在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時(shí),緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說(shuō)明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc組成的緩沖溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關(guān)于這一點(diǎn)通過(guò)計(jì)算便可證實(shí)。但緩沖溶液組分的濃度不能太大,否則,不能忽視離子間的作用。組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時(shí),緩沖作用減小,緩沖能力降低,當(dāng)c(鹽)/c(酸)為1∶1時(shí)△pH小,緩沖能力大。不論對(duì)于酸或堿都有較大的緩沖作用。固體試劑的取用:一支藥匙不能同時(shí)取用兩種或兩種以上的試劑。尿蛋白定性檢測(cè)試劑盒(磺基水楊酸法)
試劑盒實(shí)驗(yàn)技巧:濃洗刷液或許會(huì)有結(jié)晶分出,檢測(cè)試劑盒稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗刷時(shí)不影響效果。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,核算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并經(jīng)常校正其正確性,以避免實(shí)驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)目多,舉薦運(yùn)用排加樣。封板膜只限一次性運(yùn)用,以避免交叉污染。嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)效果斷定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。Gimenez染色液浸洗劑是指藥物與適宜的溶劑或分散介質(zhì)制成的對(duì)動(dòng)物進(jìn)行全身浸浴的液體試劑。
hochest染色和DAPI染色有什么區(qū)別:1、每個(gè)染料有自己獨(dú)特的激發(fā)譜線和發(fā)射譜線.這也是以上兩個(gè)染料的主要區(qū)別. 另外Hoechest 33258 是膜透性的,因此在活細(xì)胞時(shí)候能輕松進(jìn)入;DAPI是半透性的,有選擇性的進(jìn)入.因此Hoechest 33258 一般用來(lái)染活細(xì)胞,可以長(zhǎng)驅(qū)直入;DAPI一般是染固定細(xì)胞.2、兩者都可以用紫外看,參見以下的激發(fā)發(fā)射波長(zhǎng)Hoechst 33258的較大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm,較大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,較大激發(fā)波長(zhǎng)為352nm,較大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。DAPI的較大激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,較大發(fā)射波長(zhǎng)為488nm;DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,較大激發(fā)波長(zhǎng)為364nm,較大發(fā)射波長(zhǎng)為454nm。
檢測(cè)檢測(cè)試劑盒操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本檢測(cè)試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。液體試劑的取用方法試劑瓶取用試劑,用左手持量筒(或試管),并用大姆指指示所需體積刻度處。
配制ph計(jì)的3mol/L的KCL溶液 ph計(jì)的ph電極在使用前都是被護(hù)套里的保護(hù)液保護(hù)著,是為了保持其原有的ph電勢(shì)平衡不變,為了測(cè)量時(shí)會(huì)更加精確。這里面就是PH電極的保護(hù)液,即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己學(xué)會(huì)如何配置,使ph電極浸泡在保護(hù)液里,這樣就能快速回復(fù)其活性,又能很好的測(cè)量了。配制ph計(jì)保護(hù)液——3mol/L的KCL溶液步驟: 1、計(jì)算:KCL摩爾質(zhì)量74.5g/moL, 則KCL質(zhì)量=3mol×74.5g/mol=223.5g; 2、 稱量:用分析天平稱量KCL=223.5g,注意分析天平的使用; 3、 溶解:在燒杯中用100ml蒸餾水使之完全溶解,并用玻璃棒攪拌; 4、 轉(zhuǎn)移,洗滌:把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶,用容量瓶瓶口較細(xì)的。液體試劑易于分劑量,服用方便。磷酸鈉緩沖液(0.1mol/L,pH5.8-8.0)
試劑的穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確度非常重要。尿蛋白定性檢測(cè)試劑盒(磺基水楊酸法)
如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢?第一種方法是采用線性稀釋,一般來(lái)講,抗原和捕獲抗體、檢測(cè)抗體之間的結(jié)合作用很強(qiáng),樣品濃度被稀釋并不影響它們的結(jié)合,而造成基質(zhì)效應(yīng)的非特異結(jié)合的力要弱很多,如果不斷稀釋樣品,非特異結(jié)合造成的干擾會(huì)逐步減少,測(cè)量值也更接近真實(shí)值。沒有基質(zhì)效應(yīng)時(shí),無(wú)論如何稀釋,測(cè)量值都和真實(shí)值吻合。而有基質(zhì)效應(yīng)時(shí),稀釋會(huì)造成非特異性結(jié)合比例的減少,測(cè)量值也相應(yīng)地產(chǎn)生很大改變。第二種方法是摻入回收率實(shí)驗(yàn),將低、中和高濃度的分析物摻入到已測(cè)定過(guò)濃度的樣本中,摻入前后實(shí)測(cè)到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率,回收率以百分比的形式呈現(xiàn)?;厥章式橛?0-120%,才符合標(biāo)準(zhǔn)。尿蛋白定性檢測(cè)試劑盒(磺基水楊酸法)