuò)增基因座對應(yīng)的引物名稱和引物的核苷酸序列依次見表1中第1列、第2列和第3列。進(jìn)行pcr擴(kuò)增時(shí)各個(gè)引物的**佳濃度見表1中第5列。表1各個(gè)基因座對應(yīng)的引物在hg38人類參考基因組(hg38人類基因組的信息見網(wǎng)址./goldenpath/hg38/bigzips/)中的pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的長度和核苷酸序列詳見表2。各個(gè)str基因座的pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的長度范圍分布見圖1。表2三、基于二代測序技術(shù)檢測68個(gè)基因座的試劑盒的制備基于二代測序技術(shù)檢測68個(gè)基因座的試劑盒包括引物混合物;引物混合物由步驟二制備的120條引物混合而成。實(shí)施例2、實(shí)施例1制備的試劑盒檢測標(biāo)準(zhǔn)品2800m的str分型及其應(yīng)用一、實(shí)施例1制備的試劑盒檢測標(biāo)準(zhǔn)品2800m的str分型1、dna樣本準(zhǔn)備取標(biāo)準(zhǔn)品2800m,用超純水稀釋,獲得濃度為1ng/μl的標(biāo)準(zhǔn)品2800m水溶液。2、pcr擴(kuò)增以標(biāo)準(zhǔn)品2800m水溶液為模板,采用實(shí)施例1步驟三制備的引物混合物進(jìn)行pcr擴(kuò)增,得到pcr擴(kuò)增產(chǎn)物。 PMS2抗體試劑 蘇蘇械備20180570號.重慶標(biāo)準(zhǔn)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺經(jīng)驗(yàn)豐富
邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)蛋白免疫產(chǎn)品開發(fā)平臺可提供基于IHC平臺的體外診斷試劑盒以及蛋白抗體原料一站式開發(fā)服務(wù)。遼寧多組學(xué)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺經(jīng)驗(yàn)豐富
成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFR)在多種惡性**中存在異常***,并與**的發(fā)***展密切相關(guān),已成為目前“不限*種”的熱點(diǎn)研究靶標(biāo)之一。至今已有4款靶向FGFR的抑制劑上市:國際***FDA批準(zhǔn)的泛FGFR抑制劑為強(qiáng)生的Balversa(Erdafitinib),同時(shí)獲批的伴隨診斷為QIAGENE基于PCR方法的FGFR2/3異常檢測;2020年獲批的Incyte公司的Pemigatinib為較早膽管*靶向藥物,其伴隨診斷為FoundationMedicine的FoundationOneCDxNGSpanel,檢測FGFR2融合或重排;2021年,又有連續(xù)兩個(gè)藥物Futibatinib和Infigratinib獲批,***攜帶FGFR2融合或重排的局部晚期或轉(zhuǎn)移性膽管*患者。伴隨診斷和生物標(biāo)志物的開發(fā)和驗(yàn)證,已成為患者分層/富集及藥物上市的“標(biāo)配”。基于綜合性轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究平臺,邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究針對FGFR抑制劑的藥物臨床研究提供從生物標(biāo)志物檢測到伴隨診斷產(chǎn)品開發(fā)的完整解決方案。 遼寧多組學(xué)邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)NGS平臺經(jīng)驗(yàn)豐富