PAGE連續(xù)蛋白上樣緩沖液,科研專(zhuān)門(mén)***科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):1. 固體試劑的取用:取用固體藥品時(shí)藥匙必須是干凈的.一支藥匙不能同時(shí)取用兩種或兩種以上的試劑.藥匙每取完一種試劑后都必須用干凈的紙擦拭干凈,以備下次使用.藥匙的兩端為大小兩匙,取固體量較多時(shí)用大匙,較少時(shí)用小匙2. 取用不定量(較多)液體——直接傾倒a. 瓶塞必須倒放在桌面上【防止藥品腐蝕實(shí)驗(yàn)臺(tái)或污染藥品】;b. 直接傾倒時(shí)瓶口必須緊挨試管口,試管45度,并且緩緩地倒【防止藥液損失】;c. 貼標(biāo)簽的一面必須朝向手心處【防止藥液灑出腐蝕標(biāo)簽】。檢測(cè)試劑盒吸附性能好。亮綠染色液(1%)
pH緩沖溶液的效能指標(biāo):pH緩沖溶液抵抗外加強(qiáng)酸、強(qiáng)堿的能力可以用緩沖容量β來(lái)表示,緩沖容量的意義是,使1L緩沖溶液的pH增大1個(gè)單位時(shí)需加入的強(qiáng)堿(NaOH)的物質(zhì)的量(mol),或減小1個(gè)pH單位時(shí)時(shí)需加入的強(qiáng)酸(HCl)的物質(zhì)的量,顯然β越大,緩沖外加強(qiáng)酸強(qiáng)堿的能力就越大。β與pH、總濃度C及共軛弱酸堿的濃度比有關(guān)。式中的C為弱酸+弱酸鹽(或弱堿+弱堿鹽)的總濃度,顯然,總濃度越大,緩沖能力就越大。式中的兩個(gè)δ分別為弱酸HA、弱酸根A-(又稱(chēng)共軛堿)的分布分?jǐn)?shù)值,δ定義為其平衡濃度與總濃度之比(我以前在論壇中曾作過(guò)介紹),它們也是pH值的函數(shù)。數(shù)據(jù)學(xué)上可以證明:恒定C時(shí),當(dāng)兩個(gè)分布分?jǐn)?shù)值均等于0.5時(shí),緩沖容量較大,其實(shí)用意義是:選擇緩沖溶液體系時(shí),應(yīng)該選弱酸與弱酸鹽的濃度比接近1,而pH值仍能滿(mǎn)足配制要求的體系,對(duì)于弱堿及弱堿鹽溶液,也有同樣的要求。線(xiàn)粒體染色液(Altmann法)試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一。
BMC原代分離步驟:1) 抽取人的外周血于肝素抗凝管中,取足5mL新鮮血液,加入PBS按1:1稀釋血液(一般**管2mL+2mL)。2) 取淋巴細(xì)胞分離液5mL于15mL滅菌離心管中待用。3) 吸取稀釋血液,在離分層液上方1cm處,沿試管壁徐徐加入,使稀釋血液重疊于分層液上,并與分離液形成明顯界面。4) 室溫,離心2000rpm,20min。此時(shí)離心管中形成5層:較上面是血漿,血漿層和淋巴細(xì)胞分離液之間是淋巴細(xì)胞層呈白膜狀。5) 小心吸取中間呈白膜狀的單個(gè)核細(xì)胞層,盡量全部吸出單個(gè)核細(xì)胞。加5倍以上體積的PBS洗2次,每次離心1500rpm,10min。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的正確使用:不確定度表示被測(cè)量值的分散性,不同的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)其特性的不確定度也不同。在選擇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮其對(duì)考慮其對(duì)預(yù)期分析結(jié)果要求的不確定度水平的影響。除生產(chǎn)者確定的不確定度外,標(biāo)準(zhǔn)樣品的不同處理過(guò)程也會(huì)影響分析結(jié)果的不確定度,例如標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與分析樣品基體之間有差異時(shí),或使用與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值方法不同的分析方法時(shí),可能其不確定度與生產(chǎn)者提供的會(huì)有差異。使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí),其不確定度并不是越小越好,還應(yīng)當(dāng)考慮供應(yīng)狀況、成本、預(yù)期使用的化學(xué)適用性和物理適用性。pH緩沖溶液有何用途:檢測(cè)pH電極的性能。
檢測(cè)試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)()。已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。檢測(cè)試劑盒安全性:避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取檢測(cè)試劑盒里的任何成份。稀釋過(guò)的血液樣本小心鋪到Ficoll分離液上面。耐爾藍(lán)染色液(Cain法)
PH電極的保護(hù)液為了測(cè)量時(shí)會(huì)更加精確。亮綠染色液(1%)
配制ph計(jì)的3mol/L的KCL溶液 ph計(jì)的ph電極在使用前都是被護(hù)套里的保護(hù)液保護(hù)著,是為了保持其原有的ph電勢(shì)平衡不變,為了測(cè)量時(shí)會(huì)更加精確。這里面就是PH電極的保護(hù)液,即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己學(xué)會(huì)如何配置,使ph電極浸泡在保護(hù)液里,這樣就能快速回復(fù)其活性,又能很好的測(cè)量了。配制ph計(jì)保護(hù)液——3mol/L的KCL溶液步驟: 1、計(jì)算:KCL摩爾質(zhì)量74.5g/moL, 則KCL質(zhì)量=3mol×74.5g/mol=223.5g; 2、 稱(chēng)量:用分析天平稱(chēng)量KCL=223.5g,注意分析天平的使用; 3、 溶解:在燒杯中用100ml蒸餾水使之完全溶解,并用玻璃棒攪拌; 4、 轉(zhuǎn)移,洗滌:把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶,用容量瓶瓶口較細(xì)的。亮綠染色液(1%)