G418又稱遺傳霉素,新霉素,對(duì)細(xì)菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有氨基苷類毒性,對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選。G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一種氨基糖苷類 ,這種氨基糖類的結(jié)構(gòu)和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似,在分子遺傳試驗(yàn)中,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染常用的抗性篩選試劑。它通過(guò)克制轉(zhuǎn)座子Tn601,Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對(duì)原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生東西,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞 ,也包括原生動(dòng)物和蠕蟲(chóng)。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后 ,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA ,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以普遍應(yīng)用。已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶(GGT)檢測(cè)試劑盒(重氮比色法)
鹽酸強(qiáng)力霉素溶液科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):1. 固體試劑的取用:取用固體藥品時(shí)藥匙必須是干凈的.一支藥匙不能同時(shí)取用兩種或兩種以上的試劑.藥匙每取完一種試劑后都必須用干凈的紙擦拭干凈,以備下次使用.藥匙的兩端為大小兩匙,取固體量較多時(shí)用大匙,較少時(shí)用小匙。2. 取用不定量(較多)液體——直接傾倒a. 瓶塞必須倒放在桌面上【防止藥品腐蝕實(shí)驗(yàn)臺(tái)或污染藥品】;b. 直接傾倒時(shí)瓶口必須緊挨試管口,試管45度,并且緩緩地倒【防止藥液損失】;c. 貼標(biāo)簽的一面必須朝向手心處【防止藥液灑出腐蝕標(biāo)簽】;d. 倒完液體后,要立即蓋緊瓶塞,并把瓶子放回原處,標(biāo)簽朝向外面【防止藥品潮解、變質(zhì)】。硼砂-碳酸鈉緩沖液(pH10.8-11.2)液體培養(yǎng)基接種向肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中接種少量菌體時(shí),其操作步驟基本與斜面接種時(shí)相同。
檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng):檢測(cè)試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為陰性對(duì)照或者空白;預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
氨芐青霉素為白色晶體或粉末,分子式是C16H19N3O4S,分子量為349.41。溶于稀酸和稀堿,微溶于水和甲醇,幾乎不溶于氯仿、96%乙醇、、乙酸乙酯和固定油。無(wú)臭,味苦。抗革蘭氏陽(yáng)性及陰性菌,用于分子生物學(xué)和組織培養(yǎng)(防止微生物污染和抗性篩選)。氨芐青霉素時(shí)常被用于分子生物學(xué)上,作為細(xì)菌(如大腸桿菌)吸收基因(如質(zhì)粒)的測(cè)試。測(cè)試會(huì)將一組基因,連同已編碼抗氨芐青霉素的基因插入細(xì)菌中。該細(xì)菌會(huì)被放于充滿氨芐青霉素的環(huán)境下培育,直至成功制造卞所需的基因。殺滅曲線的建立:每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
利福平溶液片有什么作用:【性狀】本品滴丸為暗紅色,緩沖液為無(wú)色澄明溶液。 【作用類別】 【藥理毒理】利福平為半合成廣譜殺菌劑,與依賴于DNA的RNA多聚酶的β亞單位牢固結(jié)合,克制細(xì)菌RNA的合成,防止該酶與DNA連接,從而阻斷RNA轉(zhuǎn)錄過(guò)程。 【藥代動(dòng)力學(xué)】利福平為脂溶性,易于進(jìn)入敏感菌細(xì)胞內(nèi)殺死敏感菌。眼部給藥吸收后可彌散至大部分體液和組織中,本品在肝臟中可被自身誘導(dǎo)微粒體氧化酶作用而迅速去乙?;蔀榫哂锌司钚缘拇x物,然后經(jīng)水解形成無(wú)活性的代謝物由尿排出。本品主要經(jīng)膽汁和腸道排出,亦可經(jīng)乳汁排出。利福平不能經(jīng)血液透析或腹膜透析除去。固體試劑的取用:直接傾倒時(shí)瓶口必須緊挨試管口,試管45度,并且緩緩地倒。黑色素脂褐素染色液(尼羅藍(lán)法)
丁胺卡那霉素給藥說(shuō)明:長(zhǎng)期用藥可能導(dǎo)致耐藥菌過(guò)度生長(zhǎng)。γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶(GGT)檢測(cè)試劑盒(重氮比色法)
緩沖溶液的緩沖能力:在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時(shí),緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說(shuō)明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc組成的緩沖溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關(guān)于這一點(diǎn)通過(guò)計(jì)算便可證實(shí)。但緩沖溶液組分的濃度不能太大,否則,不能忽視離子間的作用。組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時(shí),緩沖作用減小,緩沖能力降低,當(dāng)c(鹽)/c(酸)為1∶1時(shí)△pH較小,緩沖能力大。不論對(duì)于酸或堿都有較大的緩沖作用。緩沖溶液的pH值可用下式計(jì)算:此時(shí)緩沖能力大。緩沖組分的比值離1∶1愈遠(yuǎn),緩沖能力愈小,甚至不能起緩沖作用。對(duì)于任何緩沖體系,存在有效緩沖范圍,這個(gè)范圍大致在pKaφ(或pKbφ)兩側(cè)各一個(gè)pH單位之內(nèi)。γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶(GGT)檢測(cè)試劑盒(重氮比色法)