標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的正確使用:溯源性。溯源性是通過(guò)一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈,使測(cè)量結(jié)果能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn),通常是國(guó)家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)的特性。食品質(zhì)量分析中,很多分析結(jié)果是靠標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來(lái)溯源的,實(shí)驗(yàn)室在選購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)應(yīng)注意其證書是否能夠證明其對(duì)國(guó)家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性。有些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由于與待測(cè)樣品的物理化學(xué)特性不同,如塊狀與粒狀、固體與液體、基體不完全匹配等,雖然溯源性能夠達(dá)到要求,但分析結(jié)果的溯源性會(huì)受到影響。配制ph計(jì)的3mol/L的KCL溶液 ph計(jì)的ph電極在使用前都是被護(hù)套里的保護(hù)液保護(hù)著。Tris-甘氨酸-EDTA電泳粉劑(1×TGE,pH8.3)
檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng):檢測(cè)試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為陰性對(duì)照或者空白;預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。改良Harris蘇木素染色液當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí),有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用。
說(shuō)明?檢測(cè)試劑盒的具體規(guī)則:要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,能夠運(yùn)用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確認(rèn)(因?yàn)檎麴s水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),lmL的水能夠看作是lg、200L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其高量程和低量程進(jìn)行確認(rèn)。在運(yùn)用微量加樣器時(shí),汲取不同瓶子中液體后要更換頭,即便汲取規(guī)范品溶液。汲取液體時(shí)速度不易太快,檢測(cè)試劑盒避免發(fā)生氣泡,汲取的量不夠準(zhǔn)確。將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免頭和孔內(nèi)液體觸摸,可使頭上的液滴和孑L壁觸摸,液滴會(huì)自然流下去。吸入液體時(shí)的的辦法是吸兩檔打一檔,避免因?yàn)轭^的毛細(xì)效果使得部分液體不能流出而形成的誤差。
怎樣減少檢測(cè)試劑盒誤差?檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問(wèn)題的能力,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。使用校對(duì)過(guò)的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。洗滌徹底,如若洗板不徹底,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。每種細(xì)胞對(duì)G418的敏感性不同,一般變動(dòng)在100ug/ml~1000ug/ml范圍。
檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)為什么要設(shè)置復(fù)孔?計(jì)算平均值,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確;解決實(shí)驗(yàn)中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;計(jì)算CV值,對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作和檢測(cè)試劑盒的精密度進(jìn)行評(píng)估。加樣要準(zhǔn)確、快速。如果加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,檢測(cè)試劑盒直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí),固體只標(biāo)明試劑名稱,液體還須注名明濃度。Tris-甘氨酸電泳緩沖液(10×)
利福平溶液怎么配制:配制時(shí)每毫升可加入~5滴 10 N NaOH以助溶。Tris-甘氨酸-EDTA電泳粉劑(1×TGE,pH8.3)
檢測(cè)試劑盒樣品收集:血清:全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒液試管。血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血,血脂高樣品。組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。Tris-甘氨酸-EDTA電泳粉劑(1×TGE,pH8.3)