試劑抗干擾作用的合理性有些液體雙試劑,其實(shí)質(zhì)并不真正具備抗干擾的能力而只是解決了試劑的液體化和穩(wěn)定性問題。如,ALT檢測試劑盒中,NADH在pH7.5~7.8水溶液中極不穩(wěn)定,在pH>8.7時(shí)才能穩(wěn)定保存。因此,為了保證試劑穩(wěn)定性,液體雙試劑的R1需要維持pH>8.7,但此時(shí)LDH活性很大程度下降,就失去消除內(nèi)源性酸的功能,只有加入試劑R2后,反應(yīng)混合液的pH下降至LDH適pH,在經(jīng)過延遲時(shí)間60 S后,才能消除內(nèi)源性酸的干擾。再如,Tfinder反應(yīng)中抗Vc干擾問題:由于維生素c易氧化,樣品中Vc會(huì)競爭反應(yīng)生成的過氧化氫,而產(chǎn)生負(fù)干擾。因此,在試劑R1中加入抗壞血酸氧化酶,這種方法是有效的,但不一定有很大的意義。固體試劑的取用:取用固體藥品時(shí)藥匙必須是干凈的。麗春紅S染色液(1×Ponceau S)
微生物的培養(yǎng)特征是指微生物培養(yǎng)在培養(yǎng)基上所表現(xiàn)出的群體形態(tài)和生長情況。一般可用斜面、液體和半固體培養(yǎng)基來檢驗(yàn)不同微生物的培養(yǎng)特征。它們培養(yǎng)在斜面培養(yǎng)基上,可以呈絲線狀、刺毛狀、串珠狀、疏展?fàn)?、樹枝狀或假根狀(圖Ⅶ-6)。生長在液體培養(yǎng)基內(nèi),可以呈混濁、絮狀、粘液狀、形成菌膜、上層清晰而底部顯沉淀狀。穿刺培養(yǎng)在半固體培養(yǎng)基中,可以沿接種線向四周蔓延;或只沿線生長;也可上層生長得好,甚至連成一片,底部很少生長;或底部長得好,上層甚至不生長。利用微生物的培養(yǎng)特征,可以作為它們的種類鑒定和識別純培養(yǎng)是否污染的參考。麗春紅S染色液(1×Ponceau S)固體試劑的取用:藥匙每取完一種試劑后都必須用干凈的紙擦拭干凈。
檢測試劑盒變質(zhì)的原因:樣本因素。標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。操作因素。標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
液體固體試劑正確取用試劑的方法過程:固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細(xì)口瓶中(或滴瓶中),見光易分解的試劑(如硝酸銀)應(yīng)裝在棕色瓶中,每一種試劑都貼有標(biāo)簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。(實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí),固體只標(biāo)明試劑名稱,液體還須注名明濃度)。固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時(shí),可把固體放在紙上或表面皿上在臺秤上稱量。要準(zhǔn)確稱量時(shí),則用稱量瓶在天平上進(jìn)行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種,使用時(shí)要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內(nèi)液體凹面的低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑。
緩沖溶液的計(jì)算分為兩大類:(1)已知共軛酸堿的濃度或質(zhì)量,計(jì)算pH值。(2)已知pH值,計(jì)算配制時(shí)要滿足的濃度和質(zhì)量配制緩沖溶液時(shí),有多種組合的方法,常見的有以下幾種(1)兩種溶液混合:如,NH3+NH4Cl溶液,NaOH溶液 +NH4Cl溶液,NH3+HCl溶液。(2)固體試劑+溶液:如,NH3+NH4Cl固體,NaOH固體 +NH4Cl溶液,HAc+NaAc固體。(3)兩種固體試劑溶解混合:如,NaOH固體 +NH4Cl固體,Na2CO3固體+NaHCO3固體。由此可見,緩沖溶液的計(jì)算類型是很豐富的。實(shí)驗(yàn)中的配制一般是按共軛酸堿的量來稱取或量取試劑后,再溶解混合到指定體積。但分析化學(xué)學(xué)習(xí)中的計(jì)算類型則可以演繹出十幾種計(jì)算情況。檢測試劑盒控制洗刷量和洗刷次數(shù)的另一種方法是參與過量的洗刷液。魯哥氏染色液(Lugol's碘液,5%,無菌)
早期的化學(xué)試劑只是指“化學(xué)分析和化學(xué)試驗(yàn)中為測定物質(zhì)的組分或組成而使用的純粹化學(xué)藥品”。麗春紅S染色液(1×Ponceau S)
弱酸-弱堿型緩沖溶液的構(gòu)成與配制。這類緩沖溶液的組成為:弱酸+弱酸鹽(即共軛堿)、弱堿+弱堿鹽(即共軛酸)。常見的實(shí)例有:HAc-NaAc、HAc-NH4Ac(微酸性)、NH4Cl-NH3.這類緩沖溶液的實(shí)驗(yàn)室配制方法一般是根據(jù)溶液組成和濃度要求,直接稱取或量取弱酸、弱酸鹽溶液或弱堿、弱堿鹽溶液來配制。其實(shí),這類緩沖溶液還可以用強(qiáng)酸與弱堿、強(qiáng)堿與酸來配制,歸納起來,應(yīng)該有三種配制方法:(1)弱酸+弱酸鹽,弱堿+弱堿鹽例如,HAc-NaAc、NH4Cl-NH3(2)弱酸(過量)+強(qiáng)堿(適量),弱堿(過量)+強(qiáng)酸(適量)例如,HAc(過量)-NaOH(適量)、NH3(過量)-HCl(適量)。這類緩沖溶液需要的共軛堿(NaAc)或共軛酸(NH4Cl)是通過反應(yīng)后產(chǎn)生的。(3)弱酸鹽(過量)+強(qiáng)酸(不足量)或弱堿鹽(過量)+強(qiáng)堿(不足量)例如,NaAc(過量)+HCl(適量),NH4Cl(過量)+NaOH(適量)緩沖溶液需要的弱酸(HAc)或弱堿(NH3)則通過反應(yīng)后產(chǎn)生。麗春紅S染色液(1×Ponceau S)