線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-10法)

殺滅曲線(xiàn)的建立：通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)），確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的較低濃度，從而篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。建立殺滅曲線(xiàn)至少選擇5個(gè)濃度。1、按照20-25%的細(xì)胞密度將未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2過(guò)夜培養(yǎng)（需要更高密度，可增加接種量）。2、根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。3、第2天換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基，每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。4、接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。5、按照每2天進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，來(lái)確定殺滅未轉(zhuǎn)染細(xì)胞的恰當(dāng)濃度。通常7-10天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的較低濃度為篩選用的工作濃度。注意事項(xiàng)：避免反復(fù)凍融。線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-10法)

檢測(cè)試劑盒運(yùn)用注意事項(xiàng):在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時(shí)間為15～20min即可。若顏色較淺，可延長(zhǎng)反響時(shí)間到30min。反之，則減短反響時(shí)間。反響停止液為2M硫酸，防止接觸皮膚。不要運(yùn)用過(guò)了有用日期的檢測(cè)試劑盒；也不要運(yùn)用過(guò)了有用期的試劑盒中的任何試劑，摻雜運(yùn)用過(guò)了有用期的檢測(cè)試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交流運(yùn)用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。試劑盒具有的幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；靈敏、特異的抗體。異染顆粒染色液(改良Albert法)BCA蛋白檢測(cè)試劑盒有許多優(yōu)點(diǎn)：檢測(cè)的靈敏度高。

試劑盒在生產(chǎn)過(guò)程中的辦法：質(zhì)量確保是一個(gè)雜亂的過(guò)程，許多重要的環(huán)節(jié)都會(huì)影響檢測(cè)質(zhì)量。在生產(chǎn)過(guò)程中，不同批次的試劑的質(zhì)量是確保完全一致非常困難，檢測(cè)試劑盒甚至經(jīng)過(guò)批檢驗(yàn)項(xiàng)目和成果也不同，因此有必要挑選和訂貨試劑長(zhǎng)批次，并小鼠檢測(cè)試劑盒確保保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)范能夠防止因試劑批號(hào)變化與質(zhì)量控制系統(tǒng)和雜亂的過(guò)程，從頭評(píng)價(jià)試劑從頭建立，并能確保成果的穩(wěn)定性；有效期短，運(yùn)用率低的試劑，應(yīng)小包裝，包裝，可每次都是采納，以防止重復(fù)凍融損壞試劑引起的。

丁胺卡那霉素溶液(Amikacin,50mg/ml) 產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 丁胺卡那霉又稱(chēng)阿米卡星（Amikacin） ，CAS 號(hào)為 37515-28-5，分子量為 585.603，是 一種氨基糖苷類(lèi)。阿米卡星克菌原理是與細(xì)菌 30S 亞基結(jié)合，阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)合成 而起到克菌作用。其克菌譜與慶大霉素相似，但對(duì)耐卡那霉素、妥布霉素和慶大霉素的細(xì)菌 包括綠膿桿菌和沙雷氏桿菌仍有效，臨床上可用于治好多種細(xì)菌傳染。 產(chǎn)品組成： 編號(hào) 名稱(chēng) 丁胺卡那霉素溶液 (Amikacin solution,50mg/ml) 使用說(shuō)明書(shū) 操作步驟（光供參考） ： 1、 根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求操作。 注意事項(xiàng)： 1、 注意無(wú)菌操作，避免污染。 2、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 有效期：12 個(gè)月有效。氨芐青霉素溶液配置：加入40ml滅菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。

檢測(cè)試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟有哪些呢？檢測(cè)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。丁胺卡那霉素給藥說(shuō)明：5%葡萄糖注射液或其他滅菌稀釋液100—200ml。異染顆粒染色液(改良Albert法)

固體試劑的取用:倒完液體后，要立即蓋緊瓶塞，并把瓶子放回原處。線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-10法)

檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)忌諱：濃洗刷液或許會(huì)有結(jié)晶析出，檢測(cè)試劑盒稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗刷時(shí)不影響成果。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋必定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)終乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器，并常常校正其正確性，以防止試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)目多，舉薦運(yùn)用排加樣。封板膜只限一次性運(yùn)用，以防止交叉污染。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)成果斷定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。從冷躲環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝進(jìn)密封袋中保存。線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-10法)