檢測試劑盒標(biāo)本保存方法:標(biāo)本管中增加物質(zhì)的影響??鼓齽?、酶抑制劑及快速分別血清的分別膠等均對測定有必定煩擾作用。標(biāo)本溶血。由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號的測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,檢測試劑盒煩擾測定作用。為打敗上述煩擾作用,標(biāo)本搜集時有必要留意避免溶血。標(biāo)本保存不妥。 在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體,在間接法測定中會導(dǎo)致本底過深、乃至形成假陽性;標(biāo)本放置時刻過長(如一日以上),有時抗原或抗體免疫活性削弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為打敗上述煩擾,測定的血清標(biāo)本宜為新鮮搜集;如不能立即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應(yīng)充沛混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不行激烈振蕩。檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用。胰蛋白酶-CaCl2溶液(0.1%)
檢測試劑盒運用注意事項:在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反響時間到30min。反之,則減短反響時間。反響停止液為2M硫酸,防止接觸皮膚。不要運用過了有用日期的檢測試劑盒;也不要運用過了有用期的試劑盒中的任何試劑,摻雜運用過了有用期的檢測試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交流運用不同批號試劑盒中的試劑。試劑盒具有的幾個優(yōu)點:吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;靈敏、特異的抗體。原生質(zhì)體緩沖液固體試劑的取用:直接傾倒時瓶口必須緊挨試管口,試管45度,并且緩緩地倒。
檢測試劑盒實驗如何改進(jìn)錯誤?評價試劑的實用性。試劑的穩(wěn)定性對準(zhǔn)確度非常重要。在啟用檢測試劑盒之前,應(yīng)重復(fù)檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑只在試劑符合要求后才干使用。操作前仔細(xì)閱讀檢測試劑盒說明書。嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作。不同批號的試劑不混合。值得改善的是,只要通過反復(fù)的試驗,如洗盤的數(shù)量,才干加以改善。加樣要準(zhǔn)確、快速。樣品添加的不準(zhǔn)確度和酶制劑用量的不確認(rèn)度直接影響顯色效果。此外,顯色深度和A值的確認(rèn)與顯色劑和終液體的加入量有關(guān),因此樣品的裝載應(yīng)慎重。檢測試劑盒需要在必定時間內(nèi)完結(jié)采樣的試驗,如果采樣速度慢,會呈現(xiàn)差錯,試劑會露出很長時間,特別是當(dāng)室溫過高時,保質(zhì)期會縮短乃至失效。
從試劑瓶取用試劑,用左手持量筒(或試管),并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶(注意:試劑標(biāo)簽應(yīng)向手心避免試劑沾污標(biāo)簽),慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時,視線應(yīng)與液體凹面的低處保持水平。倒完后,應(yīng)將試劑瓶口在容器壁上靠一下,再將瓶子豎直,以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子,取出后應(yīng)倒置桌上,如瓶塞頂不是扁平的,可用食指和中指(或中指和無名指)醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理將瓶塞夾?。ɑ蚍旁跐崈舻谋砻婷笊希?,切不可將它橫置桌上。取用試劑后應(yīng)立即蓋上原來的瓶塞,把試劑瓶放回原處,并使試劑標(biāo)簽朝外,應(yīng)根據(jù)所需用量取用試劑,不必多取,如不慎取出了過多的試劑,只能棄去,不得倒回或放回原瓶。以免沾污試劑。檢測試劑盒控制洗刷量和洗刷次數(shù)的另一種方法是參與過量的洗刷液。
已知準(zhǔn)確濃度的溶液,在容量分析中用作滴定劑,以滴定被測物質(zhì)。如果試劑符合基準(zhǔn)物質(zhì)的要求 (組成與化學(xué)式相符、純度高、穩(wěn)定),可以直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液,即準(zhǔn)確稱出適量的基準(zhǔn)物質(zhì),溶解后配制在一定體積的容量瓶內(nèi)??捎上率接嬎銘?yīng)稱取的基準(zhǔn)物質(zhì)的重量W:W=ΜV·基準(zhǔn)物質(zhì)的摩爾質(zhì)量。式中Μ和V分別為所需配制的溶液的摩爾濃度和體積。利用上式可計算出標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。如果試劑不符合基準(zhǔn)物質(zhì)的要求,則先配成近似于所需濃度的溶液,然后再用基準(zhǔn)物質(zhì)準(zhǔn)確地測定其濃度,這個過程稱為溶液的標(biāo)定。BMC原代分離步驟:取淋巴細(xì)胞分離液5mL于15mL滅菌離心管中待用。NP-40溶液(10%,無菌)
為了避免溶液灑出,同時不要讓溶液在刻度線上面沿瓶壁流下,用玻璃棒引流。胰蛋白酶-CaCl2溶液(0.1%)
紅霉素溶液:紅霉素(Erythromycin)是由紅霉素鏈霉菌(Streptomyces erythreus)所產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類克菌素,分子量為733.93。紅霉素對革蘭陽性菌(如綠色鏈球菌、葡萄球菌、炭疽桿菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌、梭狀芽孢桿菌等)具有很好的克菌性。另外,紅霉素對某些革蘭陰性菌也有一定的抑菌作用。紅霉素抑菌作用在于其與細(xì)菌的聚核糖體結(jié)合而克制肽鏈的延伸,對青霉素產(chǎn)生耐藥性的菌株,對紅霉素敏感。臨床上,紅霉素常用于耐青霉素的金葡菌傳染及對青霉素過敏的金葡菌傳染。Leagene Erythromycin solution主要用于科研領(lǐng)域,不用于臨床診斷或其他用途。胰蛋白酶-CaCl2溶液(0.1%)